Количественное определение иматиниба в плазме крови человека методом ВЭЖХ
ВВЕДЕНИЕ ………………………………………………………………………………………………………. 5
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР………………………………………………………………. 10
1.1 История открытия иматиниба ………………………………………………………………….. 10
1.2 Физические и физико-химические свойства иматиниба …………………………… 12
1.3 Инструментальные методы определения иматиниба в плазме крови
человека ……………………………………………………………………………………………………….. 16
1.3.1 Определение иматиниба методом ВЭЖХ/МС …………………………………….. 17
1.3.2 Определение иматиниба методом ВЭЖХ-УФ …………………………………….. 19
1.4 Методы пробоподготовки образцов плазмы крови человека для
хроматографического определения иматиниба ……………………………………………… 22
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ …………………………………………………. 28
2.1 Объект исследования ………………………………………………………………………………. 28
2.2 Материалы и реактивы ……………………………………………………………………………. 28
2.3 Оборудование …………………………………………………………………………………………. 28
2.3.1 Средства измерений …………………………………………………………………………… 28
2.3.2 Вспомогательное оборудование …………………………………………………………. 31
2.4 Условия оценки влияния состава подвижной фазы на хроматографические
характеристики пика иматиниба и разработки параметров его
хроматографического определения ……………………………………………………………….. 32
2.5 Условия валидации биоаналитической методики количественного
определения иматиниба в плазме крови человека………………………………………….. 34
2.6 Условия анализа образцов плазмы крови добровольцев, содержащих
иматиниб, в клиническом исследовании биоэквивалентности ……………………….. 34
2.6.1 Условия исследования биоэквивалентности……………………………………….. 34
2.6.2 Условия хроматографического определения иматиниба в образцах
плазмы крови добровольцев ………………………………………………………………………. 35
2.6.3 Расчет фармакокинетических параметров ………………………………………….. 36
ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА БИОАНАЛИТИЧЕСКОЙ МЕТОДИКИ
КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИМАТИНИБА В ПЛАЗМЕ КРОВИ
ЧЕЛОВЕКА МЕТОДОМ ВЭЖХ ……………………………………………………………………… 37
3.1 Разработка условий хроматографического определения иматиниба …………. 37
3.1.1 Изучение спектральных характеристик иматиниба …………………………….. 37
3.1.2 Обоснование выбора хроматографических параметров определения
иматиниба …………………………………………………………………………………………………. 38
3.1.3 Влияние состава подвижной фазы на хроматографические параметры
пика иматиниба …………………………………………………………………………………………. 39
3.2 Разработка методики пробоподготовки образцов плазмы крови человека
для хроматографического определения иматиниба ……………………………………….. 47
3.3 Биоаналитическая методика количественного определения иматиниба в
плазме крови человека методом ВЭЖХ с УФ-детектированием ……………………. 58
ГЛАВА 4. ВАЛИДАЦИЯ БИОАНАЛИТИЧЕСКОЙ МЕТОДИКИ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИМАТИНИБА В ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА И РАСЧЕТ
МЕТРОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ………………………………………………………….. 62
4.1 Проверка пригодности хроматографической системы ……………………………… 62
4.2 Оценка специфичности методики ……………………………………………………………. 65
4.3 Определение предела обнаружения методики ………………………………………….. 66
4.4 Установление нижнего предела количественного определения методики … 70
4.5 Изучение линейности методики ………………………………………………………………. 71
4.6 Оценка правильности, повторяемости и внутрилабораторной
прецизионности методики…………………………………………………………………………….. 74
4.7 Исследование стабильности анализируемых образцов …………………………….. 84
4.8 Оценка переноса сигнала определяемого вещества ………………………………….. 86
4.9 Изучение надежности (устойчивости, робастности) методики …………………. 88
ГЛАВА 5. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИМАТИНИБА В ПЛАЗМЕ
КРОВИ ДОБРОВОЛЬЦЕВ В КЛИНИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ
БИОЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ……………………………………………………………………………. 93
ВЫВОДЫ ……………………………………………………………………………………………………….. 99
УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ…………………………………………. 101
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………………………………………………. 102
Приложение 1. ……………………………………………………………………………………………. 115
Приложение 2. ……………………………………………………………………………………………. 116
Актуальность работы. В современном лечении раковых заболеваний
крови и кожи важное место занимает химиотерапия, обеспечивающая подавление
роста опухолевых клеток и усиление процесса их естественной гибели. Лучшим
из таргетных (целевых) препаратов, применяемых при меланоме и миелолейкозе,
является иматиниб [1-5]. Он впервые был разработан компанией Novartis и
реализуется под торговым наименованием Гливек®, объемы продаж которого на
рынке России составляют более чем 150 млн долларов США в год. Иматиниб
включен в Список стратегически значимых лекарственных средств и входит в
перечень жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов
(ЖНВЛП) [6-7]. В связи с тем, что одной из важнейших задач Стратегии развития
фармацевтической промышленности до 2020 г является импортозамещение
лекарственных средств, в том числе иматиниба, а также с истечением срока
патентной защиты на производство Гливека® и большим объемом рынка его
продаж, этот препарат представляет интерес для отечественных производителей
дженериков.
Для государственной регистрации в РФ воспроизведенного лекарственного
препарата на основе иматиниба согласно Российскому законодательству
необходимо подтверждение его эффективности и безопасности оригинальному
препарату, которое устанавливается путем клинического исследования
биоэквивалентности [8]. Обязательным этапом на пути проведения такого
исследования является разработка биоаналитической методики определения
Помогаем с подготовкой сопроводительных документов
Хочешь уникальную работу?
Больше 3 000 экспертов уже готовы начать работу над твоим проектом!
4.7 (82 отзыва)
4.8 (37 отзывов)
4.7 (18 отзывов)
4 (15 отзывов)
4.6 (71 отзыв)
4.9 (5 отзывов)
5 (145 отзывов)
4.7 (96 отзывов)
4.8 (211 отзывов)
