ВВЕДЕНИЕ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
ГЛАВА 1. ПРЕДСТАВИТЕЛИ СЕМЕЙСТВА LAMIACEAE LINDL. КАК
ИСТОЧНИКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ДЛЯ
ПОЛУЧЕНИЯ НЕЙРОТРОПНЫХ СРЕДСТВ (обзор литературы) . . . . . 15
1.1 Краткая ботаническая характеристика сем. Lamiaceae . . . . . . . . . . . . 15
1.2 Биологически активные вещества представителей растений сем
Lamiaceae, обладающие нейротропной активностью. . . . . . . . . . . . . . . 16
1.3 Сырьевая база и морфологическая характеристика представителей
рода Dracocephalum L., Nepeta L. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
1.4 Химический состав растений рода Dracocephalum L., Nepeta L. . . . . 34
1.5 Биологическая активность растений рода Dracocephalum L., Nepeta
L. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
Выводы к главе 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 68
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ . 69
2.1 Объекты исследований . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
2.2. Методы исследований . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
2.2.1 Химические и физико-химические методы . . . . . . . . . . . . . . . 70
2.2.2 Химико-технологические методы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
2.2.3 Биологические методы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78
ГЛАВА 3. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НАДЗЕМНОЙ
ЧАСТИ DRACOCEPHALUM MOLDAVICA L., NEPETA GRANDIFLORA
BIEB., NEPETA CATARIA L. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
3.1 Изучение экстрактивных веществ из травы змееголовника
молдавского, котовника крупноцветкого, котовника кошачьего . . . . . . . . 81
3.2 Обнаружение фенольных соединений . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 82
3.3 Разработка и валидация методики количественного определения
суммы фенольных соединений в траве змееголовника молдавского . . . . 84
3.4 Изучение накопления суммы фенольных соединений в траве
змееголовника молдавского, заготовленного в фазу бутонизации и
цветения. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
Выводы к главе 3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
ГЛАВА 4. УСТАНОВЛЕНИЕ НОРМ КАЧЕСТВА ТРАВЫ
ЗМЕЕГОЛОВНИКА МОЛДАВСКОГО . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1 Качественное определение действующих веществ в надземной части
змееголовника молдавского . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2 Количественное определение суммы фенольных соединений . . . . . .
4.3 Определение показателей качества травы змееголовника
молдавского . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
Выводы по главе 4 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
ГЛАВА 5. ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ
ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РАСТЕНИЙ РОДА NEPETA L. . . . . . . . . . . . . . . .
5.1 Сравнительный анатомо-морфологический анализ котовника
крупноцветкового и котовника кошачьего . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.2 Изучение химического состава различных извлечений из котовника
крупноцветкового и котовника кошачьего . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.3 Компонентный состав эфирного масла травы котовника кошачьего в
зависимости от мест произрастания . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 113
Выводы по главе 5 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115
ГЛАВА 6. ПОЛУЧЕНИЕ СУХИХ ОЧИЩЕННЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ
КОТОВНИКА КРУПНОЦВЕТКОВОГО И КОТОВНИКА
КОШАЧЬЕГО И УСТАНОВЛЕНИЕ ИХ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА
6.1 Химический состав . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2 Разработка методики количественного определения розмариновой
кислоты в сухом очищенном экстракте котовника кошачьего методом
ВЭЖХ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3 Определение биологической активности полученных экстрактов . . . 122
Выводы по главе 6 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 122
ГЛАВА 7. РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТОВ ИЗ
НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ЗМЕЕГОЛОВНИКА МОЛДАВСКОГО И
СТАНДАРТИЗАЦИЯ «РОЗМАТИНА» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.1 Идентификация фенольных соединений в сухом экстракте
«Розматин» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.2 Разработка методики количественного определения суммы
фенольных соединений в «Розматине». Валидация методики . . . . . . . . .
7.3 Определение биологической активности «Розматина» . . . . . . . . . . . . . 139
Выводы к главе 7 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 141
Общие выводы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 141
Список использованной литературы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 144
Приложение 1. Патент на способ получения «Розматина» из травы
змееголовника молдавского . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 164
Приложение 2. Акт внедрения проекта фармакопейной статьи (ФС)
«Змееголовника молдавского трава» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 165
Приложение 3. Акт внедрения проекта нормативной документации
«Розматин», экстракт сухой» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 166
Приложение 4. Отчет о валидации количественного определения суммы
фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту
в траве змееголовника молдавского . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 167
Приложение 5. Отчет о валидации методики количественного
определения суммы фенольных соединений в пересчете на
розмариновую кислоту в субстанции «Розматин» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 168
Приложение 6. Спецификация экстракта сухого «Розматин» . . . . . . . . . . 174
Приложение 7. Протокол изучения острой токсичности сухого эстракта
«Розматин» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 171
Приложение 8. Протокол изучения нейротропной активности и влияния
на показатели сердечно-сосудистой системы сухого эсктракта
змееголовника молдавского «Розматин» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 173
Приложение 9. Протокол исследования нейротропной активности
экстракта змееголовника молдавского под условным названием
«Розматин» на модели приподнятый крестообразный лабиринт . . . . . . . . 179
Приложение 10. Протокол изучения нейротропной активности
змееголовника молдавского экстракта сухого под условным названием
«Розматин» на модели «открытое поле» у крыс . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 182
Приложение 11. Протокол изучения нейротропной активности
«Розматина» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 186
Приложение 12. Протокол изучения экстракта на экссудативную
стадию воспаления на модели 1 % формалинового отёка . . . . . . . . . . . . . 189
Приложение 13. Протокол изучения гастропротективного эффекта
«Розматина» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 193
Приложение 14. Протокол изучения фармакологической активности
котовника кошачьего и котовника крупноцветкового . . . . . . . . . . . . . . . . 196
Приложение 15. Протокол исследования противовоспалительной
активности экстрактов котовника кошачьего и котовника
крупноцветкового . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 210
Приложение 16. Лабораторный регламент на производство сухого
экстракта «Розматин» . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 214

Объекты исследования: надземная часть змееголовника молдавского, выращенная в филиалах и на полях селекционного севооборота НИИ ВИЛАР и собранная в фазу цветения и бутонизации растения в 2016-2019 г; надземная часть котовника кошачьего, заготовленная в Ботаническом саду ВИЛАР, фармакопейный участок, в Белгородской области и Северо-Кавказском регионе в 2018-2019 г; надземная часть котовника крупноцветкового в Курахском районе в окрестности села Ашар в 2017 году.
Методы исследования
Для характеристики подлинности данного сырья использовали реакцию с 3% раствором железа хлорида в спирте этиловым 96 % для определения фенольных соединений. Определение розмариновой кислоты проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). В качестве неподвижной фазы использовали пластинки Sorbfil ПТСХ-ПА. Хроматографирование осуществляли восходящим способом в системе растворителей этилацетат–уксусная кислота–вода (40:5:5). В экспериментах использован стандартный образец (СО) розмариновой кислоты (Sigma Aldrich, кат. No536954-5G). Детектирование веществ осуществляли путем обработки пластины 10 % раствором алюминия хлорида в 96% спирте этиловом, прогреванием при температуре 105 оС и просматриванием пластины в УФ-свете при длине волны 366 нм. Ультрафиолетовые спектры поглощения снимали на спектрофотометрах UV-1800 (Shimadsu), Cary 100 Scan (Varian). ВЭЖХ-хроматограммы получали на хроматографе фирмы Shimadzu модель Prominence-I LC-2030C 3D. Разделение проводилось на колонке Luna 5μm c18 длиной 250 мм и диаметром 46 мм, которая термостатировалась при 20 0С. ЯМР- спектры получены на спектрометре GEMINI 200 (Varian, США).
Химические (качественные реакции), физико-химические (ТСХ, ВЭЖХ, УФ- спектрофотометрия, ЯМР-спектроскопия), химико-технологические и биологические методы.
Морфолого-анатомическое исследование сырья проводили в соответствие с общими фармакопейными статьями Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания: ОФС.1.5.1.0002.15, ОФС.1.5.3.0003.15. Микропрепараты изучали с использованием биологического микроскопа «Альтами БИО 2 LED» с цифровой окулярной USB-камерой 3,1 Мпикс (Россия). Фотографии были обработаны на программе Adobe Photoshop 7.0.
Установление химического состава и количественное содержание компонентов «Розматина» проводили методом ВЭЖХ-УФ-МС с помощью системы Agilent 1290
(Agilent Technologies, Германия), с использованием диодной матрицы и тандемного квадрупольного масс-спектрометра Agilent 6430 (QQQ). Объем вводимой в инжектор пробы 10 мкл.
Состав эфирного масла котовника кошачьего определяли методом газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ГЖХ-МС) на хромато- масс-спектрометре Varian 450GC-220MS с масс-анализатором типа «ионная ловушка».
Выделение тилианина (7- O- глюкозид акацетина) и лютеолин-7-О -β-D- глюкуронида из «Розматина» проводили методом колоночной хроматографии на полиамиде, выделение 1,5,9-эпидезоксилогановой кислоты осуществляли методом колоночной хроматографии сначала на целлюлозе, а затем была проведена вторая колонка с полиамидом, структуру всех веществ устанавливали методом ЯМР-спектроскопии.
Определение параметров острой токсичности розматина и экстрактов, полученных из травы котовника кошачьего и травы котовника крупноцветкового, проводилось по методу Кербера.
Для сравнительной оценки нейротропной активности экстрактов котовников кошачьего (Nepeta cataria L.) и крупноцветкового (Nepeta grandiflora Bieb.) был проведен биологический скрининг образцов, обладающих дофаминергической активностью с применением тирозингидроксилазной специфической ферментной биотест-системы в условиях опытов in vitro. Также проводилась оценка противовоспалительной активности экстрактов котовника кошачьего и котовника крупноцветкового на основе индуцибельной NO-синтазы.
Оценку нейротропной активности «Розматина» осуществляли в опытах in vivo на моделях «открытое поле», «приподнятый крестообразный лабиринт», «хлоралгидратный сон». Оценку нейротропной активности экстрактов, полученных из травы котовника кошачьего и травы котовника крупноцветкового, осуществляли в опытах in vivo на моделях «приподнятый крестообразный лабиринт», «хлоралгидратный сон».
Изучение состава биологически активных соединений в исследуемых объектах
В траве змееголовника молдавского обнаружены следующие фенольные соединения: розмариновая кислота, флавоноиды. А в траве котовника кошачьего и в траве котовника крупноцветкового содержатся флавоноиды, фенилпропаноиды и иридоиды.
Определение фенольных соединений в траве змееголовника молдавского
Количественное содержание суммы фенольных соединений в траве змееголовника молдавского проводили методом прямой спектрофотометрии. В ходе исследования были подобраны условия анализа: в качестве экстрагента применяли спирт этиловый 50 % в соотношении сырье – экстрагент (1:100), экстракцию сырья проводили при нагревании на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Максимум поглощения в извлечении травы змееголовника молдавского наблюдается при (328±2) нм, аналогичный максимум имеет розмариновая кислота (Рисунок 1).
1 2
Рисунок 1 – Спектр поглощения спиртового извлечения из змееголовника молдавского травы (1), раствора СО розмариновой кислоты (2)
На основании подобранных условий разработана методика количественного определения суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту, а также проведена валидация методики, которая соответствовала всем аналитическим критериям.
По выше изложенной методике определили количественное содержание фенольных соединений в образцах травы змееголовника молдавского, заготовленных в фазу бутонизации и цветения, разных климатических зонах. Результаты представлены в Таблице 1.
Из таблицы 1 видно, что содержание фенольных соединений в сырье находится в пределах от (4,95±0,26) % до (11,03±0,56) %.

Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту в траве змееголовника молдавского
Таблица 1
Место произрастания
Фаза вегетации
Содержание фенольных соединений, в пересчете на розмариновую кислоту, %
Средне-Волжский филиал ВИЛАР Северо-Кавказский филиал ВИЛАР Китай
Московская область (сорт «Нежность»)
Фаза бутонизации Фаза цветения Фаза бутонизации Фаза цветения Фаза цветения Фаза бутонизации Фаза цветения
6,05±0,31 7,22±0,36 4,95±0,26 5,81±0,28 6,17±0,32 11,03±0,56 10,89±0,56
При проведении поиска биологически активных фракций разработана технология получения сухого очищенного экстракта «Розматина», содержащего флавоноиды флавоного типа, флавоноидные гликозиды и фенилпропаноиды. «Розматин» получен 50 % водно-спиртовой экстракцией в соотношении 1:10, переосаждением в спирте этиловом, фильтрованием, упариванием надосадочного раствора до водного куба, деминерализацией КУ-2-8, обработкой бутанолом и упариванием бутанольной фракции в виде азеотропы с водой.
Методам ЯМР (1Ни 13С) – спектроскопии установлен химический состав экстракта сухого «Розматин», а также определено количественное содержание розмариновой кислоты 56,6% и суммы флавоноидов (флавонов) около 27 %
В таблице 2 представлены результаты определения компонентного состава экстракта змееголовника молдавского, сорт «Нежность», фаза цветения методом ВЭЖХ- УФ-МС. Установлено, что экстракт был представлен преимущественно 14 полифенольными соединениями.
Компонентный состав экстракта змееголовника молдавского, сорт «Нежность», фаза цветения.
Название
No No
1 2 3 4
5 6 7
9 10 11 12 13 14
Кофейная кислота
Неидентифицированное соединение
Феруловая кислота
Лютеолин-7- глюкуронид Розмариновая кислота – 3-О-β-D- глюкозид
Апигенин-7-глюкозид Апигенин-7-глюкуронид
Розмариновая кислота
Хризоэриол-7- глюкуронид Апигенин-7-(6″-О-β-D- малонил) глюкозид Акацетин-7-О-глюкозид (тилианин) Акацетин-7-О- глюкуронид Шизотенуин F
Акацетин-7-О-(6″-О-β- D-малонил) глюкозид
11,75 18,51 20,00 20,99
21,42 23,11 23,52
23,96 24,71 26,54 29,61 30,31 31,32 32,73
181, 163
303, 147
195, 177
463, 287
523, 540, 545, 561
433, 271
447, 271
743, 383, 163
477, 301
519, 271
741, 521, 323, 285
461, 285 575, 355 533, 285
Таблица 2
179, 135 180 1,1 581, 255, 582 1,9
193 194 0,8 923, 461, 462 7,7
1043, 522 10,7 521
431, 269 432 1,4 891, 445, 446 4,3
719, 359 360 56,6
951, 445, 476 2,5 299
1035, 518 1,4 517, 269
717, 519, 446 5,7 283
919, 459, 460 2,2 283
551, 359 552 1,5 1063, 532 2,2
531, 283
Проведена стандартизация сухого очищенного экстракта «розматина». Разработана методика количественного определения суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту. Определено содержание фенольных соединений в 5-ти опытных сериях сорта «Нежность» фаза цветения.
Время выхода, мин
m/z, регистрация положительных ионов
m/z, регистрация отрицательных ионов
Молярная масса, г/моль
Содержание, %
Биологическая активность сухого очищенного экстракта «Розматин»
Исследования проводились в отделе экспериментальной и клинической
фармакологии.
Результаты: змееголовника молдавского травы экстракт сухой «Розматин»
обладает активирующим, тонизирующим действием на сердечно-сосудистую и нервную системы, а также противовоспалительной и гастропротективной активностями.
Фармакогностическое исследование травы котовника кошачьего и котовника крупноцветкового и химическое изучение экстрактов.
Проведен сравнительный морфолого-анатомический анализ сырья, выяснен качественный состав экстрактов котовника кошачьего и котовника крупноцветкового и определена специфическая биологическая активность
Сравнительная характеристика внешних (морфологических) признаков сырья котовника кошачьего и котовника крупноцветкового
Таблица 3.
Часть сырья Стебель Цвет стебля
Основные признаки цельного сырья
Nepeta cataria L. Nepeta grandiflora Bieb.
Прямой, ветвистый, четырехгранный
От светло-зеленого до От серовато-зеленого до зеленого зеленовато-фиолетового
Форма и край листовой пластинки
Треугольно- серцевидно- яйцевидная, по краю крупнопильчатая
Яйцевидная или продолговато- яйцевидная, с сердцевидным основанием, чаще остроконечная, по краю мелко городчато- зубчатая или городчатая
Черешок
Длиной до 7 мм
Черешки нижних листьев длиной до 2 см,
верхних – 0, 2-0, 3 см
Соцветие
Густые сложные полузонтики
Полузонтики большей частью сложные, на цветоносах длиной 2-3 см.

Венчик
Длиной до 10 мм, беловатый с пурпурными точками на нижней губе
Длиной до 18 мм, фиолетово- синий
Чашечка
Длиной 2-6 мм с зубцами, зеленая
Длиной до 1 см с узкотреугольными, короткими, острыми зубцами, фиолетово- синяя, густо и головчато железистая
Установлено, что у обоих видов котовника стебли прямые, ветвистые, четырехгранные, опушенные; листья черешковые, опушенные с обеих сторон; черешок листа тонкий, изогнутый, желобчатый, опушенный; венчик двугубый в 1,5-2 раза длиннее чашечки, чашечка трубчатая, опушенная. Наряду с этим, у исследованных видов котовника были выявлены отличительные морфологические признаки такие как: цвет стеблей; форма и край листовой пластинки; длина черешка; цвет и длина венчика и чашечки.
Основные различия анатомических признаков для исследуемых образцов сырья (Таблица 4)
Анатомо-диагностические признаки эпидермиса различных частей травы котовников кошачьего и крупноцветкового
Таблица 4. Часть сырья Котовник кошачий Котовник крупноцветковый
Лист
Клетки верхнего эпидермиса со слабоизвилистыми или почти прямыми стенками, нижнего – клетки мельче с сильноизвилистыми стенками. Устьица присутствуют на обеих сторонах листа, на нижней –
многочисленные сопровождаются околоустьичными расположенными перпендикулярно щели (диацитный встречаются аномоцитного типа
и двумя клетками,
устьичной тип), устьица
Клетки верхнего и нижнего эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица на обеих сторонах листа, окружены двумя клетками эпидермиса, расположенными перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Вокруг устьиц местами заметна складчатость кутикулы

Стебель
Эпидермис стебля состоит из многоугольных или слегка вытянутых клеток с прямыми четковидноутолщенными стенками и устьицами, ориентированными по длине стебля. Вокруг устьиц заметна складчатость кутикулы. Клетки эпидермиса по ребрам длиннее и более узкие
Эпидермис стебля состоит из многоугольных или слегка вытянутых клеток с прямыми, местами четковидноутолщенными стенками и устьицами, ориентированными по длине стебля. Вокруг устьиц местами заметна складчатость кутикулы. Клетки эпидермиса по ребрам длиннее и более узкие
Чашечка
Эпидермис состоит из продольно-вытянутых клеток с извилистыми, местами четковидноутолщенными стенками; заметна складчатость кутикулы, встречаются устьица
Эпидермис состоит из продольно-вытянутых клеток с извилистыми стенками и складчатостью кутикулы, встречаются устьица
Венчик Клетки эпидермиса имеют извилистые стенки, по краю эпидермис венчика покрыт сосочковидными выростами
Таким образом, в ходе проведенных микроскопических исследований надземной части котовника кошачьего и котовника крупноцветкового установлено, что эпидермис листа имеет диацитный устьичный комплекс, эфирномасличные железки округлой формы с 4(6) радиально расположенными выделительными клетками. В местах прикрепления простых волосков и железок клетки эпидермиса образуют розетку. При опадении простых волосков на эпидермисе стебля остаются характерные валики, часто с зубчатым краем оболочки. Для венчика характерны волоски пальцевидной формы со штриховатой кутикулой.
У котовника крупноцветкового встречаются три типа волосков: простые многоклеточные, головчатые и мелкие сосочковидные. Простые волоски 1-3 (4)- клеточные, бородавчатые, могут быть прямые и изогнутые; головчатые волоски на короткой одноклеточной ножке с 1-2-клеточной головкой. Для чашечки также характерны простые 1-5 (8)-клеточные, бородавчатые волоски и головчатые волоски двух типов: на короткой одноклеточной ножке с 1-2-клеточной округлой или вытянутой головкой и на длинной 1-3 (5)-клеточной ножке с округлой одноклеточной головкой.
Волоски котовника кошачьего представлены двумя типами: простыми 2-4 (6)- клеточными, бородавчатыми, иногда с отдельными спавшимися клетками, прямыми и изогнутыми и головчатыми на короткой одноклеточной ножке с 1-2-клеточной округлой головкой.

Методом ВЭЖХ определено количественное содержание розмариновой кислоты в бутанольной фракции экстракта котовника кошачьего равно 0,90 %, котовника крупноцветкового – 5,66 %
По данным ВЭЖХ исследования установлено, что в бутанольной фракции котовника крупноцветкового обнаружены следующие фенольные соединения: салициловая кислота, фенилпропаноиды – хлорогеновая, кофейная, п-кумаровая, розмариновая кислоты, флавоноиды – кверцетин, рутин, лютеолин-7-глюкозид, лютеолин и апигенин. В бутанольной фракции котовника кошачьего – п-кумаровая, розмариновая, феруловая, кофейная, хлорогеновая кислоты, рутин, лютеолин.
Химический состав бутанольной фракции котовника кошачьего и котовника крупноцветкового был установлен методом ЯМР-спектроскопии (получены спектры 1 Н, 13 С). На основании анализа спектров было определено, что в котовнике кошачьем и котовнике крупноцветковом содержатся флавоноиды (апигенин, лютеолин), иридоидный гликозид- 1,5,9,-эпидезоксилогановая кислота, фенилпропаноиды.
В экстрактах котовника крупноцветкового и котовника кошачьего содержатся флавоноиды (апигенин, лютеолин), иридоиды (1,5,9,-эпидезоксилогановая кислота) и фенилпропаноиды (п-кумаровая кислота, феруловая и хлорогеновая кислоты).
Химический состав эфирного масла котовника кошачьего в зависимости от места произрастания
Наименование компонентов
α-Пинен
Сабинен
Сантолина эпоксид цис-Оцимен
транс- Оцимен β-Терпинеол β-Пинен оксид α-Пинен оксид транс-Пинокарвеол транс-Хризантемаль (R)-(+)-Цитронеллаль Цитронеллол цис-Вербенол α-Циклогераниол Нераль
Изогераниол
Таблица 4. Содержание компонентов в образцах (%)
Белгородская Московская область область
0,224 0,059 0,428 – 0,059 – 0,142 – 0,344 – 0,014 – 0,155 –
– – 0,031 – 0,448 – 1,276 –
– – 0,051 – 0,334 – 2,029 – 0,138 –
Северо – Кавказский регион
0,172 –
– 0,250 0,792 0,213 0,039 0,030 0,023 0,050 0,225 1,726 –
– 0,321 –

Гераниол Изопулегол
Сквален
Гераниаль Цитронеллил формат Геранил формат Пиперитон R-(+)-цитронеллаль Вербенон Кариофиллен цис-β-Фарнезен α-Гумулен α-Фарнезен
Фенхон О-Ксилен (-)-бета-Пинен 1,3-Диэтилбензол δ-3-Карен
1,4 – Диэтилбензол 1,2-Диэтилбензол цис-Пинан
Непеталактон Изодигидронепеталактон α-Гумулен
R-Лимонен Кариофиллен оксид Гумулена эпоксид II Фитола ацетат
Фитол
α -Туйон
β -Туйон β-Фелландрен Мирцен
Цитраль транс-Сабинен гидрат транс-Линалоксид
– – 0,035 – 21,31 – 3,435 – 0,111 – 0,114 –
– – 0,081 – 0,197 – 4,421 1,508 0,133 – 0,487 – 0,035 0,161 0,048 –
– – 1,497 –
– 0,023
– 0,013
– 0,034
– –
– 0,010
– 0,357
– 0,034
– 0,137
0,042 0,008 0,051 0,939 – 0,247 0,923 2,485 0,175 0,885
– –
– –
– –
– –
– –
– –
– –
1,104 0,022 0,044 –
– 0,020 0,090 –
– 1,203 0,197 0,148 –
– 0,057 –
–
–
– 0,054 – 7,530 –
–
– 1,294 –
– 1,820 0,034 0,031 0,393 0,025 0,494 0,529 0,177
Основным компонентом эфирного масла котовника кошачьего,
Северо-Кавказском регионе является непеталактон, в Московской области – кариофиллен, в Белгородской области – гераниаль. Эфирное масло, полученное из сырья, произрастающего в Северо-Кавказском регионе, имеет наиболее обширный многокомпонентный состав. Непеталактон отсутствует в сырье, произрастающем в Белгородской области (Таблица 4).
произрастающего в

Общие выводы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведено фитохимическое изучение травы змееголовника молдавского, разработана методика количественного определение суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту в траве.
Основные результаты экспериментального исследования представителей семейства Lamiaceae:
1. Проведено фитохимическое исследование сырья змееголовника молдавского, заготовленного на территории ФГБНУ ВИЛАР. Установлено, что в исследуемом сырье содержатся фенольные соединения (флавоноиды, фенилпропаноиды, дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты). Методом УФ-спектрофометрии определено количественное содержание фенольных соединений в сырье змееголовника молдавского. Разработана и валидирована методика количественного определения суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту. Разработана методика определения подлинности сырья с использованием ТСХ и аутентичного образца розмариновой кислоты, подобраны условия хроматографирования (система растворителей и способ детектирования веществ).
2. Изучена динамика накопления фенольных соединений в траве змееголовника молдавского. Установлена фаза заготовки сырья – цветения и определена ориентировочная норма содержания фенольных соединений в сырье – не менее 5,5 %. Из изученных образцов наибольшее содержание фенольных соединений отмечено у образцов сорта «Нежность», выращенных на опытном поле ВИЛАР.
3. Разработана технология получения субстанции из травы змееголовника молдавского, позволяющая максимально извлечь фенольные соединения. Установлено, что в состав «Розматина» входят флавоноиды (флавонов) и фенилпропаноиды. Предложена методика количественного определения фенольных соединений в «Розматине» и проведена ее валидация. По разработанной методике определено содержание фенольных соединений 5 опытных серий «Розматина». Определена ориентировочная норма содержания фенольных соединений в субстанции «Розматин» не менее 60,0 %.
Для «Розматина» установлена специфическая биологическая активность. «Розматин» обладает активирующим, тонизирующим действием на сердечно-сосудистую и нервную системы, а также противовоспалительными, гастропротективными свойствами.
4. Физико-химическими методами исследования ЯМР (1Н и 13С) и ВЭЖХ-МС-УФ установлен химический состав и количественное содержание веществ экстракта «Розматина». В состав «Розматина» входят розмариновая кислота (основной компонент) и
флавоноиды, относящихся к флавонам, из которых это- тилианин, лютеолин-7-0- глюкозид, апигенин, а также 7-0-глюкозиды, вещества содержащие малонильный остаток, присоединенный в 6-положении к глюкозному остатку.
5. Установлены нормы качества травы змееголовника молдавского и экстракта сухого «Розматин» необходимые для включения в проект ФС «Трава змееголовника молдавского» и НД сухой экстракт «Розматин».
6. Определены морфолого-анатомические признаки различных частей травы котовника кошачьего и котовника крупноцветкового (лист, стебель, чашечка, венчик) необходимые для установления подлинности этих видов сырья.
7. В бутанольных фракциях и в экстракте котовника кошачьего и котовника крупноцветкового содержатся иридоидные гликозиды, фенилпропаноиды и флавоноиды. Получена и идентифицирована 1,5,9-эпидезоксилогановая кислота из надземной части котовника кошачьего.
8. В экстракте котовника крупноцветкового преобладает розмариновая кислота, а в экстракте котовнике кошачьем преобладает иридоидный гликозид 1,5,9- эпидезоксилогановая кислота, а розмариновая кислота присутствуют в минимальном количестве. Проведенные экспериментальные исследования по изучению нейротропной активности экстракта котовника кошачьего и котовника крупноцветкового показали, что они оказывают достоверно выраженное седативное и противотревожное действие.
ПЕРСПЕКТИВЫ И РЕКОМЕНДАЦИИ
Предполагается разработанный экстракт «Розматина» использовать в качестве лекарственного препарата для лечения нервной системы, кроме того данный препарат имеет полезные свойства в качестве кардиопротективного, противовоспалительного гастропротективного действия.

Актуальность темы. Разработка новых эффективных и безопасных
лекарственных средств растительного происхождения, влияющих на сердечно-
сосудистую и центральную нервную системы является актуальным направлением
современной фармацевтической науки.
В большинстве растений семейства Lamiaceae биологически активные
вещества представлены такими классами химических соединений как
флавоноиды, флавоноидные гликозиды, флавоноидные глюкурониды,
фенилпропаноиды, антоцианы.
Одним из ярких представителей сем. Lamiaceae является род Dracocephalum
L., который насчитывает около 60 видов, встречающихся в умеренной
климатической зоне северного полушария. Вид змееголовник молдавский
(Dracocephalum moldavica L.) повсеместно произрастает в причерноморском
регионе, европейской части России, в Сибири, Средней Азии, на Дальнем
Востоке, в Китае, Монголии и др. Введен в культуру как пряно-ароматическое,
декоративное и лекарственное растение. В ФГБНУ ВИЛАР был выведен новый
сорт «Нежность» [41].
Нами проведен анализ литературных данных по использованию травы
змееголовника молдавского в традиционной китайской медицине. Особое
внимание привлекли полезные свойства экстрактов для лечения болезней
сердечно-сосудистой системы, таких как тахикардия, ишемическая болезнь
сердца, артериальной гипертензии, атеросклероза, невралгии, а также полученные
экстракты обладают кардиопротективной, нейропротекторной и иными
фармакологическими активностями [4, 87, 109, 122, 156, 171, 179].
На основании вышеизложенного для разработки новых лекарственных
растительных препаратов (ЛРП) в качестве объекта исследования нами выбран
змееголовник молдавский (Dracocephalum moldavica L.).
Наряду со змееголовником молдавским к семейству Lamiaceae относится
род Котовник (Nepeta L). Род котовник насчитывает около 250 видов,
встречающихся в умеренной климатической зоне Европы, в Азии, Северной
Африке, в горах тропической Африки и др. Nepeta один из крупных родов
Lamiaceae [42].
Наибольшее разнообразие и богатство видов обнаружено в двух районах
Юго-Западной Азии, особенно в Иране и Западных Гималаях, включая Гиндукуш.
В России произрастает около 82 видов котовников в горных районах Закавказья
[21]. Котовник кошачий (Nepeta cataria L.) и котовник крупноцветковый (Nepeta
grandiflora Bieb.) имеет широкое использование в пищевой и парфюмерной
промышленности. Котовник кошачий культивируется в Западной Европе, США,
СНГ для получения эфирного масла [29].
Трава котовника кошачьего входит в состав чаев с жаропонижающим и
успокоительным эффектом. Настой травы котовника кошачьего снижает
температуру и уменьшает кожные высыпания при кори и ветряной оспе [107].
Котовник крупноцветковый широко распространен на Северном Кавказе и
повсеместно произрастает в Карачаево-Черкесской Республике [43].
Траву котовника крупноцветкового, заготовленную в фазу массового
цветения (июнь–июль), применяют в традиционной медицине в виде отваров и
настоев в качестве противовоспалительного, жаропонижающего
спазмолитического и мягкого седативного средства, а также при анемии в
качестве заменителя чая [43, 79]. Установлено, что водно-спиртовые извлечения
из надземной части этих растений обладают анксиолитическими,
антидепрессантыми свойствами [67, 144, 145, 151].
Химический состав рода Котовник в основном представлен
фенилпропаноидами, иридоидами и флавоноидами [145].
В этой связи дальнейшее изучение выбранных растений в качестве объектов
исследования, включая получение суммарных экстрактов и биологически
активных фракций и индивидуальных веществ, является актуальным.
Степень разработанности темы исследования. Большинство публикаций
преимущественно зарубежных исследователей посвящены изучению химического
состава и биологической активности змееголовника молдавского.
В надземной части змееголовника молдавского выделено 31 соединение
флавоноидной природы: кемпферол, кверцетин, эскулетин, диосметин, акацетин,
апигенин, лютеолин, цирцимаритин, сальвигинин, сантафлавон, агастахозид,
акацетин-7-О-β-D-гликозид, диосметин-7-O-неогесперидозид, акацетин-7-O-
неогесперидозид, лютеолин-7-O-неогесперидозид, лютеолин-7-O- β- D -глюкозид,
апигенин-7-O- β – D -глюкозид, лютеолин-7-O- β – D -глюкуронид, апигенин-7-O-
β – D -глюкуронид, диосметин-7-O- β – D –глюкуронид, акацетин-7-O- β – D –
глюкуронид, гесперидин, гиперозид, дигидрокверцетин, цинарозид, тилианин,
кемпферол, линарин, нарингенин, хризоэриол, гарденин В, 6-малонил-арбутин,
скрофулеин, танакин-8-O- β – D-глюкопиранозид, изорамнетин [172]
В 70% водно-спиртовом экстракте наземной части змееголовника
молдавского (после удаления экстрагента) методом ВЭЖХ-МС
идентифицировали порядка 9 компонентов. Доминирующим компонентом
является розмариновая кислота, а также флавоноид – лютеолин-7-О-глюкуронид
[18].
Биологически активные вещества имеют широкий спектр применения для
лечения сердечно-сосудистых заболеваний. В исследовании Mei-e Tan и др.
разработали твердые липидные наночастицы с суммарным флавоноидным
экстрактом из Dracocephalum moldavica L., и оценили терапевтический эффект на
модели ишемического реперфузионного повреждения миокарда у крыс.
Результаты показали, что суммарный экстракт флавоноидов из змееголовника
молдавского и твердые наночастицы с включенным суммарным флавоноидным
экстрактом из змееголовника молдавского обеспечивали защиту миокарда, а
защитный эффект наночастиц с суммарным флавоноидным экстрактом был
значительно выше, чем у исходного экстракта, в зависимости от размера
инфаркта, гистопатологического изучения, уровней кардиоспецифических
ферментов (лактатдегидрогеназы и креатинкиназы) и цитокинов (интерлейкин-β,
фактор некроза опухоли-α)[157].
Водное извлечение из надземной части D. moldavica дозозависимо
уменьшало количество переходов в тесте «избегание». Эффект может считаться
анксиолитическим; однако те же самые дозы также вызывали значительное
сокращение общей активности мышей в тесте «открытое поле» по сравнению с
контрольной группой. Это влияние на поведение является следствием
уменьшения активности животных из-за седативного действия лекарственных
препаратов. Полученные результаты аналогичны тем, которые наблюдаются при
высокой дозе диазепама; в них диазепам также вызывал снижение количества
переходов между светлым и темным отсеками в тесте «избегание» и общей
активности в тесте «открытое поле».
Водное извлечение из травы D. moldavica обладает седативной и
миорелаксирующей активностью, снижает у подопытных животных
локомоторную активность и приводит к общему ингибированию активности
нейронов в центральной нервной системе (ЦНС)[109].
Установлено, что розмариновая и кофейная кислоты содержащиеся в
экстракте змееголовника молдавского вызывают антидепрессивный эффект и
проявляют анксиолитическую активность [128, 129].
В настоящее время змееголовник молдавский востребован не только как
эфиромасличное, но и как фармацевтическое сырье, т. к. входит в состав
биологически активных добавок, чаев, в составе которых оказывает не только
лекарственное действие, но и улучшает вкус, выпускается в виде брикетов и
капсул. Змееголовник молдавский входит в состав чаев «Finetea naturii», «Digesti
plus», «Baby ceai» и др., производимых фирмой «Doctor Farm» (Молдова). В
некоторых странах Европы его выращивают в качестве – заменителя мелиссы
лекарственной [17].
В Германии разработаны стандарты на сухую траву змееголовника
молдавского, методы испытания сырья на подлинность [18].
В Российской Федерации зарегистрированы биологически активная добавка
к пище «Змееголовник молдавский», применяемая в качестве источника
флавоноидов, дубильных веществ, содержащей эфирное масло (пакеты по 25-500
г, фильтр-пакеты по 1,5-2,0 г, брикеты по 2,0-5,0 г, гранулы по 25-500 г) и трава
змееголовника молдавского («Змееголовник молдавский-С») для применения в
качестве биологически активной добавки к пище [35].
Другими представителями сем. яснотковых являются котовник
крупноцветковый и котовник кошачий. Эфирное масло Nepeta cataria и
непеталовая кислота значительно продлевали сон, вызванный гексобарбиталом
[110]. Непетолактоны, содержащиеся в эфирном масле из травы представителей
рода Nepeta L., обладают анксиолитической, седативной и гипнотической
активностью [50, 75].
Трава котовника кошачьего входит в состав чаев с жаропонижающим и
успокоительным эффектом [40]
На сегодняшний день из видов рода Nepeta выделено более двадцати
фенольных производных. Наиболее часто присутствующими соединениями
являются кофейная, розмариновая, хлорогеновая, феруловая, п-кумаровая,
галловая, сиринговая, 4-гидроксибензойная и ванилиновая кислоты, кониферин.
В настоящее время более тридцати пяти флавоноидов (флавоны, флаванон,
флавонолы и флаванолы) и их производных были выделены из различных видов
Nepeta. Флавоны, а именно цирсимаритин, изотимусин (8-
гидроксицирсимаритин), генкванин, сальвигенин, 8-гидроксицирсилиол и 8-
гидроксисальвигенин были обнаружены у многих видов Nepeta и выступают в
качестве отличительной хемотаксономической особенности этого рода [144, 145,
151].
Несмотря на пристальное внимание исследователей к этим объектам
потенциал их использования в качестве фармацевтических субстанций и
лекарственных препаратов, остается нереализованным.
Цель работы – разработка способа получения активной субстанции со
специфической биологической активностью, установление химического состава
субстанции и её стандартизация.
Для реализации данной цели были решены следующие основные задачи:

1. Определен химический состав фенольных соединений змееголовника
молдавского травы.
2. Изучено накопление фенольных соединений в образцах сырья
змееголовника молдавского, произрастающих в разных климатических зонах.
3. Разработан способ получения экстракта сухого «Розматин» из травы
змееголовника молдавского и установлена специфическая биологическая
активность.
4. Проведена стандартизация сырья и экстракта сухого «Розматин»:
Разработаны методики количественного определения суммы фенольных
соединений в сырье и в «Розматине»; проведена валидация методик.
5. Разработан проект ФС и НД на сырьё и на сухой экстракт «Розматин»
из травы змееголовника молдавского.
6. Проведен морфолого-анатомический анализ сырья котовника
крупноцветкового и котовника кошачьего.
7. Проведено фитохимическое исследование по получению различных
экстрактов и фракций из травы котовника крупноцветкового и котовника
кошачьего с целью поиска специфической биологической активности.
8. Определен химический состав полученных активных экстрактов из
травы котовника крупноцветкового и котовника кошачьего.
Научная новизна работы. Впервые разработан способ получения сухого
экстракта «Розматин», обладающий активирующим, тонизирующим действием на
сердечно-сосудистую и нервную системы. Получен 1 патент. Установлен
химический состав «Розматина», который представлен флавоноидами флавоного
типа и фенилпропаноидами с преобладанием розмариновой кислоты. Впервые
разработаны методики и проведена валидация количественного определения
фенольных соединений в траве змееголовника молдавского и полученном из нее
сухом экстракте «Розматин». Разработана НД на траву и субстанцию. Определены
показатели качества травы змееголовника молдавского.
Впервые проведено количественное содержание суммы фенольных
соединений в пересчете на розмариновую кислоту в образцах змееголовника
молдавского травы, заготовленной в различных климатических зонах
произрастания.
По результатам фармакогностического изучения составлено описание
морфологических признаков травы двух видов котовника и определены
отличительные диагностически значимые анатомические признаки. Установлено,
что сухие экстракты оказывают достоверно выраженное седативное и
противотревожное действие.
Теоретическая и практическая значимость работы. На основании
проведенных фитохимических исследований был разработан сухой экстракт
«Розматин» из змееголовника молдавского, способ получения которого был
запатентован. В отделе экспериментальной и клинической фармакологии была
определена специфическая биологическая активность. Получены достоверные
результаты, по которым можно рекомендовать эту субстанцию для разработки
препарата «Розматин» и его лекарственных форм.
– Разработан способ получения сухого экстракта «Розматин» (Акт
внедрения).
– Разработана методика количественного определения суммы фенольных
соединений в траве змееголовника молдавского, проведена ее валидация (проект
НД)
– Разработана методика количественного определения суммы фенольных
соединений в сухом экстракте «Розматин». Проведена валидация методики и
стандартизация экстракта (проект НД).
– Разработан лабораторный регламент на способ получения «Розматина».
Методология и методы исследования. При выборе объектов исследования
проводили анализ литературных данных отечественных и зарубежных авторов
для растений семейства Lamiaceae: определение химического состава растений,
поиск биологической активности, а также данных на наличие сырьевой базы. При
разработке способа получения «Розматина» проведен патентный поиск, а для
стандартизации сырья и «Розматина» использовались общие фармакопейные
статьи ГФ XIV издания. В экспериментальной части работы применялись физико-
химические методы исследования: спектральные (УФ-спектрофотометрия,
1 13
спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) H-и С-ЯМР),
хроматографические (колоночная и тонкослойная хроматография (ТСХ),
высокоэффективная жидкостная хроматография с ультрафиолетовым (УФ) и
масс-спектрометрическим детектированием (МС/МС), (ВЭЖХ-УФ-МС),
газожидкостная хроматография с масс-спектрометрическим детектированием
(ГЖХ-МС)).
Положения, выносимые на защиту:
-Результаты установления химического состава травы змееголовника
молдавского, котовника кошачьего, котовника крупноцветкового
-Результаты разработки стандартизации травы змееголовника молдавского
-Результаты разработки сухого экстракта из змееголовника молдавского и
определение компонентного состава.
– Результаты установления химического состава экстракта «Розматин».
– Результаты стандартизации сухого экстракта «Розматин».
– Результаты получения экстрактов из котовника кошачьего и котовника
крупноцветкового с целью определения специфической активности.
– Результаты установления химического состава экстрактов из котовника
кошачьего и котовника крупноцветкового.
Степень достоверности и апробации результатов. Достоверность
полученных результатов подтверждается в ходе многократных исследований с
последующей статической обработкой экспериментальных данных. Все
результаты получены с применением фармакопейных, аттестованных и
валидированных методик, в том числе ранее описанных в научной литературе, на
приборах, прошедших поверку и калибровку. Основные результаты работы
доложены, обсуждены или представлены на международных конференциях в
частности: «Молодые ученые и Фармация XXI века» (Москва, 2018 г),
«Метаболомика и качество жизни» (Москва, 2019), «Современные тенденции
развития технологий здоровьесбережения» (Москва, 2019), XXVII Российский
национальный конгресс «Человек и лекарство (Москва, 2020), «Гармонизация
подходов к фармацевтической разработке» (Москва, 2020)
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных статей, 6
статей в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России, из них 3 – в
издании базы данных Scopus, 1 – в издании WoS, получен 1 патент РФ на
изобретение.
Связь задач исследования с планом фундаментальной науки.
Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской
работы ФГБНУ «Всероссийского научного исследовательского института
лекарственных и ароматических растений» по теме №0576-2019-0010 «Поиск
активных фракций природных соединений, разработка способов их получения из
растительного сырья, методик стандартизации и создание на их основе
современных лекарственных форм» (Регистрационный номер АААА-А17-
117080910129-7)
Соответствие диссертационной работы паспорту научной
специальности. Исследование было проведено в соответствие научной
специальности – 3.4.2 Фармацевтическая химия, фармакогнозия
(фармацевтические науки).
Личный вклад автора. Проведен поиск экстрактов и фракции для
установления специфической биологической активности, анализ данных
литературы, выполнен весь спектр экспериментальных исследований.
Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на
214 страницах машинописного текста, структура диссертации состоит из
введения, обзора литературы (1 глава), описания объектов, материалов и методов
исследования (2 глава) и пяти глав экспериментальных исследований,
заключения, общих выводов, списка литературы, включающего 180 источника, из
них 137 на иностранном языке, и 16 приложений. В диссертацию включены 54
рисунка и 20 таблиц.

Заказать новую

Лучшие эксперты сервиса ждут твоего задания

от 5 000 ₽

Не подошла эта работа?

Закажи новую работу, сделанную по твоим требованиям

Читать

Публикации автора в научных журналах

Разработка методик стандартизации субстанции «Розматин» из травы змееголовника молдавского

Е. В. Звездина [и др.] // Фармация. – 2- No– С.25-30Лупанова И. А. Сравнительная оценка нейротропной активности экстрактов котовников кошачьего и крупноцветкового /И. А. Лупанова [и др.] // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2- Т. - No - С. 95

👀 Область наук

✍️ Журнал

ФАРМАЦИЯ

#ВАК РФ

#РИНЦ

Исследование противовоспалительной активности экстрактов котовника крупноцветкового и котовника кошачьего в условиях in vitro

И.А. Мартынчик [и др.] //Разработка и регистрация лекарственных средств.– 2– Том 9, No4, приложение – С. 133-Шейченко О. П. Химический состав и биологическая активность сухого экстракта «Розматин» из травы змееголовника молдавского / О.П. Шейченко [и др.] // Химия растительного сырья. – 2- No– С. 253-264

👀 Область наук

✍️ Журнал

РАЗРАБОТКА И РЕГИСТРАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

#Scopus

#ВАК РФ

#РИНЦ

Исследования по стандартизации травы змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.)

Е.В. Звездина [и др.] // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2- No- С. 7-12Звездина Е. В. Представители семейства Lamiaceae Lindl. как источники лекарственного растительного сырья для получения нейротропных средств (обзор)/Е.В. Звездина [и др.] // Фармация и фармакология – 2020 - No- С. 4-2823

Сравнительное исследование внешних и морфолого-анатомических признаков растительного сырья представителей рода Nepeta L.

Е.В. Звездина // Молодые учёные и фармация XXI века: сборник научных трудов шестой научно-практической конференции. – Москва, 2- С. 168-177Звездина Е. В., Е. Н. Курманова, Е. В. Ферубко. Противовоспалительная активность экстракта змееголовника молдавского под условным названием «Розматин» // Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения: сборник трудов Седьмой научной конференции с международным участием. ФГБНУ ВИЛАР.- Москва, 2- С. 440-444

Помогаем с подготовкой сопроводительных документов

Совместно разработаем индивидуальный план и выберем тему работы Подробнее

Помощь в подготовке к кандидатскому экзамену и допуске к нему Подробнее

Поможем в написании научных статей для публикации в журналах ВАК Подробнее

Структурируем работу и напишем автореферат Подробнее

Хочешь уникальную работу?

Больше 3 000 экспертов уже готовы начать работу над твоим проектом!

Образование высшее (2009 год) педагог-психолог (УрГПУ). В 2013 году получено образование магистр психологии. Опыт преподавательской деятельности в области психологии ... Читать все

Образование высшее (2009 год) педагог-психолог (УрГПУ). В 2013 году получено образование магистр психологии. Опыт преподавательской деятельности в области психологии и педагогики. Написание диссертаций, ВКР, курсовых и иных видов работ.

#Кандидатские #Магистерские

592 Выполненных работы

Работаю в сфере метрологического обеспечения. Защищаю кандидатскую диссертацию. Основной профиль: Метрология, стандартизация и сертификация. Оптико-электронное прибост... Читать все

#Кандидатские #Магистерские

10 Выполненных работ

Занимаю 1 место в рейтинге исполнителей по категориям работ "Научные статьи" и "Эссе". Пишу дипломные работы и магистерские диссертации.

#Кандидатские #Магистерские

5125 Выполненных работ

Имеется большой опыт написания творческих работ на различных порталах от эссе до кандидатских диссертаций, решения задач и выполнения лабораторных работ по любым напра... Читать все

Имеется большой опыт написания творческих работ на различных порталах от эссе до кандидатских диссертаций, решения задач и выполнения лабораторных работ по любым направлениям физики, математики, химии и других естественных наук.

#Кандидатские #Магистерские

5 Выполненных работ

Пишу качественные выпускные квалификационные работы и магистерские диссертации. Опыт написания работ - более восьми лет. Всегда на связи.

#Кандидатские #Магистерские

28 Выполненных работ

Окончила магистратуру Воронежского государственного университета в 2009 г. В 2014 г. защитила кандидатскую диссертацию. С 2010 г. преподаю в Воронежском государственно... Читать все

Окончила магистратуру Воронежского государственного университета в 2009 г. В 2014 г. защитила кандидатскую диссертацию. С 2010 г. преподаю в Воронежском государственном университете инженерных технологий.

#Кандидатские #Магистерские

66 Выполненных работ

Работы пишу, начиная с 2000 года. Огромный опыт и знания в области экономики. Закончил школу с золотой медалью. Два высших образования (техническое и экономическое). С... Читать все

Работы пишу, начиная с 2000 года. Огромный опыт и знания в области экономики. Закончил школу с золотой медалью. Два высших образования (техническое и экономическое). Сейчас пишу диссертацию на соискание степени кандидата экономических наук.

#Кандидатские #Магистерские

692 Выполненных работы

Стаж педагогической деятельности в вузах Москвы 15 лет, автор свыше 140 публикаций (РИНЦ, ВАК). Большой опыт в подготовке дипломных проектов и диссертаций по научной с... Читать все

Стаж педагогической деятельности в вузах Москвы 15 лет, автор свыше 140 публикаций (РИНЦ, ВАК). Большой опыт в подготовке дипломных проектов и диссертаций по научной специальности 12.00.14 административное право, административный процесс.

#Кандидатские #Магистерские

216 Выполненных работ

Добрый день, работаю в сфере написания студенческих работ более 7 лет. Всегда довожу своих студентов до защиты с хорошими и отличными баллами (дипломы, магистерские ди... Читать все

Добрый день, работаю в сфере написания студенческих работ более 7 лет. Всегда довожу своих студентов до защиты с хорошими и отличными баллами (дипломы, магистерские диссертации, курсовые работы средний балл - 4,5). Всегда на связи!

#Кандидатские #Магистерские

138 Выполненных работ