Мониторинг резистентности к инсектицидам в популяциях постельных клопов Cimex lectularius в России и усовершенствование мер борьбы с ними

Работа выполнена в период с 2014 по 2019 гг. в лаборатории проблем дезинсекции и инсектарии ФБУН НИИ Дезинфектологии Роспотребнадзора, на кафедре паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА им. К.И. Скрябина, а также в ФГБНУ «Центр экспериментальной эмбриологии и репродуктивной биотехнологии». Проведено более 900 опытов на постельных клопах, в которых использовано более 10000 особей насекомых.
В экспериментах использовали лабораторную чувствительную к инсектицидам культуру постельного клопа Cimex lectularius S-НИИД, культивируемую в инсектарии ФБУН НИИ Дезинфектологии Роспотребнадзора с 1970 г., и культуры, полученные от родительских особей из популяций, собранных с разных объектов в Москве, Астрахани, Смоленске, Воронеже, Иркутске, Архангельске, Гусь-Хрустальном и Балашове, а также популяции клопов
C. hemipterus, собранные в Москве, Санкт-Петербурге и Гусь-Хрустальном на различных объектах. Клопов культивировали в лабораторных условиях в течение 1-22 поколений без селекции инсектицидами.
Для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР) использованы постельные клопы C. Lectularius лабораторной чувствительной расы S-НИИД и популяции, собранные в Москве (М-1, F2; М-2, F1; М-3, F1; М-4, F1), Смоленске (СМ-1, F2; СМ-2, F2) и Астрахани (АСТ-1, F1; АСТ-2, F1).
В экспериментах применяли технические продукты и аналитические стандарты действующих веществ инсектицидов, а также опытные образцы инсектицидных средств на основе кристаллических порошков природного происхождения (диатомовый порошок, смесь диатомового порошка и силикагеля), образцы средства «Раптор аэрозоль от клопов» в аэрозольной упаковке на основе смеси неоникотиноида имидаклоприда и пиретроида d- тетраметрина, образцы средства на основе эфирных масел.
Для определения контактного действия инсектицидов использовали метод топикального нанесения ацетоновых растворов ДВ на брюшко имаго клопов. Определяли концентрации, вызывающие поражение 50% и 95% насекомых, соответствующих СК50 и СК95, %. Диагностическую концентрацию рассчитывали, как удвоенную концентрацию СК95, % для чувствительной расы согласно МУ 3.5.2.2358-08 (2009); Руководство Р 4.2.2643-10 (2011).
Для оценки степени чувствительности популяций клопов, собранных на объектах, их топикально обрабатывали ацетоновым раствором выбранного инсектицида в диагностической концентрации. При наличии выживших особей, определяли их долю (МУ 3.5.2.2358-08, 2009).
Для характеристики эффективности средств определяли острое и период остаточного действия в соответствии с Руководством (Р 4.2.2643-10, 2011).
Для статистической обработки данных использовали пакет компьютерных программ
«Статистика».
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ПРИРОДНЫХ
ПОПУЛЯЦИЙ КЛОПОВ К ИНСЕКТИЦИДАМ
3.1. Ассортимент действующих веществ и препаративных форм инсектицидов для
борьбы с постельными клопами
Проанализирован рынок современных инсектоакарицидных средств для борьбы с постельными клопами в нашей стране. Как показал анализ, в ветеринарной практике в настоящее время ассортимент действующих веществ и ветеринарных препаратов, предназначенных для борьбы с арахноэнтомозами птиц согласно данным galen.vetrf.ru, невелик (12 наименований): это препараты на основе ФОС (диазинон), пиретроидов (циперметрин, альфациперметрин и дельтаметрин), авермектинов (ивермектин) и фенилпиразолов (фипронил).
В медицинской дезинсекции ассортимент средств более обширен. По данным Единого реестра свидетельств о государственной регистрации Евразийской экономической комиссии (portal.eaeunion.org) за период 2010 – 2018 гг., разрешено к применению 160 средств от нелетающих насекомых, из них 108 отечественных и 52 – зарубежных. За изученный период большая часть средств включает в себя инсектициды на основе пиретроидов и ФОС. Применение средств в аэрозольной упаковке (АУ) населением в быту, содержащих в основном пиретроиды, и концентратов, применяемых методом опрыскивания в медицинской дезинсекции, содержащих как пиретроиды, так и ФОС, привело к формированию резистентности к обоим классам инсектицидов.
3.2. Установление диагностических концентраций инсектицидов разных химических групп для имаго C. lectularius
Нами были определены и использованы в экспериментах диагностические концентрации для 16 инсектицидов различной химической структуры. Диагностические
концентрации, найденные с использованием чувствительной популяции S-НИИД, представлены в табл. 1.
Таблица 1 – Чувствительность имаго постельных клопов лабораторной чувствительной расы S-НИИД к инсектицидам разных химических групп и диагностические концентрации
(ДК)
Диазинон Малатион
Хлорпирифос Хлорофос Фентион
Пропоксур Бендиокарб
Тетраметрин
d-Тетраметрин Бифентрин Циперметрин α-Циперметрин
Дельтаметрин λ-Цигалотрин
Имидаклоприд Ацетамиприд Тиаметоксам Клотианидин
Инсектицид
СК50, % СК95, %
Фосфорорганические соединения
ДК, %
0,090 0,006 0,013 0,14 0,00004
0,240 0,232
0,640
0,400 0,000068 0,000080 0,0000012
0,000080 0,000048
0,0012 0,0048 0,0012 0,0011
0,00026 (0,000208-0,000325) 0,00037 (0,00029-0,00048) 0,00019 (0,00014-0,00025) 0,0090 (0,0071-0,0112) 0,000007
(0,000005-0,000008)
0,00450 (0,0036-0,0057) 0,0030 (0,0024-0,0038) 0,0067 (0,0051-0,0087) 0,0700 (0,056-0,0875) 0,00002
(0,000016-0,000025)
Производные карбаминовой кислоты
0,058 (0,045-0,075) 0,016 (0,013-0,021)
0,023 (0,017-0,029) 0,019
0,120 (0,096-0,150) 0,116 (0,089-0,151)
Пиретроиды
(0,014-0,025) 0,0000032 (0,00000025-0,0000041) 0,0000030 (0,0000024-0,0000038) 0,000000025 (0,00000002-0,00000003) 0,0000040 (0,00003-0,00005) 0,0000072 (0,000006-0,000009)
0,320 (0,250-0,409) 0,200
(0,154-0,260) 0,000034 (0,000026-0,000043) 0,00004 (0,000030-0,000052) 0,0000006 (0,0000005-0,0000007) 0,000040 (0,00003-0,00005) 0,000024 (0,000018-0,000031)
Неоникотиноиды
0,000021 (0,000016-0,000026) 0,00030 (0,00024-0,00037) 0,00018 (0,00014-0,00023)
0,000010 (0,000007-0,000013)
0,0006 (0,0004-0,0007) 0,0024 (0,0019-0,0030) 0,00056 (0,00043-0,00073)
0,00054 (0,00041-0,00070)
*вскобкахдляСК50 иСК95приведеныдоверительныепределыприуровневероятности 95%.
3.3. Определение доли резистентных особей постельных клопов C. lectularius в выборках из популяций, собранных с объектов, к инсектицидам разных химических
групп
8

С помощью полученных нами диагностических концентраций определена доля резистентных особей постельных клопов в выборках из географически разобщенных популяций, собранных из разных городов нашей страны: Москвы (табл. 2), Астрахани и Смоленска (табл. 3).
Таблица 2 – Доля устойчивых к инсектицидам особей (%) в г. Москва
Инсектициды
Циперметрин
α-Циперметрин
Дельтаметрин 90,7±3,3 Эсфенвалерат 100 λ-Цигалотрин 80,7±1,7
Название популяции, поколение М-3 F1-2
Пиретроиды
М-1 F1-2
М-5 F1-2
100 100 100 100 70,0±2,4 40,0±6,2
100 95,0±2,4 20,0±4,8 –
– 100
60,0±4,7 10,0±8,2 0
90,0±4,2 90,0±2,2 97,7±2,1 100
100 100
100 100 92,0±4,2 34,3±3,3 50,0±4,1 100
100 100
Цифлутрин
Малатион Фентион Хлорпирифос Хлорофос
100 85,0±4,1
Фосфорорганические соединения
Производные карбаминовой кислоты Бендиокарб 69,3±3,3 80,0±4,1
Пропоксур 100 100 Неоникотиноиды
Тиаметоксам Имидаклоприд Ацетамиприд Клотианидин
0 20,0±4,1 0 0
0 0
0 0
Экспериментально установлено, что в выборках из этих популяций доля особей, устойчивых к лямбда-цигалотрину и цифлутрину, составляла 70-100% и 40-100%, соответственно. Кроме того, изученные популяции были высоко резистентными к фосфорорганическим инсектицидам (малатион, фентион): доля устойчивых особей достигала 90-100%. Исключение составили хлорпирифос и хлорофос, доля устойчивых особей к которым
колебалась от 20% до 92% и от 20% до 100%, соответственно, в связи с менее частым применением этих инсектицидов. Высокая доля устойчивых особей (70-100%) выявлена также к карбаматам: бендиокарбу и пропоксуру.
Таблица 3 – Доля устойчивых к инсектицидам особей (%) в г. Астрахани и в г. Смоленске
Инсектициды
Циперметрин α-Циперметрин Дельтаметрин Эсфенвалерат λ-Цигалотрин
г. Астрахань
г. Смоленск
АСТ-1 F1-2
90,0±4,8 100 74,7±4,1 100
–
АСТ-2 F1-2 Пиретроиды
0 59,4±3,3 80,0±4,8 20,0±2,3 –
СМ-1 F1-2
60,0±5,3 – 57,0±3,3 – 90,0±2,4
СМ-2 F1-2
65,0±4,1 5,0±4,1 73,0±2,0 – 95,0±4,1
– – – 0
– 28,0±4,3 5,0±4,1 0
Фосфорорганические инсектициды Малатион 60,0±2,3 0 – Фентион 0 0 – Хлорпирифос 0 0 – Хлорофос – – 0
Тиаметоксам Имидакоприд Ацетамиприд Клотианидин
Неоникотиноиды 20,0±4,8 0
– – – – – –
– 0 – –
Популяции с двух объектов г. Астрахани различались по уровню резистентности: популяция АСТ-1 была резистентной к малатиону, циперметрину, эсфенвалерату, дельтаметрину, но чувствительной к фентиону, хлорпирифосу, альфациперметрину и тиаметоксаму; популяция АСТ-2 была чувствительной к малатиону, фентиону, хлорпирифосу, циперметрину, эсфенвалерату и тиаметоксаму, но устойчивой к дельтаметрину и альфациперметрину. Различия объясняются интенсивностью проведения обработок на этих объектах и частотой применения этих ДВ.
Смоленские популяции оказались высоко резистентными к пиретроидам, в частности к дельтаметрину, циперметрину и лямбда-цигалотрину, доля резистентных особей составила 50-
95%.
Популяции из Москвы, Астрахани и Смоленска, устойчивые к пиретроидам, ФОС и
карбаматам, в целом были чувствительными к неоникотиноидам (имидаклоприд, тиаметоксам, ацетамиприд и клотианидин).
Нами проведено исследование реверсии чувствительности у этих популяций клопов путем сравнения данных, полученных нами на поколении F1-2 с таковыми, полученными на
последующих поколениях (табл. 4). Так как в нашей стране с 2010 по 2019 гг. давно и широко применяются инсектициды на основе циперметрина (по данным portal.eaeunion.org, зарегистрировано более 50 средств), то для проведения мониторинга резистентности к классу пиретроидов, экспресс-методом, рекомендованным ВОЗ, была применена ДК циперметрина, равная 0,00008%.
Таблица 4 – Реверсия чувствительности к циперметрину в популяциях постельных клопов, собранных в Москве (М), Астрахани (АСТ) и Смоленске (СМ) при разведении в инсектарии в отсутствие инсектицидного пресса
Популяция
Поколение
Доля резистентных особей, %
Поколение
Доля резистентных особей, %
М-1 F1 М-3 F2 М-5 F1 АСТ-1 F2
СМ-1 F1
СМ-2 F2
100 F22 90,0±7,3 F19 100 F17 90,0±4,8 F21 60,0±5,3 F20
3,4±4,7 55,0±4,1 85,0±6,2 0 50,0±8,2 63,0±5,2 57,3±7,1
65,0±4,1
F7 F20
У популяции М-1 в течение 22 поколений наступило полное восстановление чувствительности к циперметрину при разведении в инсектарии НИИД в отсутствие пресса инсектицидов. У клопов в популяции АСТ-1 доля устойчивых особей снизилась с 90% до 0% в течение 19 поколений. Незначительное повышение чувствительности наблюдали у популяции М-5, за 5 лет резистентность снизилась незначительно – от ДК циперметрина выжили не 100%, а 85% особей. В популяции М-3 при разведении в инсектарии у последующих 17 поколений доля устойчивых особей снизилась с 90% до 55%. У двух популяций постельных клопов из Смоленска не наблюдали увеличения чувствительности: доля резистентных особей в течение разведения 18-19 поколений оставалась на уровне 60%. Не выявлено достоверных статистических различий чувствительности клопов в течение 5 лет разведения в инсектарии без пресса инсектицидов.
В 2016-2019 гг. в ходе проведения сбора культур из популяций постельных клопов в разных городах РФ, определялась доля устойчивых особей к циперметрину. Результаты представлены в табл. 5.
Таблица 5 – Доля устойчивых особей постельных клопов C. lectularius к циперметрину в
популяциях, собранных в 2016-2019 гг. (F1)
Место сбора
г. Москва, медицинская организация г. Воронеж, частный дом
г. Воронеж, квартира
г. Иркутск, квартира
г. Архангельск, квартира
Население города, млн. чел.
12,5
1,0
0,60 0,35
Популяция Доля устойчивых особей, %
М-7 100
В-1 100
В-2 46,7±8,5 И-1 90,0±4,1 А-1 43,4±4,7
11

г. Балашов, санаторий 0,08 Б-1 95,0±4,1
Доля резистентных особей в этих экспериментах составила 43-100%, и она не зависела от численности населения города, это показывает, что на территории одного города могут встречаться как чувствительные, так и резистентные популяции. Так, в двух собранных в г. Воронеже образцов популяций клопов C. lectularius чувствительность к циперметрину была разной – от 46% до 100%. У этих популяций было проведено исследование реверсии чувствительности путем сравнения данных, полученных нами на поколении F1-2 с таковыми, полученными на последующих поколениях (табл. 5).
3.4. Определение доли резистентных особей постельных клопов Cimex hemipterus в выборках из популяций, собранных с объектов, к циперметрину
В ходе проведения сбора насекомых нами проводилось определение видовой принадлежности, в ходе которого был обнаружен тропический постельный клоп Cimex hemipterus, который не свойственен нашей климатической зоне. Этот вид был обнаружен в трех местах сбора в Москве, одном в Санкт-Петербурге и одном в г. Гусь-Хрустальный. На выборках из этих популяций определена доля резистентных к циперметрину особей, составившая от 13 до 55%. Появление клопов этого вида в нашей стране может быть связано с миграцией людей из стран Дальнего (Китай, Вьетнам) и Ближнего Зарубежья (Узбекистан, Таджикистан, Кыргызстан). В общем числе иностранцев, въехавших в Россию в 2017 г., граждане Китая составляли 30% (34,4 тыс. чел.), а Вьетнама – 11% (19,3 тыс. чел.) (Е.М. Щербакова, 2017). Основная масса трудовых мигрантов из стран СНГ прибыла из Узбекистана (23,2%) и Таджикистана (18,5%) (по данным www.rod-pravo.org). Более 50% мигрантов оседает в Москве и Московской области, а также в Санкт-Петербурге (Н.В. Мкртчян, 2018). В Москве популяции клопов C. hemipterus М-10 и М-12 собраны нами в квартирах, где проживали граждане Узбекистана и Таджикистана, соответственно. В Санкт-Петербурге наличие этого вида клопов можно объяснить как завозом с товарами из тропических стран, так и миграцией населения внутри стран СНГ.
3.5. Разработка молекулярно-генетического метода (ПЦР) установления наличия kdr-мутаций в популяциях C. lectularius и выявление их в популяциях постельных
клопов, собранных с объектов
После анализа данных мировой литературы проведены исследования по изучению механизмов резистентности и, в частности, kdr-мутаций гена VSCC1 белков натриевого канала в мембранах нервных клеток C. lectularius с целью выявления мутаций L925I и V419L в российских популяциях постельного клопа.
Для амплификации фрагментов гена VSSC1, содержащих мутацию L925I, нами были сконструированы праймеры с использованием программы GeneRunner. Для выявления мутации L925I были использованы праймеры – прямой 5’tgccatgaagttgatagcaatg 3’ и обратный 5’tctccacacaggaccctaaac 3’, размер ампликона 403 п.н., а для мутации V419I – прямой 5’tcctccggtgctggacaatgtaaa 3’ и обратный 5’cttcctcttcagcagcttcttc 3’, размер ампликона 305 п.н. Условия проведения ПЦР амплификации для мутации представлены в табл. 6.
Таблица 6 – Условия ПЦР амплификации для мутации L925I и V419I
Этап Количество Температура инкубации, С° Время, мин/с
циклов V419I L925I
12

I 1
II 40
III 1
94 94 94 94 64 60 72 72 72 72
05:00 00:20 00:20 00:30 05:00
Нами был амплифицирован и секвенирован полиморфный участок гена α-субъединицы VSSC1 у исследованных популяций C. lectularius, кодирующий аминокислотные варианты в позиции 925 и 419. Результаты секвенирования показали, что у семи образцов в позиции 925 α- субъединицы VSSC1 находится остаток лейцина, а у двух – остаток изолейцина, что свидетельствует о наличии мутации. В позиции 419 не выявлено замен аминокислот (табл. 7).
Таблица 7 – Результаты секвенирования популяций клопов из разных городов России
Место сбора Выборка М-1
Позиция 925 L
L
L
L
I
I
L
L
L
Позиция 419
V
V
V
V
V
V
V V
V
Москва
Смоленск
Астрахань
М-2 М-3 М-4 СМ-1 СМ-2 АСТ-1 АСТ-2
Чувствительная раса S-НИИД
Примечание * L – лейцин, I – изолейцин, V – валин.
Данные о наличии мутации kdr типа у смоленских популяций клопов коррелируют с
полученными нами энтомо-токсикологическим методом данными об отсутствии реверсии в течение 18-19 поколений, приведенными в табл. 4.
Зарубежные исследователи из США и Австралии выявили, что большинство устойчивых к дельтаметрину популяций клопов (64%) содержали сразу две мутации – V419L и L925I(F.Zhu et al., 2010). В изученных нами популяциях этот факт не выявлен.
ГЛАВА 4 ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ИНСЕКТИЦИДНЫХ СРЕДСТВ ИЗ РАЗНЫХ ХИМИЧЕСКИХ ГРУПП ПРОТИВ РЕЗИСТЕНТНЫХ
ПОПУЛЯЦИЙ ПОСТЕЛЬНЫХ КЛОПОВ
Известно, что основным принципом борьбы с резистентными к инсектицидам популяциями членистоногих является ротации средств, имеющих альтернативные механизмы действия. В связи с этим, нами изучена эффективность средств на основе веществ природного происхождения, а именно диатомового порошка, силикагеля и их смеси в соотношении 1:1 (табл. 8).
Таблица 8 – Действие образцов диатомового порошка, силикагеля и смеси диатомового порошка с силикагелем в соотношении 1:1 на постельных клопов в дозе 20 г/м2
Образцы Поражение насекомых (%) через …. час Гибель насекомых (%)
через …. час
13

Диатомовый порошок Силикагель Смесь диатомового порошка и силикагеля в соотношении 1:1
Диатомовый порошок Силикагель Смесь диатомового порошка и силикагеля в соотношении 1:1 Контроль S-НИИД Контроль М-3
0,5 1 24 48 Чувствительная раса S-НИИД
0 0 90,0±3,11 100 0 0 100 100 0 0 100 100
Мультирезистентная популяция М-3
0 0 90,0±2,35 100 0 0 100 100 0 0 100 100
0 0 0 0 0 0 0 0
Как видно из табл. 8, в первые часы после обработки гибель насекомых не наблюдали, инсектицидное действие наступило через 24 ч. Образец смеси диатомового порошка и силикагеля обладает большей активность, чем образец, имеющий в своем составе только диатомовый порошок. Результаты токсикологического исследования показали, что образцы по параметрам острой токсичности относятся к 4 классу малоопасных средств и не обладают раздражающим и сенсибилизирующим действием.
Результаты, полученные в ходе экспериментов, указывают на эффективность этих средств в отношении постельных клопов как чувствительных, так и резистентных к инсектицидам. Нами рекомендовано использование этих препаратов в качестве альтернативных средств для борьбы с постельными клопами, в том числе и резистентными к традиционным инсектицидам, и включение их в схемы ротаций инсектицидов для преодоления резистентности сформировавшейся к пиретроидам, ФОС и карбаматам или предотвращения ее формирования.
Нами проведена оценка инсектицидной активности в отношении имаго постельных клопов чувствительной расы S-НИИД и резистентной популяции М-3 средства в беспропеллентной упаковке «Bed bug killer», имеющего в своем составе растительные масла и экстракты. При обработке имаго постельных клопов как чувствительной расы, так и мультирезистентной популяции, средство «Bed bug killer» было неэффективно, поскольку гибель насекомых не превышала 10-15 %, и не обладало остаточным действием как для чувствительных, так и для резистентных клопов. В связи с этим средство не рекомендовано для регистрации и применения.
ГЛАВА 5 РАЗРАБОТКА РЕЦЕПТУРЫ ИНСЕКТИЦИДНОГО СРЕДСТВА В АЭРОЗОЛЬНОЙ УПАКОВКЕ ДЛЯ БОРЬБЫ С ПОСТЕЛЬНЫМИ КЛОПАМИ
В результате проведения мониторинга чувствительности популяций постельных клопов к современным группам инсектицидов на территории России установлено, что популяции повсеместно резистентны к пиретроидам, фосфорорганическим инсектицидам и производным карбаминовой кислоты. Однако все тестированные популяции оказались чувствительными к неоникотиноидам, в частности имидаклоприду и ацетамиприду. Исходя из этого, эти два инсектицида рассматривались в качестве потенциальных действующих веществ для разработки средств с целью борьбы с резистентными популяциями постельных клопов. Как известно, неоникотиноиды не обладают нокдаун-эффектом, поэтому в рецептуру введен пиретроид (d- тетраметрин), обладающий таким действием. Помимо этого, в рецептуру был также введен синергист пиперонилбутоксид (ППБ), который способен подавлять монооксигеназы,
детоксицирующие пиретроиды, и таким образом усиливать инсектицидное действие и пролонгировать его.
В рецептуру средства были введены в качестве действующих веществ имидаклоприд 0,05%, d-тетраметрин – 0,2%, а также синергист ППБ– 0,5% и отдушка. Образцы трех рецептур средства, изготовленные на ОАО «Новомосковск-Аэрозоль», отличались примененными спиртами (этиловый или изопропиловый) и содержанием углеводородного пропеллента (от 30% до 35%).
В программу исследований входило оценить острое и остаточное действие всех трех образцов средства в отношении: постельных клопов чувствительной расы S-НИИД и мульти- резистентной расы М-3 на разных типах поверхностей (табл. 9).
В ходе опытов установлено высокое острое действие трех испытанных рецептур при опрыскивании скоплений насекомых, вызывая сразу после обработки, через 1 час и через 24 часа 100%-е поражение как чувствительных, так и резистентных особей. Это поражение было необратимым, и все клопы как чувствительные, так и резистентные при учете через 24 часа оказались мертвыми. При подсадке чувствительных и резистентных клопов на невпитывающую поверхность (стекло) не выявлено различий в инсектицидности (гибель составила 100% во всех вариантах опыта).
Таблица 9 – Остаточное инсектицидное действие на клопов трех образцов средства на основе смеси имидаклоприда и d-тетраметрина на чувствительных и резистентных постельных клопов при норме расхода 20 г/м2на на разных типах поверхностей
Тип Раса, поверхно популяц
сти ия
S-НИИД М-3 S-НИИД М-3
S-НИИД М-3 S-НИИД М-3
Подсадка насекомых через … суток 15 мин 1
48 ч
100 100 100
24 ч
100
100
100
100
100 100 100 74,0±4,3
100 100 100 70,0±4,1
Поражение и гибель насекомых (%) через … ч
48 ч 24 ч ОБРАЗЕЦ No1
48 ч
100 100 100
24 ч
100 100 100
Стекло Фанера
Стекло Фанера
Стекло
Фанера Контроль
100
100
100 100 100
48,4±6,2 48,4±6,2 20,0±4,1 20,0±4,1
ОБРАЗЕЦ No2 100 100 100 100 100 100
74,0±4,3 20,0±4,1 ОБРАЗЕЦ No3
100 100 100 100 100 81,7±6,2
100 100 100 100 100 100
100 10,0±8,1 20,0±4,1 0 0
100 100 100 100 100 100
10,0±8,1
S-НИИД М-3 S-НИИД М-3 S-НИИД
90,0±4,7 57,7±2,1
70,0±8,2
40,7±3,3 20,6±3,3
М-3 0 0 0 0 0 0
78,0±5,8 40,7±3,3
0 0 0 0 0 0
20,6±3,3
При подсадке чувствительных и резистентных клопов на невпитывающую поверхность (стекло), обработанное тремя образцами, сразу после обработки и через 1 и 7 суток после обработки установлена 100% гибель насекомых.
При подсадке на впитывающую поверхность (фанера) сразу после обработки клопы расы S-НИИД погибли полностью во всех вариантах, а гибель резистентных клопов составляла от 60 до 80%; при подсадке через 1 сутки на 80-100% и 20-50%, соответственно. При подсадке через 7 суток образец No 2 не обладал активностью как для чувствительных, так и для
резистентных клопов; образцы No1 и 3 вызывали гибель 60-100% чувствительных клопов и 20% – резистентных.
По результатам проведенных исследований нами к производству был рекомендован образец No3 с наименьшим количеством пропеллента, что дает возможность осаждения на обработанную поверхность большего количества ДВ за счет более крупных капель. Имидаклоприд, как и все неоникотиноиды, практически не обладает остаточным действием, что нами и было подтверждено в исследованиях по разработке средства. Средство будет действовать при непосредственном опрыскивании скоплений насекомых. Исходя из полученных данных, для увеличения остаточного действия необходимо проводить обработку помещений каждые 3-5 дней, в особенности места скопления клопов.
ГЛАВА 6 КОМПЛЕКСНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ ДЛЯ БОРЬБЫ С ПОСТЕЛЬНЫМИ КЛОПАМИ
Для борьбы с постельными клопами как в медицинской дезинсекции, так и в птицеводстве, целесообразно применять комплексный подход и профилактические (ветеринарно-санитарные и санитарно-гигиенические) меры, используя при этом схемы ротации применяемых инсектицидов для предотвращения возможного развития резистентности или ее преодоления.
В медицинской дезинсекции для борьбы с постельными клопами нами предложены следующие схемы ротации инсектицидов:
 альтернативные традиционным инсектицидам средства на основе диатомового порошка и силикагеля;
 препараты на основе неоникотиноидов;
 препараты на основе фосфорорганических инсектицидов;
 препараты на основе пиретроидов;
 препараты на основе производных карбаминовой кислоты.
Ниже представлена предложенная нами схема чередования инсектоакарицидов в птицеводческих хозяйствах:
 препараты на основе фосфорорганических инсектицидов;
 препараты на основе пиретроидов;
 препараты на основе авермектинов;
 повторная обработка препаратами на основе фосфорорганических инсектицидов.
Внедрение новых препаратов на основе ДВ различных групп повысит качество и эффективность дезинсекционных обработок.
Следует отметить, что схемы ротации необходимо подбирать индивидуально для каждого объекта, в зависимости от инсектицидов, использованных ранее на объекте и уровня чувствительности постельных клопов к инсектицидам.
ВЫВОДЫ
1. Увеличение численности постельных клопов в жилом фонде, медицинских организациях, гостиничных комплексах и промышленном птицеводстве является глобальной проблемой, что связано с формированием популяций этих насекомых, резистентных к инсектицидам, увеличением числа мигрантов и активизацией туризма, использованием вещей «секонд-хенд» и потеплением климата.
2. Ретроспективный анализ ассортимента действующих веществ и препаративных форм за 2010-2018 гг. показал, что в России большая часть средств представлена инсектицидами на основе циансодержащих пиретроидов и ФОС, что является вероятной причиной образования мульти-резистентных популяций постельных клопов.
3. Экспериментально рассчитаны диагностические концентрации для 16 соединений из разных классов химических веществ, с помощью которых определена доля
резистентных особей в популяциях постельного клопа C. lectularius из географически разобщенных точек страны к пиретроидам, ФОС, карбаматам, неоникотиноидам.
4. Разработанный нами молекулярно-генетический метод (ПЦР) позволил выявить kdr-мутацию L925I в гене VSSC1 белка натриевого канала в мульти-резистентных популяциях клопов C. lectularius из Смоленска.
5. Установлена резистентность к пиретроидам (циперметрину) у тропического постельного клопа C. hemipterus.
6. Изученная нами реверсия чувствительности к циперметрину показала закрепленность признака резистентности в изученных популяциях. Реверсия чувствительности может наступать через 3-5 лет при отсутствии инсектицидного пресса.
7. Доказана высокая эффективность средств на основе неорганических веществ – диоксида кремния (диатомовый порошок) и дигидрооксида кремния (силикагеля), а также средства в аэрозольной упаковке, содержащего имидаклоприд, для борьбы с мульти- резистентными популяциями постельных клопов.
8. Средство «Bed bug killer» на основе растительных масел и экстрактов оказалось малоэффективным в борьбе с постельными клопами и не обладало остаточным действием.
9. Подобраны оптимальные схемы чередования инсектицидов на объектах медицинской дезинсекции для борьбы с постельными клопами, включающие в себя как альтернативные средства («Экокиллер», «Gektor») на основе минеральных веществ, так и средства на основе неоникотиноидов, что позволяет эффективно бороться с мульти- резистентными популяциями постельных клопов.