ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………… 3

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………… 12

1.1. Этиология и патогенез сахарного диабета 2 типа…………………… 12

1.2. Генетические основы сахарного диабета 2 типа…………………… 16

1.3. Взаимосвязь ожирения и его молекулярно-генетических маркеров с

сахарным диабетом 2 типа…………………………………………………… 22

1.4. Роль полиморфизма генов липидного обмена как факторов риска развития
сахарного диабета 2 типа……………………………………………………. 28

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ………………. 33

2.1. Дизайн исследования……………………………………………………. 33

2.2. Общая характеристика исследуемых групп…………………………… 36

2.3. Методы исследования…………………………………………………… 36

2.3.1. Общеклинические методы……………………………………………. 38

2.3.2. Молекулярно-генетический анализ………………………………..…. 39

2.4. Статистическая обработка данных…………………………………….. 41

ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ
ДИАБЕТОМ 2 ТИПА…………………………………………………….… 44

ГЛАВА 4. АНАЛИЗ АССОЦИАЦИЙ ИССЛЕДУЕМЫХ ПОЛИМОРФНЫХ
ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2
ТИПА……………………………………………………………….……….. 60

ГЛАВА 5. АНАЛИЗ ГЕНЕТИЧЕСКИХ КОМБИНАЦИЙ………………… 97

ЗАКЛЮЧЕНИЕ………………………………………………………………. 103

ВЫВОДЫ……………………………………………………………………… 112

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ……………………………………… 114

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ…………………………………………………… 115

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………. 117

Характеристика групп исследуемых.
Критерии включения в основную группу:
1. Наличие информированного согласия на участие в исследовании.
2. Принадлежность к этнической группе русских, татар, башкир.
3. Проживание от момента рождения в Республике Башкортостан.
4. Возраст старше 40 лет.
5. Диагноз сахарного диабета 2 типа, установленный по критериям ВОЗ
(1999).
6. Наличие сахароснижающей терапии.
Критерии исключения для основной группы:
1. Возраст до 40 лет.
2. Клинические признаки других типов сахарного диабета.
3. Наличие родства с другими участниками исследования.
4. Беременность, лактация.
Критерии включения в контрольную группу:
1. Наличие информированного согласия на участие в исследовании.
2. Принадлежность к этнической группе русских, татар, башкир.
3. Проживание от момента рождения в Республике Башкортостан.
4. Возраст старше 40 лет.
Критерии исключения для контрольной группы:
1. Возраст до 40 лет.
2. Наличие клинических и лабораторных (гипергликемия, повышение
HbA1c) признаков сахарного диабета.
3. Наличие родства с другими участниками исследования.
4. Беременность, лактация.
Этническую принадлежность выясняли путем индивидуального опроса,
учитывая данные до третьего поколения.

Дизайнисследования(одномоментноесравнительноеисследование)
схематично представлен на рисунке 1.

Рисунок 1 Дизайн исследования
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведено генотипирование 900 участников исследования. Из 900
испытуемых 450 имели СД2, а 450 составляли группу контроля, т.е. не имели СД2
и их толерантность к глюкозе была в пределах нормы. По полу и ИМТ группы
были сопоставимы, все испытуемые относились к различным этническим группам
(татары, башкиры, русские) (таблица 1).
Таблица 1
Общая характеристика групп исследуемых
ПоказателиОсновная группаГруппа контроля
Кол-воВсего450450
обследуемых мужчины165 (36,7%)148 (32,9%)
женщины285 (63,3%)302 (67,1%)
Этническийтатары200200
составрусские150150
башкиры100100
Возраст, Ме (25; 75)63,0 (57,0; 68,0) лет53,0 (46,3; 61,0) лет
Дебют СД2, Ме (25; 75)54,0 (48,0; 61,0) лет-
Стаж СД2, Ме (25; 75)6,0 (3,0; 11,0) лет-
Местосельская местность66,7%66,7%
проживаниягород33,3%33,3%
Масса теланормальная78 (20,5%)122 (31,0%)
избыточная148 (39,1%)168 (42,6%)
ожирение I степени105 (27,7%)76 (19,3)
ожирение II степени34 (9,0%)18 (4,6%)
ожирение III степени14 (3,7%)10 (2,5%)
Отягощенная наследственность по СД2135 (30%)-

Проведена сравнительная оценка метаболических особенностей пациентов с
СД2 и контрольной группы. Установлено, что участники основной группы в
79,5% случаев имели избыток массы тела или ожирение. Выявлено, что чаще
ожирением страдали татары (нормальную массу тела имели только 11,5%), на
втором месте по частоте ожирения были русские (нормальная масса тела у
21,7%), реже – башкиры – 46,8% пациентов. Полученные результаты согласуются
с данными литературы о фенотипических особенностях больных СД2. Пациенты
основной группы в 30% случаев имели отягощенную по СД2 наследственность
(таблица 1).
Сравнительный анализ показал, что в группе татарнаследственная
предрасположенность к СД2 выявлена чаще – в 37% случаев, чем у русских – в
22,6%, р=0,0005, и башкир –в 27%, р=0,0223. Среди татар и русских семейный
анамнез по СД2 установлен чаще по линии матери, у башкир такая тенденция
отсутствует. У всех пациентов основной группы гликемия как натощак, так и
после еды превышала нормальные показатели.
Проведенный сравнительный межгрупповой анализ липидного спектра
в этнических группах показал, что у татар и русских больных СД2 содержание
ОХС было выше показателя контрольной группы здоровых лиц и целевых
показателей для больных СД2. В этнической группе башкир уровни ОХС
превышали общепопуляционные и целевые показатели для больных СД2, но не
различались у больных СД2 и здоровых. Установлены и межгрупповые различия
липидограммы (таблица 2).
Учитывая, что СД2 характеризуется развитием микро- и макрососудистых
осложнений, был проведен анализ частоты встречаемости ДР, ДН, ДП. ДП
диагностирована у 33,5%: у татар в 49% случаев – чаще, чем в группе русских –
18%, р=0,0000 и башкир – 26%, р=0,0000. ДР установлена в 31,5% случаев: у
татар – в 44%, что чаще, чем в группе русских – 29%, р=0,0000 и башкир – 25%,
р=0,000. ДН – у 18,4% больных СД2: 38% – у татар, что чаще, чем в группе
русских – 1,3%, р=0,0000 и башкир – 5%, р=0,0000.
Для выявления клинико-метаболических особенностей течения СД2 в
исследуемых этнических группах был проведен корреляционный анализ.
Установленные связи отражают этиопатогенетические особенности дебюта и
прогрессирующий характер течения СД2. Так в этнической группе татар
заболеваемость СД2 характерна для более старшей возрастной группы r=0,78,
p=0,000, однако, чем моложе возраст дебюта СД2, тем чаще прослеживается связь
с наследственной отягощенностью по СД2 (r=0,31, p=0,000).
Таблица 2
Сравнительная характеристика основных показателей липидного обмена
ЦелевыеnНациональ-ОсновнаяГруппар1р2
показателиностьгруппаконтроля
(общепопуляциMeMe
онный/СД2)(25; 75)(25; 75)

ОХС, ммоль/л200Татары5,3 (4,7; 6,1)5,1 (4,7; 5,4)0,00090,0012*
(≤5,5/<4,5)150Русские5,6 (4,8; 6,8)4,9 (4,7; 5,5)0,00000,35450 100Башкиры5,7 (4,8; 7,1)6,1 (5,1; 7,5)0,39300,0261+ ТГ, ммоль/л200Татары1,331,320,87730,0903* (≤1,7/<1,7)(0,96; 1,93)(1,10; 2,07) 150Русские1,601,510,60650,66350 (1,54; 1,89)(1,30; 2,00) 100Башкиры1,912,00,85220,0003+ (1,40; 3,07)(1,38; 2,73) ЛПВП,200Татары1,131,100,05470,7853* ммоль/л(0,88; 1,42)(0,85; 1,30) (ж.1,2; м.1,0/ 150Русские1,151,140,09660,33510 ж.1,3; м.1,0)(1,0; 1,4)(0,90; 1,33) 100Башкиры1,211,260,08300,0414+ (1,15; 1,33)(1,17; 1,90) ЛПНП,200Татары2,753,200,99140,0060* ммоль/л(2,10; 4,09)(2,11; 3,60) (≤3,5/<2,5)150Русские3,553,000,04450,99380 (3,21; 4,72)(2,80; 3,53) 100Башкиры3,613,700,68580,0002+ (3,08; 4,9)(3,03; 4,89) Примечание: р1 – достоверность различий между основной группой и группой контроля; р2 – достоверность различий между этническими группами; р *2 – достоверность различий между основной группы татар с русскими; р +2 – достоверность различий между основной группой татар с башкирами; р 02 – достоверность различий между основной группой русских с башкирами. При наличии фактора наследственности у больных чаще развиваются ДР (r=0,22, p=0,001), ГБ (r=0,17, p=0,001), ЦВЗ (r=0,15, p=0,003), ДН (r=-0,2, p=0,0037). Это можно объяснить наличием корреляций между возрастом дебюта СД2 и уровнем С-пептида: чем моложе возраст дебюта, тем ниже уровень С-пептида (r=0,19, p=0,005). С увеличение стажа СД2 уровень С- пептида снижается (r=-0,23, p=0,0008), падает СКФ (r=-0,14, p=0,04), нарастает степень ХБП (r=0,78, p=0,0000), чаще развивается ДР (r=0,79, p=0,0000). Подтверждается частое сочетание микроангиопатий: ДР сочетается с ДН (r=0,76, p=0,0000), ДП (r=0,67, p=0,0000), а ДН с ДП(r=0,61, p=0,0000). Установлена обратная корреляция низкого уровня С-пептида с развитием ДР (r=-0,21, p=0,002), ДН (r=-0,18, p=0,008), ДП (r=-0,19, p=0,005). Положительная корреляция СКФ и С-пептида свидетельствует о его защитной роли в развитии ДН. Чем раньше развивается СД2, тем более выражена ХБП в процессе эволюции СД2. Установлена отрицательная корреляция (r=-0,21, p=0,003) между содержанием ЛПНП и СКФ, что подтверждает патогенетическую роль дислипидемии в развитии ДН. При развитии СД2 в среднем возрасте у пациентов наблюдается более высокий ИМТ, свидетельствующий о роли ожирения, как фактора риска СД2 (r=0,21, p=0,002), чем выше ИМТ, тем моложе дебют (СД2 r=-0,17, p=0,01). ИМТ положительно коррелирует с частотой ЦВЗ (r=0,28, p=0,03),однако ОНМК реже встречается у лиц с избытком массы тела (r=-0,15, p=0,032). Чем моложе возраст больного, тем реже диагностируется ИБС (r=0,53, p=0,0000). Установлена обратная связь ИБС с наличием ДР, ДН, ДП, но положительная с АГ (r=0,29, p=0,0000) и наличием ХБП (r=0,18, p=0,01), это подтверждает роль АГ и ХБП как дополнительных факторов риска ИБС в более молодом возрасте. Получены интересные данные об эволюции макроангиопатий: так установленаотрицательнаясвязьмеждувозрастомпациента(r=-0,26, p=0,0001), возрастом дебюта СД2 (r=-0,2, p=0,003) с частотой встречаемости ГБ упациентов,атакжеположительнаякорреляцияснаследственной отягощенностью по СД2 (r=0,17, p=0,01), то есть у пациентов с наследственной отягощенностью по СД, с манифестацией в более молодом возрасте чаще имеет место АГ, сочетающаяся с ИБС и ЦВЗ. Следует отметить, что среди пациентов с СД2 с ПИКС чаще встречались женщины r=0,16, p=0,02. У женщин чаще развивается ХБП r=0,28, p=0,0000. Найдена связь влияния ДП на развитие и прогрессированиемикроангиопатий:ДР(r=0,67,p=0,0000),ДН (r=0,61,p=0,0000); но при ДП реже встречаются макроангиопатии - ИБС (r=0,15, p=0,027),ЦВЗ(r=0,24,p=0,0007),чтоподтверждаетразличиевих этиопатогенезе. ДР реже сочетается с ИБС (r=-0,2, p=0,002), ЦВЗ (r=-0,27, p=0,002). Выявлено, что ОНМК чаще развивается у пациентов СД2 с отсутствием ожирения (r=-0,15, p=0,031). В группе русских получены общие для популяции больных СД2 связи, определяющие характер дебюта и прогрессирования СД2. С возрастом больных чащевстречаетсяИБС(r=0,24,p=0,008),ГБ(r=0,23,p=0,01), гипертриглицеридемия (r=0,5, p=0,04), но реже ЦВЗ (r=-0,29, p=0,002). Выявлено, что ГБ среди женщин встречается реже r=-0,23, p=0,013. ИМТ ассоциирован с наследственной предрасположенностью к СД2 r= 0,24, p=0,009. Выявленная положительная корреляция ИМТ с частотой развития ГБ r= 0,83, p=0,0000, ОХС r-0,83, p=0,0000. При наследственной отягощенности функция β-клеток нарушена в большей степени, что отражается на росте HbA1C r= 0,57, p=0,008. Установлена положительная корелляция дислипидемии (повышения ОХС) и HbA1c r=0,71, p=0,045 и уровня глюкозы r=0,67, p=0,003, что подтверждает влияние липотоксичности на функцию β-клеток и повышение степени нарушения углеводного обмена. Обратная связь ДР и содержанием HbA1с r=-0,46, p=0,040 может свидетельствовать о негативном влиянии низкого уровня гликемии на развитие и прогрессирование ДР. Отрицательная корреляция ДП и ЦВЗ видимо свидетельствуетоботсутствиипатогенетическойсвязимеждуэтими заболеваниями r=-0,45, p=0,0000. Полученные данные об отрицательной связи между содержанием ТГ и СКФ еще раз подтверждают участие дислипидемии в прогрессировании ХБП и ДН. В группе башкир выявленные связи не противоречат установленным патогенетическиммеханизмамразвитиямакро-имикрососудистых осложнений СД2. Чем старше возраст дебюта СД2, тем реже выявляются микроангиопатии: ДР r=-0,24, p=0,05, ДН r=-0,26, p=0,04,тем ниже СКФ r=-0,4, p=0,005. Эти связи подтверждаются корреляцией со стажем СД2. Фактор наследственности влияет на развитие макроангиопатий: ИБС r=0,32, p=0,009, ГБ r=0,3, p=0,014, ДП r=0,25, p=0,041, развитие дислипидемии, о чем свидетельствует положительная связь с увеличением ЛПНП r=0,32, p=0,044. Найденные положительные связи частоты сочетания ДР r=0,77, p=0,0000 и ДН r=0,35,p=0,004сДПвозможноимеютпатогенетическийхарактер. Установленная положительная корреляция ДН и развития ИБС r=0,24, p=0,05 хорошо известна, но найдена только в популяции башкир. Выявлены ранее неустановленные положительные связи частоты развития ДП и выявляемости ИБС r=0,26, p=0,034, ЦВЗ r=0,3, p=0,01, что может свидетельствовать о влиянии нейропатии на развитие макроангиопатий: ИБС, ЦВЗ. Атеросклероз при СД2 носит универсальный, системный характер: ИБС сочетается с ЦВЗ r= 0,29, p=0,01, ГБ r=0,28, p=0,03, а АГ часто приводит к инфаркту миокарда r= 0,27, p=0,03. Уровень гликемии положительно коррелирует с ДР r=0,38, p=0,04, ДП r=0,43, p=0,023. Таким образом, анализ клинической характеристики больных СД2 в этнических группах русских, татар, башкир позволил установить, что заболевание чаще носит наследственный характер в группе татар, причем у татар и башкир наследственность по СД2 чаще передается по линии матери. В этнической группе башкир более значимо повышены все показатели липидного спектра, что может быть связано с особенностями национальной культуры питания. Особенности дебюта СД2 в этнической группе татар подтверждаются данными корреляционного анализа о роли наследственности в манифестации в более молодом возрасте на фоне ожирения. Проведенный корреляционный анализ выявил этиопатогенетические особенности дебюта и течения СД2 в межэтнических группах. АНАЛИЗ АССОЦИАЦИЙ ИССЛЕДУЕМЫХ ПОЛИМОРФНЫХ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА Выявлены межэтнические различия генетической предрасположенности к СД2(таблица3).Вэтническихгруппах(башкиры,татары,русские), проживающихв РеспубликеБашкортостан, не было найденосвязи с полиморфными маркерами rs1801282 гена PPARG, rs320 гена LPL, rs17782313 гена MC4R, rs3736228 гена LRP5, определяющих чувствительность к инсулину, с риском развития СД2. Полиморфизм rs7903246 гена TCF7L2 ассоциирован с СД2 в этнических группах русских и татар, однако маркерами повышенного риска СД2 у русских является генотип СТ и аллель Т, у татар генотип ТТ и аллель Т. Из всех изученных генов, ассоциация с риском развития СД2 в этнической группе башкир не была найдена ни с одним из них. Полученные результаты еще раз подтверждают необходимость поиска генетических маркеров не только в популяциях, проживающих на одной территории, но и в этнических группах. Таблица 3 Генетические маркеры предрасположенность к СД2 ГенГенотип/↑ риск СД2↓ риск СД2Этническая (полиморфизм)аллель(OR)(OR)группа Ген транскрипционногоСТ/Т2,6/2,3- русские фактора 7 TCF7L2СС/С-0,3/0,4 (rs7903146) – определяетТТ/Т5,3/2,1– татары синтез и секрециюСС/С-0,5/0,4 инсулина-башкиры Ген адипонектина-башкиры ADIPOQ (rs17366743) –СТ/С3,2/2,9- русские определяетТТ/Т-0,3/0,3 чувствительность тканейСТ/С3,6/3,3- татары к инсулинуТТ/Т-0,2/0,2 Многофакторныйрегрессионныйанализподтвердилвыявленные ассоциации полиморфных генетических локусов TCF7L2 (rs7903146) и ADIPOQ (rs17366743) с СД2 в этнических группах русских и татар. Локусы TCF7L2 (rs7903146) и ADIPOQ (rs17366743) ассоциированы также с уровнем С-пептида и показателямилипидногообмена.ЛокусLPL(rs320)ассоциированс диабетической нефропатией, а MC4R (rs17782313) - со скоростью клубочковой фильтрации. АНАЛИЗ ГЕНЕТИЧЕСКИХ КОМБИНАЦИЙ C целью определениякомбинаций генныхлокусов, которые имеют наибольшую значимость для развития СД2 у населения Республики Башкортостан применяли метод – Multifactor Dimensionality Reduction (MDR) (таблица 4). Таблица 4 Анализ ассоциаций комбинаций генотипов ADIPOQ (rs17366743)-MC4R (rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146) с риском СД2 КомбинацииКонтроль,Больные СД2,рOR генотиповn (%)n (%)(95% CI) CT-CT-CT1 (0,3%)14 (3,7%)0,001814,4 (1,9-110,2) TT-TT-CC117 (30,8%)79 (20,7%)0,00190,6 (0,4-0,8) TT-CT-CC88 (23,2%)43 (11,3%)0,00000,4 (0,3-0,6) N380382-- Выявлены достоверные различия в частоте сочетаний генотипов по полиморфнымлокусамADIPOQ(rs17366743)-MC4R(rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146) в контрольной группе и в группе пациентов с СД2. В группе больных СД2 по сравнению со здоровыми лицами установлена достоверно более высокая частота встречаемости 4 сочетаний генотипов по полиморфным локусам ADIPOQ (rs17366743)-MC4R (rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146): CT-CT-CT (3,7% и 0,3% соответственно, р=0,0018), CT-CT-TT (2,4% и 0% соответственно, р=0,0075), TT-CT- TT (5,0% и 1,3% соответственно, р=0,0073) и TT-TT-TT (8,9% и 4,2% соответственно, р=0,0136). В группе пациентов с СД2 по сравнению с контрольной группой установлена достоверно более низкая частота 2 сочетаний генотипов по полиморфнымлокусамADIPOQ(rs17366743)-MC4R(rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146): TT-TT-CC (20,7% и 30,8% соответственно, р=0,0019) и TT-CT-CC (11,3% и 23,2% соответственно, р0,0001). В таблице 4 представлены наиболее значимые сочетания генотипов по локусам ADIPOQ (rs17366743)-MC4R (rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146). ВЫВОДЫ 1.Установлено, что у пациентов СД2 в этнических группах (башкиры, татары, русские) Республики Башкортостан повышенный риск СД2 ассоциирован с генотипом ТТ (OR=2,9, p=0,0000) и генотипом СТ (OR=1,3, p=0,0000), а также аллелем Т (OR=1,9, p=0,0000) полиморфного локуса rs7903146 гена TCF7L2, низкий риск ассоциирован с генотипом СС (OR=0,5, p=0,0000) и аллелем С (OR=0,5, p=0,0000). Генотип СТ (OR=2,2, p=0,0004) и аллель С (OR=2,1, p=0,00006) полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ ассоциированы с повышенным риском СД2, а генотип ТТ (OR=0,4, p=0,0004) и аллель Т (OR=0,4, p=0,0006) ассоциирован с низким риском. В этнических группах (башкиры, татары, русские) проживающих в Республике Башкортостан не было найдено связи полиморфных маркеров rs1801282 гена PPARG, rs320 гена LPL, rs17782313 гена MC4R, rs3736228 гена LRP5, с риском развития СД2. 2. В этнической группе русских Республики Башкортостан больных СД2 повышенный риск СД2 ассоциирован с генотипом СТ (OR=2,6, p=0,0001) и аллелем Т (OR=2,3, p=0000), маркерами пониженного риска заболевания являются генотип СС (OR=0,3, p=0,0037) и аллель С (OR=0,4, p=0,0000) полиморфного локуса rs7903146 гена TCF7L2. Маркерами повышенного риска полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ являются генотип СТ (OR=3,2, p=0,0005) и аллель С (OR=2,9, p=0,0018), а маркерами пониженного риска заболевания являются генотип ТТ (OR=0,3, p=0,0005) и аллель Т (OR=0,3, p=0,0018). 3. В этнической группе татар Республики Башкортостан больных СД2 повышенный риск развития СД2 связан генотипом ТТ (OR=5,3, p=0,0000) и аллелем Т (OR=2,1, p=0,0000) полиморфного маркера rs7903146 гена TCF7L2, маркером пониженный риска генотипом СС (OR=0,5, p=0,0013) и аллелем С (OR=0,4, p=0,0000). Генотип СТ (OR=3,9, p=0,0002) и аллель С (OR=3,3, p=0,0006) полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ ассоциирован с СД2, а генотип ТТ (OR=0,2, p=0,0002) и аллель Т (OR=0,2, p=0,0006) понижает риск СД2. 4. Характер дебюта и прогрессирования СД2 различаются в этнических группах народов Республики Башкортостан. В этнической группе татар СД2 чаще носит наследственный характер (37%), чем у русских (22,6%, р=0,0005) и башкир (27%, р=0,0223). В этнических группах татар и башкир, по сравнению с русскими, наследственность по СД2 чаще передается по линии матери (р=0,0165 и р=0,0435, соотвественно). У татар наследственная предрасположенность к СД2 проявляется манифестацией в более молодом возрасте на фоне ожирения. В этнической группе башкир наиболее значимо выражена дислипидемия. 5.Установлено, что полиморфные варианты TCF7L2 (rs7903146) и ADIPOQ (rs17366743) ассоциированы с инсулинпродуцирующей функцией β-клетки и состоянием липидного обмена.Полиморфизмы в генах TCF7L2 (rs7903146) и ADIPOQ (rs17366743) (β=0,4240, p=0,0099; β=-0,8015, p=0,0290, соответственно) продемонстрировали ассоциацию с уровнем С-пептида (R2=0,1417, p0,001). Полиморфный локус TCF7L2 (rs7903146) ассоциирован с индексом атерогенности (R2=0,09597, p0,001; β=-0,3067, p=0,0094), ЛПНП (R2=0,2672, p0,001; β=-0,4406, p=0,0065), ОХС (R2=0,2172, p0,001; β=-0,3760, p=0,0087), а ADIPOQ (rs17366743) – с ЛПВП (R2=0,08845, p=0,011; β=0,2572, p=0,0298). Локусс LPL (rs320) ассоциирован с диабетической нефропатией (R2=0,1970, p0,001; β=0,07737, p=0,0357), а MC4R (rs17782313) - со скоростью клубочковой фильтрации (R2=0,05966, p=0,002; β=5,8218, p=0,0136). 6. Комбинации генотипов ADIPOQ (rs17366743)-MC4R (rs17782313)-TCF7L2 (rs7903146) ассоциированы с риском СД2 у этнических групп (русские, татары), проживающих в Республике Башкортостан. Высокий риск заболевания наблюдается у лиц с сочетанием генотипов CT-CT-CT (OR=14,4, p=0,0018), низкий – при наличии сочетаний TT-TT-CC (OR=0,6, p=0,0019), TT-CT-CC (OR=0,4, p=0,0000). ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 1. Молекулярно-генетическоетестированиеполиморфныхмаркеров rs17366743 гена ADIPOQ, rs7903146 гена TCF7L2, rs17782313 гена MC4R может быть использовано для формирования группы риска по развитию СД2 в этнических группах ( русские, татары) Республики Башкортостан. 2. Молекулярно-генетическоетестированиеполиморфныхмаркеров rs17366743 гена ADIPOQ и rs7903146 гена TCF7L2 может быть использовано для прогнозирования метаболических нарушений в процессе прогрессирования СД2 в этнических группах ( русские, татары) Республики Башкортостан.

Актуальность темы исследования
Сахарный диабет 2 типа (СД2) является наиболее распространенным
заболеванием эндокринной системы, которое представляет собой одну из
острейших медицинских и социальных проблем, поскольку приводит к ранней
инвалидизации и повышению смертности вследствие микро- и макрососудистых
осложнении.

СД2 оказывает значительную нагрузку на системы здравоохранения во всем
мире. Международная федерация диабета подсчитала, что число больных
сахарным диабетом по всему миру в 2019 году составило 463 миллионов человек,
а к 2045 году увеличится до 700 миллионов [11].

Научным сообществом прилагаются значительные усилия для выявления
генетической основы наиболее распространенных заболеваний, представляющих
важную проблему для здравоохранения и экономики разных стран. Опубликовано
свыше 1000 сообщений о взаимосвязи 4000 однонуклеотидных полиморфизмов с
развитием более 200 заболеваний [155].
В настоящее время установлено, что к развитию СД2 предрасполагают
аллельные варианты порядка 100 генов [120]. Ряд полиморфизмов связан с риском
развития сахарного диабета, другие с его осложнениями, эффективностью
терапии, коморбидными состояниями, вариантами клинического течения [132].
Исследования ассоциаций полиморфных генетических маркеров, их
взаимодействий в инициации СД2, влияния на течение и исходы заболевания
являются одним из актуальных направлений персонифицированной медицины.
СД2 изучен недостаточно с позиции молекулярно- генетических
исследований, при этом большая их часть посвящена роли различных генов-
кандидатов в формировании СД2 и его осложнений, проведены за рубежом [78,
97]. В Российской Федерации полногеномные поиски маркеров
предрасположенности к СД2 не проводились.
В данное время во французской, шведской, финской, британской,
итальянской, японской, исландской, китайской популяциях установлены группы
полиморфных генетических маркеров, которые ассоциированы с развитием СД2
[33, 64, 65, 68].
Поскольку конкретные генетические маркеры для разных групп населения
весьма разнообразны, при выявлении наследственного риска СД2 важно
учитывать этническую составляющую.
Исследования, посвященные выявлению генов кандидатов СД2, позволили
сделать вывод, что гены, ответственные за развитие инсулинорезистентности
(ИР), вносят меньший вклад в развитие СД2, нежели гены, участвующие в
развитии дисфункции β-клетки.

Степень разработанности темы исследования

Проведенный анализ генетических маркеров изученных генов-кандидатов и
их ассоциаций с СД2 в РФ, выявил следующие гены предрасположенности к СД2.
Гены, определяющие синтез и секрецию инсулина: полиморфизм rs12255372 гена
TCF7L2, ответственного за синтез транскрипционного фактора, который
регулирует экспрессию гена проглюкагона и других генов, вовлеченных в
углеводный обмен (OR=1,54) [23]; полиморфизм rs7903146 гена TCF7L2
(OR=2,48; OR=2,04) [8, 9]; полиморфизм rs13266634 гена SLC30A8, продуктом
которого является трансмембранный белок-транспортер ионов цинка типа 8
(OR=1,29) [23]; полиморфизм rs163184 гена KCNQ1, кодирующего
порообразующую альфа- субъединицу потенциал-зависимого калиевого канала;
полиморфизм rs11924032 гена SLC2A2, который кодирует внутриклеточный
транспортер глюкозы 2 типа; полиморфизм rs11634397 гена протеина 6 цинкового
пальца AN1-типа ZFAND6; полиморфизм rs7172432 гена C2CD44 [22];
полиморфизм rs1799859 гена ABCC8, кодирующего рецептор к
сульфонилмочевине Sur1, который представляет собой белок, относящийся к
семейству АТФ-связывающих клеточных транспортеров (OR=1,34) [14];
полиморфизм R1273R гена ABCC8 (OR=2,03) [144]; полиморфизм rs1799859 гена
ABCC8 [20]; полиморфизм rs10811661 гена CDKN2A/B, который участвует в
контроле пролиферации β-клеток островков Лангерганса поджелудочной железы
(OR=1,38) [17]; полиморфизм rs 10811661 гена CDKN2A/B (OR=2,11) [10];
полиморфизм rs10811661 гена CDKN2A/B [20]; полиморфизмы rs 34861192 и
rs32119177 гена RSTN (OR=2,8) [17]; полиморфизм E23K гена KCNJ11, который
кодирует белок, входящий в состав АТФ-зависимых К+ каналов панкреатических
β-клеток (OR=1,41) [144]; полиморфизмы rs34861192 и rs32119177 гена RSTN [20];
полиморфизм rs 5219 гена KCNJ11(OR=1,53); полиморфизм rs13266634 гена
SLC30A8 (OR=1,36) [10].
Гены, определяющие чувствительность тканей к инсулину: полиморфизмы
rs 2943641 и rs2943634 гена IRS1, который является эндогенным субстратом
рецептора инсулина и играет решающую роль в пути передачи сигналов инсулина;
полиморфизмы rs8050136 и rs11642841 гена FTO, ассоциированного с ожирением;
полиморфизм rs571312 гена MC4R; полиморфизм rs1470579 гена IGF2BP2,
который кодирует регулятор ростового фактора и непосредственно влияет на
функционирование и выживание β-клеток островков Лангерганса [22];
полиморфизм rs11705701 гена IGF2BP2 (OR=1,19) [167]; полиморфизм rs1801282
гена PPARG, вовлеченного в индукцию транскрипции генов, продукты которых
способствуют развитию воспалительных заболеваний, ожирения, а так же
определяют чувствительность к инсулину, мутации в этом гене ассоциированы с
развитием ИР, нарушением обмена жирных кислот, дислипидемией и
метаболическим синдромом, с нарушением гомеостаза глюкозы, нарушением
дифференцировки адипоцитов (OR=1,43) [8]; полиморфизмы Int6/Pvull G>A
(OR=4,36) и Int8/Hind3 гена LPL [17]; полиморфизм rs320 гена LPL, который
регулирует обмен триглицеридов (ТГ) и участвует в механизмах взаимодействия
липопротеинов с клеточным рецептором PPRAG, участвующим в регуляции
углеводного обмена [20]; полиморфизмы rs11061971 и rs16928751 гена ADIPOR2,
который кодирует рецептор к гормону жировой ткани адипонектину, играющему
ключевую роль в снижении инсулинoрезистентности (OR=2,05) [41].
В настоящее время исследований по изучению генетических основ СД2 в
популяциях, проживающих на территории Республики Башкортостан, не
проводилось. Установление генов-кандидатов СД2 в этнических группах
Республики Башкортостан позволит проводить медико-генетическое
консультирование пациентов с высоким риском развития СД2, прогнозировать
развитие СД2 и давать рекомендации по здоровому образу жизни.

Цель исследования

Установить молекулярно-генетические маркеры развития СД2 у
представителей этнических групп (татар, башкир, русских) населения Республики
Башкортостан и оценить их ассоциации с клинико-метаболическими
особенностями течения СД2.

Задачи исследования

1. Установить ассоциации полиморфных локусов генов PPARG
(rs1801282), ADIPOQ (rs17366743), TCF7L2 (rs7903146), MC4R (rs17782313),
LRP5 (rs3736228), LPL (rs320) с риском развития СД2 в этнических группах
(татар, башкир, русских) Республики Башкортостан.
2. Оценить клинические особенности развития и течения СД2 в
этнических группах (татары, башкиры, русские) населения Республики
Башкортостан
3. Определить связь аллельных вариант полиморфных локусов генов
предрасположенности к СД2 с возрастом манифестации СД2, показателями
углеводного и липидного обмена, инсулинпродуцирующей функцией бета-клеток,
скоростью клубочковой фильтрации, развитием микро- и макрососудистых
осложнений.
4. Провести анализ ассоциаций комбинаций изученных полиморфных
вариантов генов с развитием СД2.
Научная новизна исследования

Впервые в популяциях башкир, русских и татар, проживающих в
Республике Башкортостан, установлены ассоциации с СД2 полиморфных
маркеров rs17366743 гена ADIPOQ, rs7903146 гена TCF7L2. В изученных
этнических группах русских, татар, башкир, проживающих в Республике
Башкортостан, не было найдено связи полиморфных маркеров rs1801282 гена
PPARG, rs320 гена LPL, rs17782313 гена MC4R, rs3736228 гена LRP5 с риском
развития СД2. Выявлены межэтнические различия генетической
предрасположенности к СД2.

Получены данные о том, что в популяции русских Башкортостана
повышенный риск СД2 ассоциирован с генотипом СТ и аллелем Т полиморфного
локуса rs7903146 гена TCF7L2, генотипом СТ и аллелем С полиморфного локуса
rs17366743 гена ADIPOQ, а маркерами пониженного риска заболевания являются
генотип ТТ и аллель Т полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ, генотип
СС и аллель С полиморфного локуса rs7903146 гена TCF7L2.

Выявлено, что в этнической группе татар Республики Башкортостан риск
развития СД2 взаимосвязан с генотипом ТТ и аллелем Т полиморфного маркера
rs7903146 гена TCF7L2, генотипом СТ и аллелем С полиморфного локуса
rs17366743 гена ADIPOQ, а пониженный риск заболевания с генотипом СС и
аллелем С полиморфного маркера rs7903146 гена TCF7L2, генотипом ТТ и
аллелем Т полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ.

Впервые в популяциях населения Республики Башкортостан изучен
характер межгенных взаимодействий используя метод MDR (оригинальное
программное обеспечение Multifactor Dimensionality Reduction) с целью оценки
вклада их комбинации в формировании наследственной предрасположенности к
СД2. Показано, что комбинации генотипов ADIPOQ (rs17366743)-MC4R
(rs17782313)-TCF7L2(rs7903146) ассоциированы с риском СД2 у населения
Республики Башкортостан. Высокий риск заболевания наблюдается у лиц с
сочетанием генотипов CT-CT-CT (OR=14,4, 95% CI OR 1,9-110,2), низкий – при
наличии сочетаний TT-TT-CC (OR=0,6, 95% CI OR 0,4-0,8), TT-CT-CC (OR=0,4,
95% CI OR 0,3-0,6).

Установлено, что в этнических группах русских и татар
Башкортостана генотипы СС и СТ полиморфного локуса rs7903146 гена TCF7L2
ассоциированы с более высоким уровнем индекса атерогенности (ИА) (р=0,0111),
генотип ТТ полиморфного локуса rs17366743 гена ADIPOQ – с
инсулинпродуцирующей функцией β-клетки (p=0,0228).

Показано, что в этнических группах русских и татар Башкортостана
полиморфизм гена TCF7L2 (rs7903146) ассоциирован с уровнем С-пептида
(р=0,0099), общим холестерином (р=0,0087), ЛПНП (р=0,0065). Полиморфный
локус rs17366743 гена ADIPOQ ассоциирован с ЛПВП (р=0,0298). Полиморфный
локус MC4R (rs17782313) ассоциирован с СКФ (р=0,0136), а LPL (rs320) – с
диабетической нефропатией (р=0,0357).

Впервые в Республике Башкортостан были установлены клинические
особенности развития и течения СД2 в этнических группах (башкир, русских,
татар) выявлена роль наследственности и возраста дебюта СД2, клинических
проявлений макро- и микрососудистых осложнений СД2 и их патогенетические
связи.

Научно-практическая значимость

В результате анализа ассоциаций полиморфных локусов генов-кандидатов с
СД2 впервые идентифицированы молекулярно-генетические маркеры СД2 в
разных этнических группах (башкиры, русские, татары) Республики
Башкортостан, что позволит проводить медико-генетическое консультирование
среди населения Республики Башкортостан.

Установленные связи аллельных вариантов полиморфных локусов генов
предрасположенности к СД2 с клинико-метаболическими особенностями течения
СД2 позволят использовать полученные данные для оценки дебюта и
прогрессирования СД2 в изученных популяционных группах.

Полученные результаты ассоциации генетических маркеров с СД2 в разных
этнических группах обширного географического региона (Республика
Башкортостан) позволяет расширить мировую базу данных полиморфных локусов
генов-кандидатов СД2.

Методология и методы исследования

Методологически и теоретически исследование базировалось на работах
отечественных и зарубежных авторов в области эндокринологии, генетики,
эпидемиологии. В ходе исследования применялись системный подход и методы
статистического анализа.

При проведении исследования использовались различные диагностические
методы: сбор анамнеза, общеклиническое обследование, антропометрические
данные, клинико-лабораторные, инструментальные исследования пациентов с
СД2 и пациентов группы контроля, молекулярно-генетическое тестирование на
наличие носительства полиморфных маркеров генов, ассоциированных с СД2.

Положения, выносимые на защиту

1. В популяциях русских и татар, проживающих в РБ, установлены
ассоциации полиморфных маркеров rs17366743 гена ADIPOQ, rs7903146 гена
TCF7L2 с СД2. Выявлены межэтнические различия генетической
предрасположенности к СД2.

2. Характер дебюта и прогрессирования СД2 различаются в этнических
группах народов РБ.

3. Изученные генетические маркеры ассоциированы с клиническими
особенностями течения СД2: полиморфные варианты TCF7L2 (rs7903146) и
ADIPOQ (rs17366743) ассоциированы с инсулинпродуцирующей функцией β-
клетки и состоянием липидного обмена. Локус с LPL (rs320) ассоциирован с
диабетической нефропатией, а MC4R (rs17782313) – со скоростью клубочковой
фильтрации.

4. Комбинации генотипов ADIPOQ (rs17366743)-MC4R (rs17782313)-
TCF7L2 (rs7903146), ассоциированные с риском СД2 у этнических групп
(русские, татары), проживающих в РБ, изменяют популяционную степень риска
предрасположенности к СД2.

Внедрение результатов исследования

Основные положения работы используются в учебном процессе на
кафедрах эндокринологии и ИДПО ФГБОУ ВО БГМУ МЗ РФ.

Связь работы с научными программами

Тема диссертации утверждена Ученым советом лечебного факультета ГБОУ
ВПО ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения Российской Федерации (протокол № 11 от 19
декабря 2013 года) и связана с планом НИР университета. Номер государственной
регистрации АААА-А17-117112820042-5.

Степень достоверности и апробация результатов

Научные положения и практические рекомендации, сформулированные
автором в диссертации, основаны на изучении результатов молекулярно-
генетических исследований и достаточного объема клинического материала. В
работе использованы современные методы исследования, соответствующие
поставленным задачам. Выводы аргументированы и вытекают из проведенных
автором исследований. Статистическая обработка выполнена согласно
современным требованиям медицинской и генетической статистики. Основные
положения работы используются в учебном процессе на кафедрах
эндокринологии и ИДПО ФГБОУ ВО БГМУ МЗ РФ.
Основные аспекты диссертационной работы были представлены и
обсуждены на II Всероссийском конгрессе эндокринологов «Инновационные
технологии в эндокринологии» с участием стран СНГ (Москва, 2014), VII
диабеталогическом конгрессе «Сахарный диабет в XXI веке – время объединения
усилий» (Москва, 2015), VI Международном молодежном медицинском конгрессе
«Санкт-Петербургские научные чтения-2015» (Санкт-Петербург, 2015), VII
Всероссийском конгрессе эндокринологов «Достижения персонализированной
медицины сегодня – результаты практического здравоохранения завтра» (Москва,
2016), на VII (XXV) Всероссийском диабетологическом конгрессе с
международным участием «Сахарный диабет – пандемия XXI века» (Москва,
2018).
Официальная апробация диссертации состоялась на заседании проблемной
комиссии «Внутренние болезни» ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России (протокол
№ 41 от 14 сентября 2020 г.).

Публикации

Материалы диссертационной работы представлены в 12 научных
публикациях (из них 5 – в журналах, внесенных в список Высшей аттестационной
комиссии).

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа оформлена на 136 страницах машинописного
текста. Разделы диссертации включают: введение и обзор литературы, описание
материала исследования, три главы собственных исследований, заключение и
список использованной литературы. Работа проиллюстрирована Таблицами,
рисунками. В списке литературы отражено 178 источников (из них 31
отечественных и 147 зарубежных).

Заказать новую

Лучшие эксперты сервиса ждут твоего задания

от 5 000 ₽

Не подошла эта работа?

Закажи новую работу, сделанную по твоим требованиям

Читать

Публикации автора в научных журналах

Полиморфный маркер гена белка типа 5, связанного с рецептором липопротеинов низкой плотности и сахарным диабетом 2 типа

Авзалетдинова Д.Ш., Моругова Т.В., Кочетова О.В., Сомова Р.Ш., Мустафина О.Е. // Сборник тезисов VII Всероссийского диабетологического конгресса «Сахарный диабет в XXI веке- время объединения усилий». Москва-2с.

Анализ ассоциации полиморфного локуса rs 17782313гена MC4R

О.В. Кочетова, Д.Ш. Авзалетдинова // Сборник тезисов VIМеждународногомолодежногомедицинскогоконгресса«Санкт- Петербургские научные чтения-2015»-Санкт-Петербург, 2015

Ассоциация полиморфного маркера rs17366743 гена ADIPOQ с сахарным диабетом 2 типа у жителей Башкортостана

О.В.Кочетова,Д.Ш. Авзалетдинова, Т.В. Моругова, О.Е. Мустафина//Сборник тезисов VIIВсероссийского конгресса эндокринологов «Достижения персонализированноймедицины сегодня- результаты практического здравоохранения завтра».Москва-2С.

Риск сердечно-сосудистой патологии у пациентов с сахарным диабетом 2 типа в зависимости от полиморфизма RS7903146 генатранскрипционного фактора 7

Авзалетдинова Д.Ш., Моругова Т.В., КочетоваО.В., Мустафина О.Е. // Сборник тезисов II Всероссийского конференции смеждународным участием «Сахарный диабет: макро- и микрососудистыеосложнения». Москва-2с.

Помогаем с подготовкой сопроводительных документов

Совместно разработаем индивидуальный план и выберем тему работы Подробнее

Помощь в подготовке к кандидатскому экзамену и допуске к нему Подробнее

Поможем в написании научных статей для публикации в журналах ВАК Подробнее

Структурируем работу и напишем автореферат Подробнее

Хочешь уникальную работу?

Больше 3 000 экспертов уже готовы начать работу над твоим проектом!

Я - кандидат философских наук, доцент кафедры философии СГЮА. Занимаюсь написанием различного рода работ (научные статьи, курсовые, дипломные работы, магистерские дисс... Читать все

Я - кандидат философских наук, доцент кафедры философии СГЮА. Занимаюсь написанием различного рода работ (научные статьи, курсовые, дипломные работы, магистерские диссертации, рефераты, контрольные) уже много лет. Качество работ гарантирую.

#Кандидатские #Магистерские

1486 Выполненных работ

Мой опыт в написании работ - 9 лет. Я специализируюсь на написании курсовых работ, ВКР и магистерских диссертаций, также пишу научные статьи, провожу исследования и со... Читать все

Мой опыт в написании работ - 9 лет. Я специализируюсь на написании курсовых работ, ВКР и магистерских диссертаций, также пишу научные статьи, провожу исследования и создаю красивые презентации. Сопровождаю работы до сдачи, на связи 24/7 ?

#Кандидатские #Магистерские

359 Выполненных работ

Закончила ГУУ с отличием "Бухгалтерский учет, анализ и аудит". Выполнить разные работы: от рефератов до диссертаций. Также пишу доклады, делаю презентации, повышаю уни... Читать все

Закончила ГУУ с отличием "Бухгалтерский учет, анализ и аудит". Выполнить разные работы: от рефератов до диссертаций. Также пишу доклады, делаю презентации, повышаю уникальности с нуля. Все работы оформляю в соответствии с ГОСТ.

#Кандидатские #Магистерские

0 Выполненных работ

Профессиональный журналист, филолог со стажем более 10 лет. Имею профильную диссертацию по специализации "Радиовещание". Подробно и серьезно разрабатываю темы научных... Читать все

Профессиональный журналист, филолог со стажем более 10 лет. Имею профильную диссертацию по специализации "Радиовещание". Подробно и серьезно разрабатываю темы научных исследований, связанных с журналистикой, филологией и литературой

#Кандидатские #Магистерские

33 Выполненных работы

Читаю лекции и веду занятия со студентами по матанализу, линейной алгебре и теории вероятностей. Защитил кандидатскую диссертацию по качественной теории дифференциальн... Читать все

Читаю лекции и веду занятия со студентами по матанализу, линейной алгебре и теории вероятностей. Защитил кандидатскую диссертацию по качественной теории дифференциальных уравнений. Умею быстро и четко выполнять сложные вычислительные работ

#Кандидатские #Магистерские

117 Выполненных работ

Работаю на сайте четвертый год. Действующий преподаватель вуза. Основные направления: микробиология, биология и медицина. Написано несколько кандидатских, магистерских... Читать все

#Кандидатские #Магистерские

566 Выполненных работ

Здравствуйте! Опыт написания работ более 12 лет. За это время были успешно защищены более 2 500 написанных мною магистерских диссертаций, дипломов, курсовых работ. Явл... Читать все

Здравствуйте! Опыт написания работ более 12 лет. За это время были успешно защищены более 2 500 написанных мною магистерских диссертаций, дипломов, курсовых работ. Являюсь действующим преподавателем одного из ВУЗов.

#Кандидатские #Магистерские

177 Выполненных работ

Учился на мат.факе ТвГУ. Любовь к математике там привили на столько, что я, похоже, никогда не перестану этим заниматься! Сейчас работаю в IT и пытаюсь найти время на... Читать все

Учился на мат.факе ТвГУ. Любовь к математике там привили на столько, что я, похоже, никогда не перестану этим заниматься! Сейчас работаю в IT и пытаюсь найти время на продолжение диссертационной работы... Всегда готов помочь! ;)

#Кандидатские #Магистерские

164 Выполненных работы

Работаю в сфере метрологического обеспечения. Защищаю кандидатскую диссертацию. Основной профиль: Метрология, стандартизация и сертификация. Оптико-электронное прибост... Читать все

#Кандидатские #Магистерские

10 Выполненных работ