Фармакологические эффекты некоторых лекарственных трав республики Судан при остром токсическом гепатите, дисметаболических нарушениях и хронических дерматозах (экспериментальное исследование)

Все эксперименты, уход и содержание животных осуществлялись в соответствии с Директивой No 63 от 22 сентября 2010 года Президиума и Парламента Европы «О защите животных, используемых для научных исследований», «Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник от 06.04.1993 и приказом Минздрава РФ No 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики». Исследование проводилось на 150 нелинейных крысах обоего пола в возрасте 8-12 недель массой 180-220 г и 48 белых половозрелых мышах обоего пола, полученных из питомника «Андреевка» ФГБУН “НЦБМТ” ФМБА России.
Животных распределяли по группам, используя в качестве критерия массу тела. На начало эксперимента отклонение в массе животных было минимальным и не превышало ±10 % от средней массы ранее дозированных животных. Каждому животному при формировании группы присваивали номер в соответствии с цветовой маркировкой.
Условия содержания соответствовали видовой принадлежности и способствовали сохранению здоровья и комфорта животных. Во время исследования животных содержали группами по 6-9 особей в клетке раздельного содержания по полу при свободном доступе к воде и корму. Световой цикл состоял из 12 часов дня и 12 ночи. Животных содержали в контролируемых условиях окружающей среды (температура 19-25 °С, относительная влажность 30-70%).
Все манипуляции, вызывающие боль, проводились под наркозом, состоящим из Рометара (2% ) 0,05мл на 1 кг и Золетила
(таблица 1).
ксилазина гидрохлорида
(золазепама
гидрохлорида, тилетамина гидрохлорида в равных пропорциях) 10 мг/кг.
Дизайн исследования одобрен Локальным этическим комитетом ФГБОУ
ВО «МГУ им. Н.П.Огарёва» ( протокол No 44 от 18.11.2016 г.). В таблице 1
представлена структура экспериментального исследования
Таблица 1 – Структура экспериментального исследования No Экспериментальные Схемы введения
Количество животных
5 5 5
10 5
группы
1 Интактные животные
2 Контроль 1
3 Контроль 2
4 Контроль 3
5 Cymbopogon proximus + ССl4 0,3
мл
6,7 Acacia nilotica +
50% ССl4 по 0,6 мл 8 Trigonella foenum- graecum+ССl4 0,3 мл
Модель острого токсического гепатита, CCL4
0,1 мл физиологического раствора на одну особь, в течение 15 дней. внутрибрюшинно 50% ССl4 0,6 мл однократно внутрибрюшинно
50% ССl4 0,3 мл однократно внутрибрюшинно
50% ССl4 0,2 мл однократно внутрибрюшинно
Водный экстракт 1:10 2 мл, внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Водный экстракт 1:10 2 мл, внутрибрюшинно ежедневно 5 суток Водный экстракт 1:10 2 мл, внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Модель дисметаболических нарушений
0,1 мл физиологического раствора на одну
особь, в течение 5 дней.
Ежедневно дексаметазон 800 мкг /кг + 0,1 мл физиологического раствора на одну особь в 5 течение 5 дней
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг в/м +
вводный экстракт 1:10 Lupinus termis 2 мл 5 внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг + водный
экстракт Cymbopogon proximus 1:10 2 мл 5 внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг +
водный экстракт гад-гад 1:10 2 мл 5 внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Ежедневно дексаметазон 800 мг/кг + водный
экстракт Аcacia nilotica,1:10 2 мл 5 внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
9 Интактные животные
10 Контроль
11 Водный экстракт Lupinus termis
12 Водный экстракт Cymbopogon
proximus
13 Водный экстракт
Geigeria alata
14 Водный экстракт Аcacia nilotica
15
Водный экстракт Solenostemma argel
Водный экстракт Trigonella foenum- graecum
Ежедневно дексаметазон 800 мг/кг + водный экстракт Solenostemma argel 1:10 2 мл внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг + водный экстракт Solenostemma argel 1:10 2 мл внутрибрюшинно ежедневно 5 суток
5
16 Интактные животные
17 Контроль 1
Псориаз у белых мышей
0,1 мл физиологического раствора на одну
особь, в течение 4 дней.
Обработка кожи кремом Кераворт 5% 6
18 Контроль 2
19 Контроль с препаратом
сравнения
20 Масляная эмульсия
порошок Trigonella
foenum-graecum 1:2
21 Масляная эмульсия порошок Acacia
nilotica 1:2
22 Масляная эмульсия
Ammi visnaga
23 Масляная эмульсия
Cyperus rotundus
24 Интактные животные
25 Контроль
26 Контроль
имиквимода (6,25 мг имиквимода) 4 дня ежедневно
Обработка кожи кремом Кераворт 5% имиквимода (6,25 мг имиквимода) + вазелин 6 4 дня ежедневно
Кераворт и топические стероиды Элоком
(0,1% мометазона фуроата) наружно местно 6
Кераворт+ Масляная эмульсия Trigonella foenum-graecum 1:2 местно наружно 4 дня 6
Кераворт+ Масляная эмульсия Acacia nilotica
1:2 местно наружно 4 дня 6
Кераворт+ Масляная эмульсия Ammi visnaga
Кераворт + Масляная эмульсия Cyperus rotundus1:2 местно наружно 4 дня
0,1 мл физиологического раствора на одну особь, в течение 5 дней
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг + мазь 2 % натрия фузидат местно 5 дней
Ежедневно дексаметазон 800 мкг/кг + вазелин
6 6
5 5 5
Исследование регенераторных процессов инфицированной раны кожи белых крыс при экспериментальной гипергликемии, вызванной дексаметазоном 800 мкг/кг, препарат сравнения мазь фузидин местно, содержащей натрия фузидат 20 мг в 1 г (2 % – 15 г, LeoPharma A/S (Дания)
27
Cymbopogon proximus
Мазь на основе вазелина порошка растительного сырья Cymbopogon proximus местно в концентрации 1:2 в сочетании с приёмом водного экстракта Cymbopogon proximus 1:10 ежедневно по 2 мл перорально на протяжении 5 дней
5
28
Cyperus rotundus
Cyperus rotundus местно мазь на основе вазелина1:2 и внутрь водный экстракт 1:10 ежедневно по 2 мл перорально на протяжении 5 дней
5
29 Acacia nilotica
31 Интактные животные
32 Контроль
33 Контроль
34 Контроль
Acacia niloticaи местно мази на основе
вазелина 1:2 иводного экстракта 1:10 по 2 мл 5 внутрь на протяжении 5 дней
Дерматит у крыс
0,1 мл физиологического раствора на одну
особь, в течение 5 дней
Дерматит без лечения 5 Обработка очага поражения вазелином 5
дней
Обработка поражённой поверхности 2% мазь 5
30
Trigonella foenum- graecum
местно мазь Trigonella foenum-graecum на основе вазелина 1:2 и внутрь водный экстракт1:10 по 2 мл внутрь на протяжении 5 дней
5
5 5

35 Cymbopogon proximus
36 Cyperus rotundus
37 Acacia nilotica
38 Trigonella foenum- graecum
фузидина 5 дней
Мазь на вазелине Cymbopogon proximus +
внутрь водный экстракт Cymbopogon 5 proximus 1:10 2 мл 5 дней
Мазь на вазелине Cyperus rotundus1:2 +
внутрь водный экстракт Cyperus 5 rotundus 1:10 2 мл 5 дней
Мазь на вазелине Acacia nilotica 1:2 + внутрь
водный экстракт Acacia nilotica 1:10 2 мл 5 5 дней
Мазь на вазелине Trigonella foenum-graecum
1:2 +Trigonella foenum-graecum внутрь 5 водный экстракт-1:10 2 мл 5 дней
Экспериментальную модель дисметаболических нарушений вызывали внутримышечным введением дексаметазона фосфата из расчета 800 мкг на 1 кг массы животного.
Тест-объектами служили лекарственные формы (водные экстракты, мази) Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenum-graecum, Cyperus rotundus, Lupinus termis, Solenostemma argel, Ammi visnaga, Aristolochia bracteolata- scorpion root, Geigeria alata.
Бактериологические исследования проведены на базе бактериологической лаборатории ГБУЗ РМ «Республиканская клиническая больница No4» г. Саранска. Для оценки антибактериальной активности фитоэкстрактов использовали диско-диффузионный метод (ДДМ) (Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. /Клинические рекомендации. Смоленск, Под ред Козлова Р.С. с соавт.2015.162 с.).В ДДМ в качестве носителя исследуемого вещества использовали бумажные диски (стандартизированные диски НД-ПМП-1 из картона технического фильтровального ГОСТ 6722-75 (ФГУН «Санкт- Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Л. Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека). Непосредственно перед применением диски без антибиотика пропитывали исследуемым стерильным водным экстрактом растения в концентрации 1:25 в объёме 0,1 мл. Количество экстрагируемых веществ составило в 0,1 мл концентрации 1:25 – 4 мг. Содержание веществ в диске составило 40 мкг. В качестве контроля использовали диски, пропитанные дистиллированной водой.
Цитотоксичность водных экстрактов Aristolochia bracteolata- scorpion root, Acacia nilotica (семена) и Trigonella foenum-graecum исследовалась с помощью МТТ-теста на культуре клеток фибробластов мыши L929 (получены из Коллекции культур тканей НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского). МТТ-тест
Степень активности исследуемых соединениям определяли в крестах по следующей схеме – «+++» высокая активность – диаметр зоны задержки роста более 25 мм; «++» активное – диаметр зоны задержки роста 16–25 мм; «+» малоактивное – диаметр зоны задержки роста 10-15 мм; «+ – 0» – неактивное – диаметр зоны задержки роста менее 10 мм и полное отсутствие.
проводился по методике MosmannTim, 1983 (Mosmann, Tim.
: journal. — 1983. — December ( ). — . — . — doi:10.1016/0022- .). Для оценки оптической плотности (ОП) использовали микропланшетный ИФА-ридер (ЭФОС 9305, Россия) при длине волны 492 нм против референсной 620 нм. Клеточную жизнеспособность определяли, как соотношение ОП образца к ОП контроля, выраженное в процентах. Все
эксперименты повторяли 3 раза.
Для получения гистологических препаратов органов использовали
стандартные методики дегидратации, фиксации и заливки парафином, а затем на роторном микротоме получали срезы и окрашивали гематоксилин-эозином, Морфогистологическую картину изменений в органах оценивали на световом исследовательском микроскопе «Биолам» (Россия) при увеличении в 100 и 200 раз и фотографировали на цифровом аппарате модели «PowerShotA 400 Canon» 7.0 MEGAPIXELSAF (Китай) с помощью заводского набора микрофотонасадок.
Для проведения гематологического исследования по окончании эксперимента из хвостовой вены крыс забирали кровь, стабилизировали раствором цитрата натрия в соотношении 1:10, исследовали на гематологическом анализаторе PCE-90Vet (США). Биохимические исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе «HUMASTAR 600, (Германия)». В сыворотке крови крыс определяли содержание общего белка, альбуминов, активность трансаминаз – АЛТ, АСТ, общего холестерина, триглицеридов, мочевины и креатинина набором реактивов для анализатора. Концентрацию глюкозы в капиллярной крови из хвостовой вены исследовали тест полосками электронным глюкометром Accu- ChekActive.
Результаты исследования обработаны статистически с использованием компьюторной программы «STATISTICA». Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05. По ходу изложения статистические показатели обозначены следующими символами: М – выборочное среднее, m (SEM) – ошибка среднего, р – достигнутый уровень значимости.
Результаты исследования и их обсуждение
Острое токсическое повреждение тетрахлорметаном вызывает развитие эритропении, повышение среднего содержания гемоглобина в отдельном эритроците, снижение гематокрита, лейкоцитоза, гранулоцитопении, моноцитопении и лимфоцитоза, тромбоцитопении. Токсическое воздействие активирует периферический лимфоцитарный пул клеток крови – его значения возрастают на 65,3% в серии с максимальной дозой токсиканта. На фоне введения Аcacia nilotica, регистрируется снижение количества лимфоцитов и развитие абсолютной лимфопении. Cymbopogon proximus, Trigonella foenum-graecum увеличивают абсолютные значения лимфоцитов. Введение водных экстрактов
assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity
Rapid colorimetric
assays
(англ.)
//
Journal of Immunological Methods
vol. 65
1759(83)90303-4
,
no. 1—2
P. 55—63
ISSN
0022-1759

Trigonella foenum-graecum и Cymbopogon proximus предотвращает уменьшение эритроцитов, тромбоцитов, активирует макрофагальный пул периферической крови [1,3]. Макрофагальные компоненты периферической крови (моноциты) снижаются в контрольных сериях в абсолютном значении на 15,4 %, в относительных величинах – на 57,9 %. Фитопрепараты существенно активируют моноцитарный клеточный пул периферической крови. Аcacia nilotica в серии с максимальной дозой токсиканта увеличивает число моноцитов на 42 %, Trigonella foenum-graecum – на 30 %. Все исследуемые экстракты трав снижают количество тромбоцитов, не доводя их до аналогичных показателей у интактных животных. Водные экстракты исследуемых трав стимулируют макрофагальный пул клеток периферической крови на фоне острого токсического воздействия.
В оценке гепатопротекторной активности водных экстрактов исследуемых трав при моделировании острого токсического гепатита тетрахлорметаном наиболее значимы результаты получены при анализе морфологических изменений в печени. Введение водных экстрактов Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenum-graecum в разведении 1:10 предотвращает развитие некротических изменений в гепатоцитах, воспалительной инфильтрации, проявления жировой дистрофии, сохраняет архитектонику дольки печени [11].
Исследование метаболических эффектов водных экстрактов Lupinus теrmis, Тrigonella foenum-graecum, Cymbopogon proximus, Аcacia nilotica, Solenostemma argel и Geigeria alata при дексаметазоновой гипергликемии у белых нелинейных крыс
Стрессорные воздействия являются важным фактором развития дисметаболических нарушений, в том числе нарушений углеводного, липидного, белкового обмена и служат триггерным фактором развития целого ряда заболеваний: атеросклероза, сахарного диабета, аутоиммунных заболеваний и др. Известен так же и фактор развития стероидного диабета как побочного эффекта глюкокортикостероидов. В этой связи актуальной является проблема поиска методов профилактики и коррекции дисметаболических нарушений при острых и хронических стрессорных состояниях, а также при длительном применении глюкокортикостероидов. Для реализации данной проблемы нами была использована модель дисметаболических нарушений, вызванных введением дексаметазона. На фоне введения дексаметазона у крыс развивается гипергликемия, натощак уровень глюкозы превышает аналогичный показатель у интактных животных на 71%. Введение экстрактов трав Lupinus termis, Geigeria alata, Solenostemma argel и Cymbopogon proximus предотвращает развитие гипергликемии натощак [10].
Экстракты Аcacia nilotica не корригируют повышение глюкозы крови. Через час после нагрузки глюкозой уровень гликемии нарастает у интактных крыс на 162%, в серии контроля – на 202%, в сериях с экстрактами трав в среднем на 200% по сравнению с показателями интактных животных. Через 2 часа теста толерантности к глюкозе у интактных крыс показатели превышали исходные на 73%, в контроле с дексаметазоном – на 179%, на фоне применения Lupinus termis – на 80%, Geigeria alata и Solenostemma argel данные не
отличались от интактных животных. Экстракты Lupinus termis, Cymbopogon proximus, Аcacia nilotica и Тrigonella foenum-graecum корригировали гликемию через 2 часа на 44 % по сравнению с данными серии контроля. Таким образом, две фитокомпозиции Geigeria alata и Solenostemma argel полностью корригируют гипергликемию по данным теста толерантности к глюкозе (рисунок 1).
30 25 20 15 10
5 0
Исход
Интактные
Дексаметазон+травы Lupinus termis Дексаметазон+Solenostemma argel Дексаметазон+Аcacia nilotica
Через 1 час
Через 2 часа
Дексаметазон
Дексаметазон+Geigeria alata Дексаметазон+Cymbopogon proximus Дексаметазон+Тrigonella foenumgraecum
Часы
25,68
24,44
21,69 20,42
12,04
12,88
15,2 13,59
11,2
6,65
5,1035 4,976
8,66 7,95
9,6
Рисунок1 – Тест толерантности к глюкозе белых крыс на фоне введения дексаметазона 800 мкг/кги водных экстрактов трав Аcacia niloticа, Geigeria alata, Тrigonella foenum-graecum, Lupinus termis, Сymbopogon proximuм, Solenostemma argel.
Высокий уровень глюкококортикостероидов оказывает стимулирующее влияние на показатели общего белка и альбуминов, как следствие, возможное повышение антитоксической функции печени [7]. Все исследуемые травы, кроме Аcacia niloticа, сохраняют положительные эффекты кортикостероидов. Интересен феномен роста значений общего холестерина и особенно триглицеридов на фоне применения исследуемых трав, наиболее выраженное при использовании Аcacia niloticа и Geigeria alata, что, вероятно, обусловлено специфичностью их химического состава.
Однозначно положителен гепатопротекторный эффект водных экстрактов всех трав, кроме Аcacia niloticа, что проявляется в коррекции роста ферментов цитолиза. Как положительный эффект можно рассматривать и рост мочевиносинтетической функции печени, характеризующий стимуляцию функции
%
печени на фоне избыточно катаболического влияния кортикостероидов [9]. Рост уровня креатинина вряд ли стоит рассматривать как фактор нефротоксичности, а скорее, как феномен ускорения инактивации продуктов катаболизма на фоне системных воздействии кортикостероидов. Следует отметить более благоприятное влияние на функциональные показатели почек водных экстрактов Тrigonella foenum-graecum, при применении которых не выявлено нарастание мочевины и креатинина в сыворотке крови, напротив, на фоне введения экстрактов Аcacia niloticа увеличение мочевины и креатинина было максимальным из всех используемых трав, в сочетании с высокими показателями АЛТ (рисунок 2), низкими значениями альбуминов и общего белка, данные результаты можно расценить как следствие токсического влияния компонентов растения.
450
350
250
150
Интактные
Контроль
Lupinus termis Geigeria alata
Тrigonella foenum- graecum Сymbopogon proximu
Аcacia niloticа Solenostema argel
100 100
50 0
138,8 111
127,7
АЛТ, %
188 167
294,8
_____________________________________________________________________________________
Рисунок 2 – Показатели активности АЛТ в сыворотке крови белых крыс в % к интактным животным на фоне введения 800 мкг/кг дексаметазона в течение 4 суток и водных экстрактов исследуемых трав в концентрации 1:10. Примечание: * отмечена достоверность различия по отношению к интактным животным, ** – по отношению к контролю
Фармакологические эффекты водных экстрактов и эмульсий, содержащих Trigonella foenum-graecum, Cyperus rotundus, Ammi visnaga, Acacia nilotica при экспериментальном псориазе у белых мышей
На модели экспериментального псориаза, индуцированного керавортом (5% имиквимод, 125 мг крем, 6.25 мг имиквимода), на нелинейных белых мышах исследованы фармакологические эффекты эмульсий, включающих порошки трав в разведении 1:2 Trigonella foenum-graecum, Cyperus rotundus, Ammi visnaga, Acacia nilotica. При оценке изменений имиквимод-обработанной
%
кожи было выявлено развитие гиперемии, увеличение толщины эпидермиса и шелушение. Суммарный индекс PASI возрос с 0 баллов у интактных животных до 3,83±0,18 баллов на фоне кераворта. Применение топических стероидов снижало данный показатель до 1,2 ±0,2 балла (р<0,001). Обработка эмульсией с используемыми травами во всех случаях предупреждала развитие выраженных изменений кожи у экспериментальных животных, на что указывало снижение индекса PASI. Наиболее эффективными оказались эмульсии с Acacia nilotica и Cyperus rotundus: в данных сериях индекс PASI достиг минимальных значений 1,03±0,13 балла. Полученные данные свидетельствуют о высокой антипсориатической активности исследуемых трав, сопоставимой с топическими стероидами. Изменение кожи при псориазе приводит к нарушению её проницаемости, способствуя развитию нежелательных системных эффектов стероидов, что проявляется в прогрессировании лейкопении, лимфопении, моноцитопении, снижении массы селезёнки [8]. Кераворт оказывает негативное влияние на показатели периферической крови экспериментальных животных, вызывая развитие цитопении – снижения уровня общего количества лейкоцитов, моноцитов, лимфоцитов, нейтрофильных гранулоцитов, эритроцитов и тромбоцитов, что отражает системный иммунодепрессивный эффект имиквимода. Топический стероид элоком в комбинации с керавортом усугубляет изменения в показателях периферической крови, снижая значения лейкоцитов, гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов вызывает атрофию селезёнки. Уровень тромбоцитов возрастает, что повышает риск тромбозов [8]. Эмульсии, содержащие в своём составе травы Trigonella foenum-graecum, Cyperus rotundus, Ammi visnaga, Acacia nilotica проявляют антипсориатическую активность и на модели экспериментального псориаза, индуцированного керавортом (5% имиквимод, 125мг крем, 6.25мг имиквимода), сопопоставимую с эффектом топического стероида элоком. Максимальная клиническая эффективность выявлена у лекарственных форм, содержащих Cyperus rotundus и Acacia nilotica. Наиболее эффективно корригируют изменения в периферической крови эмульсии с Ammi visnaga, предотвращая развитие лейкопении, эритропении и тромбоцитопении. Trigonella foenum-graecum корригирует снижение эритроцитов и тромбоцитов. Высокая антипсориатическая активность в сочетании с коррекцией побочных эффектов топических стероидов фитоэмульсиями может является предпосылкой для поиска перспективных методов лечения псориаза. С целью исследования влияния кераворта на состояние иммунокомпетентых органов исследована масса селезёнки у лабораторных животных (рисунок 3). В контрольной серии (псориаз+кераворт) масса селезёнки не изменялась, однако в серии с элокомом произошло уменьшение массы органа с 0,188± 0,04 г до 0,125±0,04 г (ри<0,001), что свидетельствует о негативном эффекте топических стероидов – развитии системного иммунодепрессивного действия. Применение эмульсий с исследуемыми травами предотвращает угнетение лимфоидной ткани, о чём свидетельствует сохранение массы селезёнки на уровне интактных животных. 0,35 г 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0 0,3 0,18 0,2 0,25 Интактные Псориаз 1 0,22 0,22 3 4 0,125 Элоком Рисунок 3 – Масса селезёнки экспериментальных животных при псориазе- 1- Acacia nilotica, 2- Cyperus rotundus, 3- Trigonella foenum-graecum, 4-Ammi visnaga Исследование антимикробной активности Сymbopogon proximus, Сyperus rotundus, Аcacia nilotica,Trigonella foenum-graecum При исследовании антибактериальной активности водных экстрактов Cyperus rotundus, Acacia niloticaи Trigonella foenum-graecum, Сymbopogon proximus в концентрации 1:25 методом дисковой диффузии в агаре по отношению к Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Staphylococcus epidermidis, Shigella zonnei, Pseudomonas aeruginosa установлено, что Acacia nilotica обладают выраженным антибактериальным действием против клинически значимых патогенов Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Staphylococcus epidermidis (зона ингибирования роста микроорганизмов в агаре 31- 33 мм). Водные экстракты Trigonella foenum-graecum обладают максимальным антибактериальным действием на Staphylococcus epidermidis (ингибирование роста 28 мм, +++), выраженное относительно Escherichia coli (23 мм, ++) и S. aureus (20 мм, ++). Экстракты Cyperus rotundus умеренно активны по отношении Staphylococcus epidermidis и Pseudomonas aeruginosa (18 мм, ++). Экстракты Cymbopogon proximus, очень активны против Shigella zonnei (25 мм, +++), активны против Staphylococcus epidermidis (17 мм, ++) и E. coli (16 мм, ++).. Водные экстракты Cymbopogon proximus полностью подавляют рост Staphylococcus. epidermidis и Escherichia coli. Таким образом, исследуемые растения являются перспективными источниками антибактериальных субстанций [2]. Исследование регенерации инфицированных ран кожи белых крыс со стероидной гипергликемией на фоне лечения водными экстрактамиимазями на основе трав Cymbopogon proximus, Cyperus rotundus, Acacia nilotica и Trigonella foenum-graecum Применение лекарственных форм (водных экстрактов и мазей), содержащих Cyperus rotundus, Cymbopogon proximus, Acacia nilotica иTrigonella foenum-graecum, оказывает позитивное влияние на устранение метаболических нарушений, возникающих при моделировании дексаметазоновой гипергликемии: нормализует уровень глюкозы в крови, снижает активность ферментов (АЛТ, АСТ), оптимизирует состав периферической крови (нивелируют лейкопению, повышают уровень эритроцитов и гемоглобина, тромбоцитов). Подобные сдвиги создают благоприятный фон для течения репаративных процессов на фоне дексаметазонового повреждения, замедляющего течение процессов регенерации [5,12]. Лекарственные формы всех исследуемых растений ускоряют регенераторные процессы в ране. Влияние на процессы заживления в условиях гипергликемии, вызванной дексаметазоном, сопоставимо с антибактериальным препаратом выбора фузидином. Лекарственные формы растений позитивно влияют на все исследуемые компоненты раневого процесса, уменьшая выраженность гиперемии, отёчности, уплотнения, болезненности и повышая интенсивность регенерации, аналогично местному применению мази фузидина. Исследование фармакологических эффектов водных экстрактов трав и эмульсий на основе трав Cymbopogon proximus, Cyperus rotundus (Сида, сыть круглая), Acacia nilotica (Акация нилотика-гарад) и Trigonella foenum-graecum (пажитник сенной, хелба) при стафилококковом дерматите (Staphylococcus аureus) укрыс Комбинированное лечение врождённого стафилококкового дерматита, (Staphylococcus аureus) у крыс, рождённых от больных дерматитом родителей, различными лекарственными формами из растительного сырья (водный экстракт внутрь, мазь с Cymbopogon proximus, Cyperus rotundus, Acacia nilotica и Trigonella foenum-graecum на кожу) по терапевтической эффективности каждой из комбинаций сопоставимо со стандартной терапией фузидином, однако наиболее выраженные позитивные сдвиги в показателях периферической крови, свидетельствующие о более эффективной коррекции инфекционно- токсического фактора, вызванного стафилококковой инфекцией, оказали фитопрепараты Cyperus rotundus, Acacia nilotica, обладающие высокой антибактериальной активностью [6]. Позитивный фармакологический эффект используемых растительных комбинаций исследуемых трав обусловлен их фитохимическими свойствами. Однако по показателям периферической крови эффективность комбинированной терапии препаратами Acacia nilotica оказалась выше, чем Cymbopogon proximus, что обусловлено наличием в акации различных высокоактивных соединений. Исследование цитотоксичности водных экстрактов Aristolochia bracteolata – scorpion root, Аcacia nilotica иТigonella foenum-graecum При исследовании выживаемости клеточных структур фибробластов выявлено, что наименьшая выживаемость фибробластов выявлена при исследовании водных экстрактов семян Acacia nilotica (рисунок 4). 120 % 100 60 20 -20 Aistolochia bracteolata Acacia nilotica Trigonella foenumgraecum в Контроль 1х20 1х40 1х80 1Х160 1х320 1х640 1х1280 1х2560 1х5120 1х10240 Рисунок 4 – Выживаемость клеток фибробластов мыши L929 при инкубации водных экстрактов Aristolochia bracteolata, Acacia nilotica,Trigonella foenum-graecum,% к контролю В диапазоне концентраций водных экстрактов 1:20-1:80 выживаемость составила 3-5%, в диапазоне 1:160- 1:5120 – 12-21%, в разведении1:10240 – 58% [4]. Водные экстракты Aristolochia bracteolata- scorpion root проявляли высокую токсичность в концентрации 1:20- 1:40- выживаемость клеток составила 4%. ЛД50 выявлена для концентрации 1:160. В минимальной концентрации водных экстрактов Aristolochia bracteolata- scorpion root выживаемость фибробластов составила 73 %. Наименее безопасными оказались водные экстракты Trigonella foenum-graecum - в диапазоне концентрации 1:320 выживаемость клеток составила 81%. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о токсичности водных экстрактов, полученных из семян Acacia nilotica и травы Aristolochia bracteolata- scorpion root. Таким образом, результаты полученных исследований свидетельствуют о гепатопротекторной, антипсориатической, метаболической активности гипогликемической активности Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenum-graecum, Lupinus termis ,Geigeria alata (Гейгерия алата- гадгад), Ammi visnaga (амми зубная-Хела), Cyperus rotundus (Сида, сыть круглая), Solenostemma argel (Соленостемма аргель-харгал). Представляет интерес наличие высокой антибактериальной активности водных экстрактов Cymbopogon proximus, Acacia nilotica в отношении клинически значимых патогенов E. coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, что открывает перспективы для поиска активных антимикробных соединений среди изученных фитоагентов. ВЫВОДЫ 1. Водные экстракты Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenum- graecum в разведении 1:10 в объёме 2 мл внутрибрюшинно проявляют гепатопротекторную активность на модели острого токсического гепатита, вызванного четырёххлористым углеродом, предотвращая развитие выраженных морфофункциональных изменений в печени у белых нелинейных крыс, развитие некротических изменений в гепатоцитах, воспалительной инфильтрации, проявления жировой дистрофии, сохраняют архитектонику дольки печени. 2. Водные экстракты Cymbopogon proximus, Geigeria alata – Гад-Гад, Trigonella foenum-graecum, Lupinus termis (турмус), Solenostemma argel в разведении 1:10 при внутрибрюшинном введении по 2 мл проявляют гипогликемическое действие на модели дексаметазоновой гипергликемии у белых нелинейных крыс, снижая уровень глюкозы натощак и через 2 часа теста толерантности к глюкозе соответственно на 38,9 % и 43,8 %, (Cymbopogon proximus), 20 % и 37,11 % (Trigonella foenum-graecum), 43,3 % и 60,24 % (Geigeria alata), 37,4 % и 35,3 % (Lupinus termis), 39,9 % и 67,15 % (Solenostemma argel), корригируют активность фермента аланинаминотрансферазы. 3. На модели экспериментального псориаза, индуцированного керавортом (5 % имиквимод) на нелинейных белых мышах выявлена антипсориатическая активность фитоэмульсий Trigonella foenum-graecum, Cyperus rotundus, Acacia nilotica, Ammi visnaga (амми зубная-Хела), сопоставимая с топическим стероидом элокомом, что подтверждается уменьшением клинических симптомов поражения кожи и снижением индекса PASI. 4. Комбинированное лечение стафилококкового дерматита у крыс различными лекарственными формами из растительного сырья (водный экстракт внутрь, мазь) Cymbopogon proximus, Cyperus rotundus, Acacia nilotica и Trigonella foenum-graecum на кожу) по терапевтической эффективности каждой из комбинаций сопоставимо со стандартной терапией фузидином, однако наиболее выраженные позитивные сдвиги в показателях периферической крови, свидетельствующие о более эффективной коррекции инфекционно- токсического фактора, вызванного стафилококковой инфекцией (Staphylococcus аureus), оказали фитопрепараты Cyperus rotundus, Acacia nilotica, предотвращающие снижение эритроцитов и гемоглобина, лейкоцитов, лимфоцитов, тромбоцитов. 5. Комбинированное лечение водными экстрактами и мазями на основе трав Cymbopogon proximus ,Cyperus rotundus (Сида) – сыть круглая, Acacia nilotica (Акация нилотика-гарад) и Trigonella foenum graecum (пажитник, хелба) стимулируют регенераторные процессы инфицированных ран кожи белых крыс со стероидной гипергликемией, снижают активность цитолитического фермента аланинаминотрансферазы, повышая количество эритроцитов и гемоглобина. 6. Водные экстракты Acacia nilotica в разведении 1:25 обладают антибактериальным действием против клинически значимых патогенов Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis (зона ингибирования роста микроорганизмов в агаре 31-33 мм), умеренно активны в отношении Salmonella enteritidis и Shigella zonnei. Водные экстракты Trigonella foenum-graecum в разведении 1:25 обладают максимальным антибактериальным действием на Staphylococcus epidermidis (ингибирование роста 28 мм, +++), выраженным относительно Escherichia coli (23 мм, ++) и Staphylococcus aureus (20 мм, ++). Экстракты Cyperus rotundus умеренно активны по отношении Staphylococcus epidermidis (18 мм, ++). Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. Экстракты Cymbopogon proximus активны против Shigella zonnei (25 мм, +++), против Staphylococcus epidermidis (17 мм, ++) и E. coli (16 мм, ++). Водные экстракты Cymbopogon proximus полностью подавляют рост Staphylococcus epidermidis и Escherichia coli. Таким образом, исследуемые растения являются перспективными источниками антибактериальных субстанций. 7. Водные экстракты, полученные из семян Acacia nilotica и травы Aristolochia bracteolata обладают цитотоксичностью на модели изменить направление текста метилтетразолиевого теста на культуре фибробластов мыши L929. В диапазоне разведений водных экстрактов Acacia niloticа 1:20-1:80 выживаемость фибробластов составила 3-5 %, в диапазоне 1:160- 1:5120 – 12- 21 %, в разведении 1:10240 – 58 %. Водные экстракты Aristolochia bracteolata проявляли высокую токсичность в разведении 1:20–1:40 – выживаемость клеток составила 4 %. ЛД50 выявлена для разведения 1:160. В минимальном разведении водных Aristolochia bracteolata- червь убийца выживаемость фибробластов составила 73 %. Наименее безопасными оказались водные экстракты Trigonella foenum-graecum- в диапазоне разведения 1:320 выживаемость клеток составила 81 %. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Полученные результаты являются обоснованием для дальнейшей разработки новых протоколов лечения дисметаболических состояний и лекарственных форм на основе Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenum-graecum, Lupinus termis, Solenostemma argel (Соленостемма аргель- харгал) и Geigeria alata (Гейгерия алата-гадгад) Cyperus rotundus,в качестве корректоров нарушений метаболических и регенераторных процессов при терапии глюкокортикоидами. Выявленные фармакологические эффекты служат обоснованием для продолжения исследования выделения из лекарственных форм Cymbopogon proximus, Cyperus rotundus, Acacia nilotica,Trigonella foenum-graecum соединений с антибактериальной активностью.