Экспериментальное изучение эмоциогенных эффектов пептидов группы кисспептина

Глава 1 представляет собой обзор литературы и описывает современные
представления о регуляции полового поведения и возможностям фармакологи-
ческой коррекции половых дисфункций, связанных с мотивацией и снижением
уровня тестостерона в крови (С.13-35).
Глава 2 включает описание основных методических приемов, которые были
использованы при выполнении диссертации (С.35-45).
Глава 3 описывает результаты собственных исследований автора (С.46-79).
Глава 4 содержит общее обсуждение полученных результатов и основные
перспективы исследования (С.80-88).
В заключении приведены выводы (С.89-92), научно-практические рекомендации
(С.92-93) и список использованных литературных источников (С.94-111).

!

МАТЕРИАЛЫ!И!МЕТОДЫ!ИССЛЕДОВАНИЯ
Выбор животных. В работе были использованы 340 крыс самцов линии Ви-
стар, полученных из питомника лабораторных животных «Рапполово» (Ленин-
градская область).
Среди самок крыс, выращенных в условиях социальной изоляции, детеныши
которых становились способными к самообеспечению на 17-й день после рожде-
ния, отбирали самцов и рассаживали в отдельные клетки.
Исследование полового поведения у крыс самцов. В данном исследова-
нии использовалось 50 самцов крыс Вистар, наивных в отношении контакта с
самками (100 дней, массой 220-250 г), разделенных на 5 групп по 10 особей каж-
дая. Первую группу составили интактные животные, в то время как в остальных
группах применялись гормональные и негормональные регуляторы полового
поведения.
Для оценки половой мотивации использовали установку (85 × 35 × 50 см),
допускающую свободное передвижение и включающую камеру, отделенную
прозрачной перфорированной стенкой из плексигласа (15 × 35 × 50 см высотой),
смонтированную на одной из торцевых стенок. Перфорированная перегородка
позволяла самцам крыс исследовать (обонять) потенциального партнера (самку в
стадии эструса) в камере, но препятствовала тактильному взаимодействию или
копуляции. За день до тестирования мотивационного поведения все эксперимен-
тальные животные были адаптированы к условиям установки в течение 30 ми-
нут.
Поведение регистрировали в форме видеозаписи в темной комнате при
красном свете в течение 10 минут. Между экспозициями установку и перегород-
ку очищали 3%-ным раствором перекиси водорода для устранения запаха. Для
измерения половой мотивации для каждого животного фиксировали число попы-
ток достичь самки, время, проведенное вблизи перегородки и латентное время до
начала реакции на самку.
Анализ уровня тестостерона. Образцы крови у крыс самцов брали из хво-
стовой вены через 30 минут после введения вещества. Сыворотку отделяли путем
центрифугирования (8000 об/мин). Образцы замораживали и хранили при темпе-
ратуре -80oC до проведения иммуноферментного анализа. Концентрации тесто-
стерона в сыворотке крови измеряли с помощью твердофазного иммунофермент-
ного анализа (ИФА) с использованием тест-системы «Тестостерон стероид-ИФА»
(Алкор-Био, Россия), в соответствии с инструкциями производителя.
Условная реакция предпочтения места (УРПМ) кисспептина-10. Для
выработки УРПМ у крыс использовали установку, представляющую собой две
камеры одинакового размера, отличающиеся поверхностью пола (одна из камер
была с гладким полом, другая – с решетчатым полом) и соединенных между
собой перегородкой с отверстием. Крыс самцов поочередно помещали в обе
камеры на 30 мин в каждую из камер с интервалом между посадками 1 ч один раз
в день в течение 4 дней.
Физиологический раствор (20 мкл, по 10 мкл в каждую ноздрю) крысы по-
лучали перед посадкой в 1-ую камеру, а кисспептин-10 (20 мкг в 20 мкл, по 10
мкл в каждую ноздрю) – перед посадкой во 2-ую камеру. Животным контроль-
ной группы вводили только физиологический раствор. Крысы эксперименталь-
ной группы были разделены на две подгруппы, чтобы исключить влияния тек-
стуры пола на выработку УРПМ кисспептина-10. Животных 1-й подгруппы из-
начально помещали в отсек с решетчатым полом, а 2-й подгруппы – с гладким
полом, затем меняли последовательность помещения камеры на противополож-
ную. На 5-й день эксперимента с целью оценки выработки УРПМ кисспептина-10
животных на 15 мин помещали в установку с открытой перегородкой и регистри-
ровали время нахождения в каждом из отсеков. Результаты выражали в процентах
от времени пребывания в отсеке, ассоциированном с введением кисспептина-10,
к общему времени исследования.
Исследования поведения крыс проводили в тесте «открытое поле», «интру-
дер-резидент», «приподнятый крестообразный лабиринт», тест «Порсолта» (Ле-
бедев А.А. и др., 2019), а также оценивали тревожно-фобическое состояние. В
силу того, что большинство использованных поведенческих методик хорошо
известны и широко описаны, остановимся лишь на последней из них.
Изучение тревожно-фобических состояний. С помощью многопараметро-
вого метода определяли тревожно-фобическое состояние (ТФС) крыс. Данный
метод определяется с использованием ранжированной шкалы. В эту шкалу входят
параметры, которые характеризуют определенные реакции животного на серию
тест-стимулов, которые провоцируют возникновение состояний страха и тревож-
ности. Далее суммируется сумма баллов по каждому тесту отдельно, после чего
сравниваются группы животных между собой (Лебедев А.А. и др., 2017).
Фармакологические вещества, используемые в работе. Кисспептин-10
(«Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепа-
ратов», Россия) вводили интраназально в дозе 20 мкг (в 20 мкл, по 10 мкл в каж-
дую ноздрю), и 1 мг/кг внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл. Бусерелина ацетат,
рассматриваемый как аналог гонадотропин-рилизинг гормона (ООО «Фарм-
Синтез», Россия) вводили интраназально в дозе 3 мкг в 20 мкл (по 10 мкл в каж-
дую ноздрю). Йохимбина гидрохлорид, альфа-адреноблокатор (ФК «Здоровье»,
Украина) вводили внутрибрюшинно в дозе 0,2 мг в объеме 0,2 мл. Контрольные
животные получали физиологический раствор интраназально 20 мкл (10 мкл в
каждую ноздрю) и внутрибрюшинно 0,2 мл.
Статистические методы анализа. Оценку статистической достоверности
различий проводили при помощи пакета программ SPSS Sigma Stat 8.0, GraphPad
Prism 6 с использованием однофакторного дисперсионного анализа. Для сравне-
ния контрольной и экспериментальных групп использовали однофакторный
дисперсионный анализ ANOVA. Из непараметрических критериев использовали
критерий Краскела – Уоллиса для сравнения групп. Различия считали статисти-
чески значимыми при значении р <0,05. Для представления полученных данных использовали такие показатели описательной статистики, как среднеарифметиче- ское значение и ошибка среднего. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследование половой мотивации у крыс самцов. Для каждого живот- ного фиксировали время, проведенное вблизи перегородки, латентное время до начала реакции на самку и число попыток достижения самки самцом у перего- родки (рис. 1). Рисунок 1 – Латентный период достижения самки самцом *p<0,05 по сравнению с физиологическим раствором. Интраназальное введение кисспептина-10 почти в 1,5 раза увеличило (19,5±3,0 сек) число попыток достижения самки самцом у перегородки в сравне- нии с контролем (13,2±3,0 сек). Внутрибрюшинное введение кисспептина-10 не меняло (14,3±2,0 сек) число попыток достижения самки самцом у перегородки по сравнению с контролем (13,2±3,0 сек). То же время, интраназальное введение бусерелина ацетата почти в 1,5 раза (9,8±1,3 сек) сократило число попыток до- стижения самки самцом у перегородки по сравнению с контролем (13,2±3,0 сек). Важно отметить, что внутрибрюшинное введение йохимбина гидрохлорида прак- тически не оказало влияние на количество попыток (рис. 2). Следовательно, полученные данные указывают на специфическую регуля- торную роль кисспептина-10 в мотивации полового поведения, что подкрепляет- ся фактами усиления кисспептином-10 предпочтения самцами самок. Анализ уровня тестостерона в крови крыс самцов. Интраназальное вве- дение бусерелина ацетата в 3 раза (до 47,5±29,5 нмоль/мл) увеличило концентра- цию тестостерона в крови у крыс самцов по сравнению с контролем (14,5±6,2 нмоль/мл). В то же время, интраназальное и внутрибрюшинное введение кисспеп- тина-10 не влияло на уровень тестостерона (11,2±4,0 нмоль/мл и 13,1±4,0 нмоль/мл соответственно) по сравнению с контролем (14,5±6,2 нмоль/мл). Внут- рибрюшинное введение йохимбина гидрохлорида (рис. 3) также значимо не меня- ло концентраций тестостерона в крови у крыс самцов (13,2±4,0 нмоль/мл) по срав- нению с контрольной группой (14,5±6,2 нмоль/мл). Рисунок 2 – Число попыток достижения самки самцом у перегородки *p<0,05 по сравнению с физиологическим раствором. Рисунок 3 – Уровень тестостерона в крови у крыс самцов *p<0,05 по сравнению с физиологическим раствором. Данные исследования указывают на то, что кисспептина-10, по-видимому, действует центрально на структуры мозга, участвующие в реализации половой мотивации. Полученные результаты подтверждают идею существования незави- симого от регуляции половых стероидов механизма действия кисспептина-10, на что указывают результаты опытов, представленных на рисунке 3. Исследование условной реакции предпочтения места (УРПМ) кисспеп- тина-10. Группа животных, которым вводили интраназально 20 мкл физиологи- ческого раствора, проводила приблизительно одинаковое время в обоих камерах при исследовании выработки УРПМ кисспептина-10 (51,2% и 48,8% времени эксперимента, что в среднем составило 461 ± 51 сек и 439 ± 49 сек). Животные, которым вводили интраназально кисспептин-10, проводили достоверно больше времени в камере, ассоциированной с введением кисспептина-10 (78,6% ±6,3% времени эксперимента), чем при введении физиологического раствора (p˂0,05). Это подтверждает, что на интраназальные введения кисспептина-10 крысам в дозе 10 мкг (в 20 мкл, по 10 мкл в каждую ноздрю) вырабатывается УРПМ. Можно предположить, что кисспептин-10 активирует зоны головного мозга, ответствен- ные за формирование эмоционально-положительного состояния. В сходных условиях эксперимента йохимбина гидрохлорида при внутри- брюшинном введении также способствовал выработке УРПМ, что подтверждает- ся увеличением почти в 1,5 раза времени нахождения животного в камере, ассо- циированной с введением йохимбина гидрохлорида (443 ± 36 сек в сравнении с 286 ±44 сек после введения физиологического раствора). Важно отметить, что в тесте УРПМ кисспептин-10, вводимый интраназаль- но, был более активен, чем кисспептин-10, вводимый внутрибрюшинно, возмож- но, за счет более активного проникновения пептида через гематоэнцефалический барьер. Исследованиевлияниякисспептина-10наэмоционально- исследовательское и двигательное поведение у крыс самцов. Кисспептин-10, вводимый внутрибрюшинно самцам крыс, увеличивал двигательную активность, но снижал показатели исследовательской активности («открытое поле») и повы- шал уровень тревожности (приподнятый крестообразный лабиринт) при сниже- нии уровня депрессивности (тест Порсолта). Интраназальное введение кисспеп- тина-10 увеличивало двигательную и исследовательскую активность, а также проявления защитного поведения в тесте «резидент-интрудер». Сопоставитель- ные данные по введению кисспептина-10 интраназально и внутрибрюшинно представлены в таблицах 1 и 2. Исследование! действия! кисспептина-10 на! половое! поведение! самцов! крыс, выращенных! в! условиях! социальной! изоляции.! Целью! этого! раздела! исследования! было! изучить! влияние! социальной! изоляции! на! половую! мотива- цию! у! самцов! крыс. У крыс, выращенных в условиях социальной изоляции от сородичей с 17-го дня жизни до половозрелости (100 дней), регистрировали число! попыток! достижения! самки! самцом! у! перегородки, время! нахождения! самца! рядом!с!самкой!и!латентное!время!до!начала!реакции!на!самку, а!также!опреде- ление!уровня!тестостерона!в!крови!крыс!самцов!с!хроническим!стрессом. Таблица!1 – Поведение!крыс!самцов!в!«открытом!поле»!после!интраназального! введения!физиологического!раствора, кисспептина-10 или бусерелина!ацетата (M±m)! Интраназальное введение! Паттерны! NaCl!KISS-10!Бусерелина!ацетат! Локомоция!n!11,28±1,38!19,29±3,59!18,67±3,35! p!0,117±0,006!0,174±0,025*!0,166±0,021*! t!19,35±3,46!44,86±7,71**!34,77±6,00*! Обнюхивание!n!42,14±3,47!39,29±2,36!40,14±4,85! p!0,445±0,004!0,376±0,016**!0,409±0,009**! t!102,13±3,16!70,54±10,13**!78,43±4,63**! Движение наn!25,43±1,46!20,86±1,89!21,86±1,47! месте! p!0,273±0,013!0,206±0,029!0,248±0,037! t!24,45±2,15!17,49±1,81*!18,44±2,73! Исследованиеn!7,57±0,86!15,29±2,50**!10,29±2,10! норок! p!0,079±0,004!0,140±0,017**!0,098±0,019! t!13,90±1,67!25,57±4,48*!16,23±3,71! Примечание: n – число актов; t – время акта; p – вероятность появления акта. *р<0,05; **р<0,01 к контролю. Таблица!2 – Поведение!самцов!крыс!в!«открытом!поле»!после!внутрибрюшинного! введения!физиологического!раствора, кисспептина-10 и йохимбина!гидрохлорида! (M±m)! Внутрибрюшинное введение! Паттерны! NaCl!Йохимбина!KISS-10! гидрохлорид! Локомоция!n!18,83±2,79!20,29±1,67!19,86±1,93! p!0,173±0,018!0,175±0,009!0,236±0,019*! t!49,85±5,56!47,55±6,22!74,79±8,15*! Обнюхивание!n!43,50±2,19!48,57±1,69!29,00±1,35**! p!0,409±0,008!0,425±0,007!0,351±0,022*! t!71,62±4,42!79,25±6,44!49,76±5,23**! Движение наn!20,83±0,87!23,86±2,13!16,57±1,48*! месте! p!0,199±0,015!0,211±0,021!0,201±0,022! t!16,83±2,05!15,24±1,39!14,31±2,64! Исследова-n!14,50±1,38!10,14±2,19!7,57±2,08*! ние норок! p!0,135±0,009!0,087±0,017*!0,089±0,024! t!14,57±1,74!9,49±2,12!13,51±4,76! Примечание: n – число актов; t – время акта; p – вероятность появления акта. *р<0,05; **р<0,01 к контролю. У самцов с хроническим стрессом социальной изоляции незначительно уве- личилось латентное время (до 11,2±9,6 сек) до начала реакции на самку по срав- нению с группой интактных животных (8,0±4,5 сек). Кисспептин-10, вводимый интраназально или внутрибрюшинно, сократил латентное время в 2 раза (до 5,3±1,7 сек и 6,1±5,0 сек соответственно). Бусерелина ацетат при интраназальном введении значимо не влиял на латентный период реакции на самку (7,9±5,1 сек против 11,2±9,6 сек в контроле) (рис. 4). ! Рисунок 4 – Латентный период (сек) до начала реакции на самку у крыс самцов, выращенных в условиях социальной изоляции *p<0,05 по сравнению с контрольной группой. Рисунок 5 – Время, проведенное самцом-изолянтом рядом с самкой у перегородки *р<0,05 относительно контроля; @р<0,05 относительно крыс-изолянтов. В противоположность представленным выше данным, самцы крыс, выра- щенных в условиях социальной изоляции, в 2 раза меньше (до 167,6±64,4 сек) проводили рядом с самкой у перегородки по сравнению с группой интактных животных (372,3±37,8 сек). Кисспептин-10, вне зависимости от способа введения (интраназально или внутрибрюшинно), в 1,5 раза увеличил время, проведенное самцом-изолянтом рядом самкой у перегородки. Бусерелина ацетат, вводимый интраназально, умеренно (не достоверно) увеличивал время нахождения самца у перегородки (до 208,1±52,6 сек), хотя эти значения были существенно ниже ин- тактных животных (рис. 5). Социальная! изоляция! существенно! не меняла числа попыток достижения самки самцом (11,6±3,0 против 13,8±3,1 в контроле). Бусерелина ацетат при ин- траназальном введении животным, выращенным в условиях социальной изоля- ции, существенно не влиял на число попыток достижения самки самцом у перего- родки (16,3±6,6 по сравнению с контролем – 11,6±3,0). Интраназальное введение кисспептина-10 крысам-изолянтам в 1,5 раза уве- личило (до 17,5±3,5) число попыток достижения самки самцом у перегородки по сравнению с контролем (11,6±3,0). При внутрибрюшинном введении кисспепти- на-10 крысам-изолянтам пептид почти в 2 раза увеличил число попыток достиже- ния самки самцом у перегородки (до 19,3±3,9 против 11,6±3,0 в контроле) (рис. 6). Выращивание животных в условиях социальной изоляции, рассматриваемое нами как стресс социальной изоляции, в 2 раза снижало уровень тестостерона (до 7,5±9,5 нмоль/мл) в сравнении с интактным контролем (14,5±6,2 нмоль/мл). Бусе- релина ацетат, введенный крысам-изолянтам интраназально, почти в 2,5 раза (до 19,5±4,3 нмоль/мл) увеличил уровень тестостерона в крови у крыс самцов по сравнению с контролем (7,5±9,5 нмоль/мл). ! Рисунок 6 – Число попыток достижения самки самцом-изолянтом *р<0,05 относительно крыс, выращенных в условиях социальной изоляции Кисспептин-10, в зависимости от способа введения крысам-изолянтам, ока- зывал разные эффекты: при введении интраназально – достоверно не менял уров- ня тестостерона (9,2±4,0 нмоль/мл), а при введении внутрибрюшинно – повышал его до 13,6±4,2 нмоль/мл, что практически соответствовало уровню интактных животных (14,5±6,2 нмоль/мл) (рис. 7). Рисунок 7 – Уровень тестостерона в крови крыс самцов, выращенных в изоляции *р<0,05 относительно контроля; @р<0,05 относительно крыс-изолянтов. ! Полученные результаты указывают на то, что хронический стресс (в нашем случае выращивание в условиях социальной изоляции) значительно снижает уровень тестостерона и подавляет некоторые компоненты половой мотивации у самцов крыс. Кисспептин-10 способен корригировать отклонения в половом по- ведении животных, воздействуя главным образом на мотивационные компоненты полового поведения. Заключение Основные итоги выполненной работы. Экспериментальное исследование поведенческих и биохимических эффектов кисспептина-10, минимального фраг- мента кисспептина, оказывающего влияние на половое поведение, позволило конкретизировать его действие на отдельные компоненты полового поведения и гормональный статус грызунов (крыс). В частности, найдено, что кисспептин-10 при интраназальном и внутрибрюшинном введении активирует половую мотива- цию у крыс самцов, что проявляется рядом поведенческих особенностей: увели- чением числа подходов к самке в стадии эструса, снижении латентного периода приближения к самке и т.д. Эффект кисспептина-10 на половое поведение реали- зуется независимо от уровня половых стероидов (тестостерона) в крови, что дока- зывает его преимущественно центральное действие. Кроме полового поведения, кисспептин-10 вызывает выработку условной реакции предпочтения места у крыс, повышает общую двигательную и исследовательскую активность самцов крыс, стимулирует у них защитное поведение и снижает уровень депрессивности, что указывает на возможность наличия у него антидепрессантных свойств акти- вирующего типа. У крыс, выраженных в условиях социальной изоляции от соро- дичей, кисспептин-10, в зависимости от способа введения крысам-изолянтам, оказывает разные эффекты: при интраназальном введении – восстанавливает сниженную изоляцией половую мотивацию до уровня интактных крыс, при внут- рибрюшинном введении – повышает половую мотивацию и выработку тестосте- рона. По своим фармакологическим эффектам киспептин-10 отличается от дей- ствия аналога гонадотропин-рилизинг гормона бусерелина, который при интра- назальном и внутрибрюшинном введении не влияет на половую мотивацию сам- цов крыс, но повышает уровень тестостерона в крови. У крыс-изолянтов бусере- лин также повышает только уровень тестостерона в крови, не влияя на половую мотивацию. Антагонист альфа-2-адренорецепторов йохимбин, традиционно ис- пользуемый для лечения половых дисфункций у мужчин, умеренно повышает половую мотивацию, не влияя на уровень тестостерона. При этом йохимбин, как и кисспептин-10, инициирует выработку условной реакции предпочтения места, тем самым положительно влияя на психоэмоциональное состояние животного. Таким образом, кисспептин-10 может рассматриваться как высоко активный фармакологический агент, повышающий половую мотивацию у интактных жи- вотных, устраняющий ее снижение в результате воздействия стресса, действие которого не зависим от уровня половых стероидов (тестостерона) в крови. Перспективы дальнейшего исследования. Пептидные фармакологические препараты прочно вошли в арсенал современной психофармакологии. Однако в сфере лечения половых дисфункций они практически не применяются. Действие рассматриваемого в работе бесерелина, аналога гонадотропин-рилизинг гормона, ограничивается в основном его стимулирующим влиянием на выработку половых гормонов (тестостерона), с чем связывают возможное повышение половой моти- вации при его назначении. Однако следует помнить, что рилизинг-гормоны не имеют половой специфичности и стимулируют также образование гормонов про- тивоположного пола (в данном контексте эстрогенов, в основном надпочечника- ми), которые в полной мере не позволяют развернуться их эффектам на аппетент- ную компоненту полового поведения. Поэтому появление таких пептидных пре- паратов, как кисспептин-10, в значительной мере может продвинуть идею фарма- кологического восстановления (не коррекции!) полового поведения за счет акти- вации естественных механизмов, каковыми являются вовлечение всех кисспепти- новых пептидов (-10, -13, -56) и их рецепторов в данный процесс. Роль пептидов должна рассматриваться с позиции их «тюнингового» (настроечного) значения (Шабанов П.Д., 2020) в отношении измененной физиологической функции, в данном случае полового поведения, и специально его аппетентной компоненты. Особо важен способ доставки пептида в головной мозг. В настоящем иссле- довании мы сопоставили системное (внутрибрюшинное) и локальное (интра- назальное) введение кисспептина-10, при этом выявлено, что интраназальное введение не только не уступает системной доставке пептида, но и имеет значимые преимущества. Более того, это удобный, быстрый и физиологически легко до- ступный путь доставки лекарственного препарата в мозг, а современные лекар- ственные формы в виде назального спрея или даже закапывания в нос раствора с пептидом с помощью пипетки делают востребованным данный путь введения пептидов, как с точки зрения специалистов, так и с позиции потребителя. Достав- ляемое количество пептида при этом минимально и, как правило, не вызывает никаких нежелательных явлений, кроме возможной индивидуальной непереноси- мости компонента лекарственного препарата. Поэтому с большой долей вероят- ности можно утверждать, что за данным путем доставки есть будущее. ВЫВОДЫ 1. Кисспептин-10 при интраназальном и внутрибрюшинном введении акти- вирует половую мотивацию у крыс самцов, увеличивая число подходов к самке и снижая латентный период приближения к ней. Эффекты кисспептина реализуют- ся независимо от уровня половых стероидов и не влияют на концентрацию тесто- стерона в крови, что доказывает его преимущественно центральное действие. 2. Аналог! гонадотропин-рилизинг! гормона! бусерелин! при! интраназальном! и! внутрибрюшинном! введении! не! влияет! на! половую! мотивацию! у! крыс, но! по- вышает! уровень! тестостерона! в! крови. Следовательно, механизм! действия! бусе- релина! связан! преимущественно! с! активацией! гормонального! звена! полового! поведения и вторичным!действием!тестостерона!на!структуры!головного!мозга. 3. Интраназальное введение кисспептина-10 вызывает выработку условной реакции предпочтения места у крыс, в противоположность действию аналога гонадотропин-рилизинг гормона бусерелина, который не обладает подкрепляю- щими свойствами. По-видимому, кисспептин-10 активирует структуры положи- тельного подкрепления головного мозга, что формирует эмоционально- положительное состояние животного, относящееся в данном случае к реализации половой мотивации. 4. Внутрибрюшинное введение антагониста альфа-2-адренорецепторов йо- химбина, который традиционно используется для лечения половых дисфункций у мужчин, умеренно повышает половую мотивацию, не влияя на уровень тестосте- рона. Йохимбин инициирует выработку условной реакции предпочтения места, тем самым положительно влияя на психоэмоциональное состояние животного. 5. Кроме влияния на половое поведение, кисспептин-10 повышает общую двигательную и исследовательскую активность самцов крыс, стимулирует у них защитное поведение и снижает уровень депрессивности, что указывает на воз- можность наличия у него антидепрессантных свойств активирующего типа. 6. У крыс самцов, выращенных в условиях хронического стресса социаль- ной изоляции, снижается половая мотивация и уровень тестостерона в крови. Кисспептин-10, в зависимости от способа введения крысам-изолянтам, оказывает разные эффекты: при интраназальном введении – восстанавливает сниженную изоляцией половую мотивацию до уровня интактных крыс, при внутрибрюшин- ном введении – повышает половую мотивацию и выработку тестостерона. При этом бусерелин значимо повышает только уровень тестостерона в крови. СПИСОК!ПУБЛИКАЦИЙ Работы, опубликованные!в!журналах!списка!ВАК 1. Tissen, I. Kisspeptin steroid-independently regulates sexual motivation in male rats / I. Tissen, L. Magarramova, A. Kraskova, P. Khokhlov, A. Lebedev, P. Shabanov // Eur. Neuropsychopharmacology. – 2019. – Vol. 29. – P. 578-579. 2. Тиссен, И.Ю. Условная реакция предпочтения места кисспептина-10 / И.Ю. Тиссен, П.А. Чепик, А.А. Лебедев, Л.А. Магаррамова, Е.Р. Бычков, П.Д. Шабанов // Обз. по клин. фармакол. и лек. терапии. – 2021. – Т.19, №1. – C.47–53. 3. Лебедев, А.А. Самостимуляция латерального гипоталамуса пороговой силой тока вызывает эмоциональное переедание в условиях пищевой самодепри- вации у сытых крыс: роль орексиновой и дофаминергической систем мозга / А.А. Лебедев, Ю.А. Бессолова, Н.С. Ефимов, Е.Р. Бычков, И.В. Карпова, И.Ю. Тиссен, Л.А. Магаррамова, Г.П. Косякова, В.В. Русановский, П.Д. Шабанов // Обз. по клин. фармакол. и лек. терапии. – 2021. – Т. 19, №4. – С. 417–429. 4. Tissen, I. Possible role of kisspeptin in testosterone-independent regulation of sexual motivation in male rats / I. Tissen, L. Magarramova, S. Proshin, P. Shabanov, R. Badrutdinov, Z. Takeeva // Georgian Med. News. – 2022. – № 323. – С. 122-125. 5. Magarramova, L.A. Kisspeptin is testosterone independent regulator of sexu- al motivation in male rats / L.A. Magarramova, I.Y. Tissen, A.A. Blazhenko, A.A. Lebedev, S.I. Loskutov, S.N. Proshin // Journal of experimental biology and agricultural sciences. – 2022. – Vol. 10. – P. 131-134. Работы, опубликованные в сборниках научно-практических работ 1. Magarramova, L.A. Gonadotropin releasing hormone and kisspeptin inde- pendently regulated sexual motivation in male rats / L.A. Magarramova, I.Y. Tissen, A.S. Kraskova, A.A. Lebedev, P.D. Shabanov // Stress and behavior. Conf. abstracts collection. – St. Petersburg, 2019. – P.49-50. 2. Краскова, А.С. Влияние кисспептина Kiss-10 на половую мотивацию сам- цов крыс линии Wistar / А.С. Краскова, Л.А. Магаррамова // VIII Междунар. молодежный мед. конгресс: Санкт-Петербургские научные чтения. – 2019. – С. 463. 3. Tissen, I.Y. Gonadotropin releasing hormone and kisspeptin independently regulated sexual motivation in male rats / I.Y. Tissen, L.A. Magarramova, A.S Kraskova, P.P Khokhlov, A.A. Lebedev, P.D. Shabanov / Steroids and nervous system. – Torino, 2019. – P.204-205. 4. Тиссен, И.Ю. Кисспептин регулирует половую мотивацию самцов крыс независимо от действия тестостерона / И.Ю. Тиссен, Л.А. Магаррамова, А.С. Краскова, П.П. Хохлов, А.А. Лебедев, П.Д. Шабанов // Обз. по клин. фармакол. и лек. терапии. – 2020. – Т. 18, Прил. 1. – С. 74–75. 5. Tissen, I.Y. Effect of hormonal and non-hormonal correctors on sexual motiva- tion in rats after chronic social isolation / I.Y. Tissen, L.A. Magarramova, A.S. Kraskova, A.A. Lebedev, P.D. Shabanov // Stress and behavior. Conf. abstracts collec- tion. – St. Petersburg, 2020. – P.16-17. 6. Magarramova, L.A. Experimental study of the emotionogenic effects of pep- tides of the kisspeptin group / L.A. Magarramova, A.A. Lebedev, A.G. Pshenichnaya, P.D. Shabanov // Stress and behavior. Conf. abstracts collection. – St. Petersburg, 2021. – P.44-45. 7. Tissen I.Y., Magarramova L.A., Lebedev A.A., Shabanov P.D. Effect of pep- tide hormones on sexual motivation in rats after chronic social isolation / I.Y. Tissen, L.A. Magarramova, A.A. Lebedev, P.D. Shabanov // MedChem-Russia 2021. – Матер. 5-ой Рос. конф. по мед. химии с междунар. участием. – Волгоград, 2021. – С. 285. !