Лечебно – профилактическая эффективность пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3 при энтерите телят

Лебедев Максим Николаевич
Бесплатно
В избранное
Работа доступна по лицензии Creative Commons:«Attribution» 4.0

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ
1.1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.1 Энтерит телят: определение болезни, распространение и причины возникновения
1.1.2 Патогенез и клиническое проявление болезни
1.1.3 Диагностика энтеритов у телят
1.1.4 Лечебно-профилактические мероприятия при энтеритах телят
1.1.5 Применение пробиотиков в ветеринарной медицине и животноводстве
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы исследования
2.2. Результаты исследований
2.2.1 Клиническое состояние здоровых и больных энтеритом телят
2.2.2 Сравнительный анализ разных схем лечения больных энтеритом телят
2.2.3 Результаты иммунологического исследования сыворотки крови после применения разных схем лечения
2.2.4 Морфологические показатели крови телят при профилактике энтерита
2.2.5 Иммунологические показатели крови телят при профилактике энтерита
2.2.6 Биохимические показатели крови телят при профилактике энтерита
2.2.7 Показатели микрофлоры кишечника телят при профилактике энтерита
2.3 Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
4.1 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
4.2 ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ
4.3 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
5. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
6. ПРИЛОЖЕНИЯ

Материалы и методы исследования
Работа осуществлялась на кафедре клинической диагностики ФГБОУ ВО
«Санкт-Петербургскийгосударственныйуниверситетветеринарной
медицины». Клинические эксперименты проводились в период с 2018 по 2021
гг. в условиях животноводческих хозяйств Ленинградской области. За это
время было обследовано 295 телят, из которых пробиотик получали 180
животных. В то время как 115 животных пробиотический препарат не
принимали и у них признаки энтерита проявлялись в 80,0% случаев (92
теленка).
В экспериментах проводился подбор животных по принципу аналогов с
учётом возраста, живой массы и физиологического состояния. В каждом опыте
было сформировано 2 группы телят черно-пестрой породы (подопытная и
контрольная).
Телятам подопытной группы задавали пробиотик с рождения и до 45-
дневного возраста один раз в день по 0,5 грамм с кормом, а животным
контрольной группы пробиотик не давали при всех одинаковых условиях
кормления и содержания.
Для оценки действия пробиотика на организм телят ежедневно проводили
клиническое обследование животных.
Длянаучно-исследовательскойработыбылаиспользована
лиофилизированная форма пробиотика на основе штамма микроорганизмов
Enterococcus Faecium L-3 в разведении 1х10¹º КОЕ (колониеобразующих
единиц) на 1 грамма сухого вещества (рисунок 1).

Рисунок 1 – Пробиотик в виде сухого порошка (лиофилизата) на основе штамма Enterococcus
Faecium L-3.
Лиофилизат был изготовлен по следующей методике: изначально
делают высевы аутобактерий из фекалий (не менее 0,5 грамм кала) телят на
агаризованные питательные среды. После этого к 1 грамму фекалий добавляют
9,0 мл физиологического раствора хлорида натрия с добавлением фосфатов
натрия двух и однозамещенных. Далее делают посевы суспензии фекалий в
разведении 1:10 в количестве 100,0 мкл на питательную агаризованную среду
для энтерококков с азидом натрия и культивируют в течение 24-48 часов при
температуре +370С. Следующий шаг — это отбор типичных по морфологии
колоний E. Faecium сирене-розового цвета со светло-розовым ободком, которые
отсевают в новую чашку Петри с плотной азидной средой с целью накопления
чистой культуры. Культивируют в течение 24 часов при +37 0С. После
окрашивания мазков по методу Грама микроскопируют препараты. При
световой микроскопии клетки E. Faecium приобретают темно-синий цвет,
имеют округлую форму и располагаются в виде коротких цепочек. Чистые
культуры микроорганизмов без генов патогенности высевают на 10,0 мл 5,0%
бульона из соевых белковых изолятов и инкубируют в течение 24-48 час при
+370С.
После получения 10,0 мл закваски применяют метод лиофилизации,
который позволяет получить сухой препарат без потери его структурной
целостности и биологической активности. При этом препараты становятся
более устойчивыми к любым факторам внешнего воздействия и могут
сохранять свои свойства в течение длительного периода хранения.
Лиофилизация проводилась на установке лиофильной сушки FreeZone
Triad 2,5л/-850С (Рисунок 2).

Рисунок 2 – Установка лиофильной сушки FreeZone Triad 2,5л/-850С.
Данная установка предназначена для обезвоживания предварительно
замороженных биологических объектов в условиях низких температур и
вакуума с целью их длительного хранения. Предварительно замороженные
материалы (от -40 до -60°C) в ампулах или флаконах переносятся в
сублимационную сушилку FreeZone 2,5л/-85°C, где создается вакуум и
поддерживается низкая температура. В результате сублимации с поверхности
замороженного материала удаляется свободная вода, препарат переходит из
замороженного твёрдого состояния в сухое. Сушку объекта проводят в той же
камере при t до +20 ° С и выше, что удаляет связанную воду из препарата.
Когда сушка завершена, вакуумный насос останавливается и стерильный сухой
воздух или азот вводится в камеру через фильтр. Ампулы или флаконы быстро
закрываются, чтобы предотвратить попадание влаги во время хранения. После
проведённых манипуляций получали лиофильно высушенную форму
пробиотического препарата Enterococcus Faecium L-3 в разведении 1х10¹º КОЕ
(колониеобразующих единиц) на 1 грамм сухого вещества.
Также проводили морфологический, иммунологический, биохимический
анализы крови в 14-ти, 30-ти и 45-ти дневном возрасте.
Чтобы провести лабораторные исследования осуществляли взятие крови
из ярёмной вены телят 14-ти, 30-ти и 45-ти дневного возраста утром перед
первым кормлением. Кровь брали в пробирки с антикоагулянтом Трилоном Б
(из расчета 4 капли 10,0% раствора Трилона Б на 10 мл крови). Для проведения
биохимического и иммунологического анализа использовали сыворотку крови,
которую получали методом отстаивания в прохладном месте при температуре
+4-10 ºС. Через день сыворотку отделяли и переносили в пробирки типа
Эппендорф. Сыворотку при необходимости замораживали и хранили в
морозильной камере при температуре не выше -20ºС).
Определение количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина,
скорости оседания эритроцитов (СОЭ) и гематокритной величины, проводили
по традиционной методике. Количество эритроцитов и лейкоцитов
подсчитывали на ветеринарном автоматическом гематологическом анализаторе
МЕК-6550К. Скорость оседания эритроцитов определяли по методу
Панченкова, гемоглобин – гемиглобинцианидным методом, гематокритную
величину –с помощью центрифуги CELLOCRIT– 2.
Биохимические показатели в сыворотке крови определяли на
биохимическом анализаторе «Stat Fax 1904 Plus» по следующим методам:
•общий белок – биуретовым методом, который заключается в том,
что белки в щелочной среде реагируют с ионами меди с образованием
комплексных соединений, окрашенных в фиолетовый цвет (биуретовая
реакция), при этом интенсивность окраски раствора пропорциональна
содержанию белков в исследуемой пробе;
•альбуминыопределяликолориметрическимметодомс
бромкрезоловым зеленым, основанном на том, что альбумины при pH 4,2
проявляют способности катиона и способны связаться с анионным красителем
бромкрезоловым зеленым с образованием комплекса сине-зеленого цвета;
•α-амилазу определяли энзиматическим кинетическим методом;
•щелочную фосфатазу – с помощью кинетического метода с
диэтаноламиновым буфером;
•креатинин – псевдокинетическим методом на основе реакции Яффе
без депротеинизации;
•мочевину – уреазно-глутаматдегидрогеназным кинетическим
методом;
•холестерин – энзиматическим колориметрическим методом;
•билирубин – методом Йендрашика-Грофа;
•аланинаминотрансфераза (АлАТ) – энзиматическим кинетическим
методом;
•аспартатаминотрансфераза (АсАТ) – энзиматическим кинетическим
методом.
Иммунологические показатели определяли следующими методами:
•бактерицидная активность сыворотки крови определялась по
методу О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой;
•лизоцимная активность сыворотки крови по Дорофейчуку В.Г.;
•циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) определяли методом
преципитации 3,5% раствором полиэтиленгликоля и их количество выражали в
условных единицах оптической плотности (усл.ед.);
•иммуноглобулины (Ig) определяли методом осаждения сульфатом
цинка.
Исследования микробиоты кишечника в фекалиях проводились в
медицинской научно-исследовательской лаборатории «Эксплана» (СПб)
методом ПЦР-РВ с использованием набора праймеров «Колононофлор-16»
(табл. 1).
Таблица 1. Перечень выявляемых микроорганизмов и каналы детекции
результатов амплификации.
№ пробирки в стрипеНазвание смеси для амплификации и окраски
FAMHEX
1Общая бактериальная
___
масса
2Lactobacillus spp.___
3Bifidobacterium spp.___
4Escherichia coli___
5Bacteroides fragilis group___
6Faecalibacterium
___
prausnitzii
7Klebsiella pneumoniaeKlebsiella oxytoca
8Candida spp.Staphylococcus aureus
9Escherichia coli
___
enteropathogenic
10Enterococcus spp.___
11Bacteroides
___
thetaiotaomicron
12Clostridium difficileClostridium perfringens
13Proteus spp.___
14Enterobacter spp. /
___
Citrobacter spp.
15Fusobacterium nucleatum
___

16Salmonella spp.Shigella spp.

Вся информация, полученная в опытах, была статистически обработана с
использованием программ Microsoft Excel 2016 и Statistica for Windows, v. 10.
на персональном компьютере. Достоверность различий оценивали с
применением t-критерия Стьюдента при уровне значимости P≤0,05.
Текст диссертационной работы и автореферата оформляли в соответствии
с ГОСТ Р 7.0.11 – 2011 «Диссертация и автореферат диссертации. Структура и
правила оформления».
Результаты собственных исследований и их анализ
Во время опыта было обследовано 295 телят, из которых признаки
энтерита проявлялись у 101 теленка. При том, что у телят, которые принимали
пробиотический препарат с момента рождения как профилактическое средство,
клинические проявления энтерита отмечали только у 5,0% животных.
Проведенные клинические исследования позволили установить, что
телята заболевали энтеритом в первые дни жизни и имели одинаковые
клинические симптомы заболевания. У телят наблюдалось общее угнетение,
животные становились менее активными, чаще лежали. Аппетит у телят в
начале заболевания был снижен, а в разгар болезни регистрировали анорексию.
Видимые слизистые оболочки, как правило, были анемичные, температура тела
была или на верхних границах нормативных значений или имела
субфебрильный характер. У больных животных наблюдали проявление
диарейного синдрома: усиление перистальтики кишечника, при аускультации
кишечника – громкое и постоянное урчание, учащение актов дефекации,
каловые массы бесформенные с резким запахом, жидкой консистенции.
Анальный сфинктер при тяжелом течении энтерита находится в
расслабленном состоянии; при ректальном исследовании в прямой кишке
наблюдались жидкие экскременты с примесью слизи. Шерсть становилась
тусклой и растрепанной, на хвосте и тазовых конечностях обнаруживались
фекалии (рисунок 3). Цвет стула в основном желтый с различной
интенсивностью. Запах кала резкий, кисло-гнилостный со смесью запаха
сероводорода. В фекалиях часто наблюдались слизь (рисунок 4), пузырьки газа
и непереваренные частицы корма.

Рисунок 3 – Шерсть, испачканная фекалиями в области хвоста и тазовой конечности.

Рисунок 4 – Фекальные массы со слизью

При пальпации брюшных стенок в нижней трети у животных отмечалась
болезненность. У телят также наблюдались признаки обезвоживания из-за
изнуряющей диареи. Присутствовала общая слабость, сухость слизистых
оболочек и кожи, низкая саливация, сниженная эластичность кожи, запавшие в
орбиты глазные яблоки (эндофтальм).
Телята, которые не принимали пробиотический препарат, существенно
отставали по массе тела от животных подопытной группы. Телята с
пробиотической поддержкой в 45-ти дневном возрасте весили на 13,0% больше
(Р≤0,01), чем телята контрольной группы. Среднесуточные привесы животных,
не принимающих пробиотический препарат, в первый месяц жизни были на
24,0% меньше по сравнению с животными, которые принимали препарат, а в
полуторамесячном возрасте – на 31,0% (P≤0,05).
Для сравнительной оценки терапевтических мероприятий при энтерите
телят раннего постнатального периода было сформировано 2 группы
животных. В подопытную группу вошли телята, которым ежедневно с первого
дня жизни задавали пробиотик в дозе 0,5 грамм в день с кормом, но у них всё
равно проявились признаки энтерита. Этим животным продолжали вводить
препарат в той же дозировке по 0,5 грамм один раз в день с кормом в качестве
терапии. Контрольную группу составили животные, получавшие лечение по
схеме, применяемой в хозяйстве.
Сравнительный анализ двух схем лечения показал, что у телят
подопытной группы продолжительность болезни в среднем была 2,5±0,3 дней
при терапии с помощью пробиотического препарата, в то время как у
животных, не принимавших пробиотик, признаки заболевания сохранялись в
среднем до 5,2±0,5 дней с начала лечения по принятой в хозяйстве схеме. Тем
самым, можно сделать вывод, что применения лиофильно высушенной формы
пробиотического препарата на основе штамма бактерий Enterococcus Faecium
L-3 является более эффективным средством в лечении энтерита телят раннего
постнатального периода.
Результаты иммунологического исследования сыворотки крови после
лечения телят показали, что у животных, которым проводили терапию
пробиотическим препаратом уровень IgМ, IgG, БАСК, ЛАСК были достоверно
больше, чем у животных, которых лечили по традиционной для хозяйства
схеме О положительном влиянии пробиотиков на уровень иммуноглобулинов и
показатели неспецифической резистентности также пишут Ю. Н., Федоров,
(2009); Н. Н., Шульга, и соавт., (2012); А. А., Хэ, (2013); В. А., Трушкин, и
соавт., (2017); О. А., Грачева, (2019).
Уровень IgM и IgG у телят подопытной группы был достоверно выше
(Р≤0,05), чем у животных контрольной группы на 27,0% и 48,0%,
соответственно. В то же время показатели ЛАСК и БАСК были также
достоверно больше (Р≤0,05), чем у животных контрольной группы на 34,0% и
35,0%, соответственно.
Морфологические, иммунологические, биохимические показатели крови,
а также состав микрофлоры желудочно-кишечного тракта являются очень
важными критериями состояния организма в период болезни. В описываемых
опытах проводились именно эти исследования.
При исследовании морфологического состава крови было отмечено, что
уже в двухнедельном возрасте у телят без пробиотической поддержки
количество эритроцитов в крови телят было достоверно выше на 34,0%, чем у
телят подопытной группы. Такая тенденция сохранялась в 30-ти и в 45-ти
дневном возрасте. Так к 30 дню эксперимента количество эритроцитов в крови
животных подопытной группы было достоверно ниже на 17,0%. К 45-м суткам
эксперимента этот показатель был на 15,0% ниже, чем у телят контрольной
группы.
Что касается гематокритной величины, то данный показатель у телят 14-
ти дневного возраста контрольной группы был достоверно больше на 31,0%,
чем у телят, которые принимали пробиотический препарат. К месячному и 45-
ти дневному возрасту такая тенденция сохранялась. Так в 30-ти дневном
возрасте у телят контрольной группы гематокритная величина была больше на
21%, по сравнению с телятами подопытной группы.
Уровень гематокрита у телят в 45-ти дневном возрасте опытной группы
составил 35,4 ± 1,5%, что несколько выше, чем у телят контрольной группы
(33,2±1,1%), но разница была не достоверной (P>0,05). Увеличение количества
эритроцитов и гематокритной величины связано с обезвоживанием организма,
вследствие диареи.
Количество гемоглобина в крови двухнедельных телят в группе,
получавшей пробиотик, было недостоверно выше, чем у телят, которые не
получали пробиотик (P>0,05).
Также у телят контрольной группы 30-ти дневного возраста уровень
гемоглобина был достоверно выше на 12,0%, чем у животных подопытной
группы.
К 45-ти дневному возрасту эта тенденция сохранилась и концентрация
гемоглобина у телят, не принимавших пробиотический препарат, была
достоверно выше на 10,0%, что связано с эксикозом организма.
Одновременно с этим в двухнедельном возрасте количество лейкоцитов у
животных, принимавших препарат, было больше на 23,0%.
К 30 дню эксперимента количество лейкоцитов в крови телят
контрольной группы также было достоверно ниже на 13,0%, чем у телят
подопытных групп.
В 45-ти дневном возрасте разница в показателях лейкоцитов у животных
обеих опытных групп не была отмечена (P>0,05).
Что касается СОЭ, то этот показатель на 14-й, 30-й и 45-й дни
исследования у животных в группах с пробиотической поддержкой и без неё
достоверных различий не имел. Результаты наших исследований совпадают с
данными, полученными А. М., Воробьевым, (2011); Д. А., Акимовым, (2015);
Р.А., Мерзленко, и соавт., (2017); А. А. Эленшлегером, (2019); А. В.,
Требуховым (2019); О. А., Грачевой, (2019).
По результатам исследования иммунологических показателей крови
видно, что в 14-ти дневном возрасте в таких иммунологических показателях,
как содержание общего белка, альбуминов, IgA, IgM, IgG достоверных
различий в показателях не было (P>0,05).
На протяжении всего периода исследования была выявлена тенденция к
повышенному уровню бактерицидной и лизоцимной активности у телят
подопытной группы.
Тем самым, в 14-ти дневном возрасте у телят, принимавших пробиотик,
уровень БАСК был на 27,0%, а ЛАСК на 21,0% больше, чем у телят
контрольной группы. Такая картина сохранилась в 30-ти и 45-ти дневном
возрасте.
К 30-му дню жизни у телят подопытной группы БАСК была выше на
27,0%, чем у животных контрольной группы, а уровень ЛАСК был достоверно
выше у телят, принимавших пробиотический препарат, на 26,0%, чем у
животных контрольной группы.
В 45-ти дневном возрасте у животных подопытной группы уровень БАСК
был выше на 61,0%, а ЛАСК на 34,0%, чем у телят контрольной группы. Это
говорит о стимулирующем влиянии пробиотического препарата на основе
штамма Enterococcus Faecium L-3 на показатели неспецифической защиты
организма телят.
В 30 – ти дневном возрасте уровень общего белка в сыворотке крови был
достоверно выше на 11,0% у телят подопытной группы, чем у телят
контрольной группы.
Более низкое содержание общего белка в сыворотке крови у телят
контрольной группы обусловлено нарушением всасывания в тонкой кишке, а
также с длительным голоданием.
Следует отметить, что содержание глобулинов в крови у телят
подопытной группы в 30-ти дневном возрасте было больше на 19,5 %, чем у
животных, которые не принимали пробиотический препарат.
Кроме того, показатели IgG у телят подопытной группы в месячном
возрасте были на 31,0% больше, чем данный показатель у животных
контрольной группы.
Что касается показателей иммунитета, таких как: количество альбуминов,
IgA, IgM, IgG в крови, то у телят, принимавших препарат, в 45-ти дневном
возрасте их показатели были выше, чем у телят группы контроля на 23,0%,
35,0%, 22,0% и на 63,0%, соответственно. Это говорит о стимулирующем
влиянии пробиотического препарата на основе штамма Enterococcus Faecium L-
3 на показатели иммунитета телят, что подтверждается данными, полученными
Т. А., Инюкиной, и соавт., (2010); С. П., Ковалевым, и соавт., (2015); Р.А.,
Мерзленко, и соавт., (2018).
Следует отметить, что уровень циркулирующих иммунных комплексов
(ЦИК) и процентное соотношение альбуминов и глобулинов в течение всего
периода исследования у телят с пробиотической поддержкой и без неё не
показал значимой разницы (P>0,05).
В то же время при нарастании уровня условно-патогенной микрофлоры у
телят в возрасте 14 и 30 дней были достоверно ниже следующие показатели:
количество лейкоцитов, уровень общего белка, IgG и активность амилаза,
показатели БАСК и ЛАСК в контрольной группе, чем у животных,
принимавших пробиотик. Это указывает на сильную обратную зависимость
между этими показателями.
Результаты исследований биохимического состава сыворотки крови телят
показали, что в 14 – ти дневном возрасте активность амилазы у телят
подопытной группы была выше на 38,0%, чем у телят контрольной группы.
В этом возрасте у животных, которые не принимали пробиотический
препарат уровень билирубина был достоверно выше на 46,0%, чем у телят
подопытной группы.
Также в месячном возрасте у телят, не принимавших пробиотик, уровень
билирубина был достоверно выше на 82,0%.
Эта тенденция сохранилась и к возрасту 45 – ти дневному, но в меньшей
степени. Уровень билирубина у контрольной группы телят был достоверно
выше, чем у животных с пробиотической поддержкой на 25,0%.
Что касается активности щелочной фосфатазы, то в двухнедельном
возрасте данный показатель был больше на 51,0% у телят контрольной группы,
чем у животных, которые принимали пробиотический препарат, что говорит о
возможных дистрофических изменениях в печени и общей интоксикации
организма.
В месячном возрасте у телят, не принимавших пробиотик, активность
щелочной фосфатазы была выше на 28,0%, чем у подопытной группы
животных.
В 45-ти дневном возрасте активность щелочной фосфатазы также была
достоверно больше у животных, которые не принимали пробиотик на основе
штамма Enterococcus Faecium L-3 на 35,0%, чем у телят подопытной группы.
В месячном возрасте у телят контрольной группы был достоверно выше
(P≤0,01) уровень мочевины в сыворотке крови, что также указывает на
дегидратацию организма, вследствие диареи.
При оценке активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) отмечена
тенденция к повышенному ее содержанию у животных контрольной группы на
всем протяжении эксперимента. Так в 14-ти дневном возрасте активность АлАТ
была достоверно больше на 67,0%, чем у телят, которые принимали
пробиотический препарат.
В 30-ти дневном возрасте данный показатель также был достоверно выше
у телят контрольной группы на 45,0%.
И к 45-дню эксперимента АлАТ была достоверно выше у телят, не
принимавших препарат, чем у телят с пробиотической поддержкой на 47,0%.
Сходныерезультатыбылииприоценкеактивности
аспартатаминотрансферазы (АсАТ). Так в двухнедельном возрасте активность
АсАТ была достоверно выше на 40,0% у животных контрольной группы, чем у
телят с пробиотической поддержкой.
К 30-ти дневному возрасту этот показатель был достоверно выше на
44,0% у животных без пробиотической поддержки.
Тенденция к повышенному содержанию АсАТ в сыворотке крови телят
контрольной группы сохранялась и к 45-ти дневному возрасту, но разница была
не достоверна (P>0,05).
Следует отметить, что при исследовании таких показателей как:
креатинин и холестерин во всех возрастных группах достоверных отличий не
было (P>0,05). Эти результаты подтверждается данными, полученными А. П.,
Курдеко, и соавт., (2014); Л. А., Морозовой, и соавт., (2014); А. А., Воиновой, и
соавт., (2015).
Кроме того, важно отметить, что при увеличении числа условно-
патогенной микрофлоры у телят 14 – и 30 – ти дневного возраста, которые не
принимали пробиотик, такие показатели крови как: количество эритроцитов,
уровень гемоглобина, гематокритная величина, мочевина, щелочная фосфатаза,
АсАТ, билирубин были достоверно больше, чем у животных, которым
задавался данный препарат. Это, в свою очередь говорит о сильной прямой
взаимосвязи этих показателей.
В процессе эксперимента было установлено, что у телят 14-ти дневного
возраста, получавших пробиотик, было достоверно меньше количество общей
бактериальной массы на 14,0%, чем в контрольной группе. Уровень общей
бактериальной массы у телят месячного возраста, принимавших препарат,
также был достоверно ниже на 19,0%, чем у животных контрольной группы,
что, очевидно, свидетельствует об увеличении числа условно-патогенной
микрофлоры. Количество Escherichia coli у телят подопытной группы 14-ти
дневного возраста был достоверно меньше на 19%, чем у телят контрольной
группы. Уровень Bacteroides fragilis group в группе телят с пробиотической
поддержкой 14-ти дневного возраста был достоверно меньше на 14,0%, чем в
группе, не принимающей пробиотик. В подопытной группе животных 30-ти
дневного возраста также было достоверно меньше Bacteroides fragilis на 18,5%,
чем в контрольной группе телят (рисунки 5-6).

1211,3911,39
9,819,83
8,95 9,46
7,978,09
87,45
6,46
0
ОбщаяBifidobacteriumEscherichia coliBacteroides fragilis Faecalibacterium
бактериальнаяspp.groupprausnitzii
масса

Подопытная (14 дней)Контрольная 14 дней

Рисунок 5 – Показатели микрофлоры кишечника (LgКОЕ/г) телят в 14-ти дневном возрасте.
12,1212,12
9,879,87
8,39 8,207,98 8,49
6,84 6,98
0
ОбщаяBifidobacteriumEscherichia coliBacteroides fragilis Faecalibacterium
бактериальнаяspp.groupprausnitzii
масса

Подопытная 30 днейКонтрольная 30 дней
Рисунок 6 – Показатели микрофлоры кишечника (LgКОЕ/г) телят в месячном возрасте.

При проведении расчёта экономической эффективности было
определено, что терапия одного телёнка по принятой в хозяйстве схеме в
среднем длится в течение 5,2±0,5 дней и общая стоимость составляет 1043,17
рублей, что выше затрат на профилактику энтерита, которая проводилась в
течение 45 дней с использованием пробиотика на основе штамма Enterococcus
Faecium L-3 на 233,17 рублей. На лечение телят этим же пробиотическим
препаратом было затрачено меньше средств, чем в контрольной группе
животных, которое в среднем длилось в течение 2,5±0,3 дней на 998,17 рублей.
Также стоит отметить, что экономическая эффективность профилактических
мероприятий при энтерите телят при использовании пробиотика на основе
штамма Enterococcus Faecium L-3 составила 1,61 руб. на 1 руб. затрат, а
лечебных мероприятий – 35,23 руб. на 1 руб. затрат.
Следовательно, положительное действие пробиотического препарата на
организмтелятможносчитатьдоказанным,аиспользование
лиофилизированной формы пробиотического препарата в лечебных и
профилактических целях является эффективным.
Таким образом, регулярное скармливание лиофильно высушенной формы
пробиотика на основе штамма бактерий Enterococcus Faecium L-3 телятам
раннего постнатального периода способствует более эффективному лечению и
профилактике энтерита у животных, большей устойчивости к желудочно-
кишечным расстройствам, созданию благоприятных условий для развития
нормальной микрофлоры и не допущению усиленного развития в кишечнике
условно-патогенной микрофлоры.
Заключение
В результате настоящей работы была проведена комплексная диагностика
желудочно-кишечных расстройств у 295 телят черно-пестрой породы,
сформированы группы животных, куда входили телята, которым задавали
пробиотический препарат и телята, которым не давали пробиотик. Проведены
лечебные мероприятия для телят, у которых был установлен энтерит, а также
проведены профилактическиемероприятиясцелью недопущения
распространения энтерита у телят раннего постнатального периода.
Выводы
Одной из главных задач любой отрасли животноводства является
получение и сохранение здорового молодняка. Однако, здоровье животных
всех возрастных групп и, в первую очередь, молодняка может быть ослаблено
из-за условий содержания, кормления и эксплуатации животных, а также
широкого использования в животноводстве антибиотиков на протяжении
последних десятилетий, что приводит к дефициту в организме животных
симбиотической микрофлоры, которая участвует в переваривании корма,
синтезе аминокислот и витаминов, положительно влияет на иммунитет, а также
оказывает антагонистическое действие на патогенную и условно патогенную
микрофлору.
Оптимальным путем решения проблемы, связанной с болезнями
желудочно-кишечного тракта телят, в том числе и энтерита, является
включение пробиотиков в комплекс лечебно – профилактических мероприятий
по предотвращению данных заболеваний.
Проведённые исследования показали эффективность пробиотического
препарата на основе штамма Enterococcus Faecium L-3, позволяющего
эффективно лечить и профилактировать энтериты молодняка крупного
рогатого скота. И на основе этого сделаны следующие выводы:
1. Признаки энтерита у телят в хозяйстве, где проводились опыты,
отмечались у 80,0% исследуемого поголовья. Наиболее частыми причинами у
телят были: нарушение режима кормления и содержания и, как следствие,
снижение резистентности у телят раннего постнатального периода.
2. Клинически энтерит у заболевших телят проявляется общим
угнетенным состоянием, животные чаще лежат, не обращают внимание на
окружающие, периодически вздрагивают, обнюхивают живот. Наблюдаются
усиление перистальтики кишечника, при аускультации кишечника – громкое и
постоянное урчание, учащение актов дефекации, каловые массы бесформенные,
с резким кисло-гнилостным запахом, жидкой консистенции, цвет фекалий
имеет желтый цвет различной интенсивности. Область хвоста и тазовых
конечностей испачканы фекалиями. Сфинктер анального отверстия при
тяжелом течении заболевания расслаблен.
3. В морфологическом составе крови из-за развивающихся диареи и
обезвоживания организма у больных телят отмечается выраженный
эритроцитоз, гиперхромия, повышение гематокритной величины. В
биохимическом составе крови у телят, больных энтеритом, отмечается
достоверно высокие показатели щелочной фосфатазы, билирубина, АлАТ и
АсАТ.
4. Применение пробиотического препарата на основе штамма бактерий
Enterococcus Faecium L-3 снижает заболеваемость у телят с 80,0% до 5,0%.
Телята, принимавшие пробиотик, болели в легкой форме, продолжительность
болезни в среднем составляет 2,5±0,3 дня.
5. Применение пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3
с профилактической целью энтерита оказывает благоприятное действие на
морфологические и биохимические показатели крови, способствует
повышению показателей специфической и неспецифической защиты
организма. Установлено положительное влияние пробиотического препарата на
показатели неспецифической защиты во всех возрастных группах телят,
которое проявлялось повышением бактерицидной активности сыворотки крови
к концу исследования на 61,0% и лизоцимной активности сыворотки крови на
34%.
6. Использование пробиотика в течение 45 дней для профилактики
энтерита у телят способствует более высоким показателям иммунитета у телят,
принимавших препарат, чем у телят контрольной группы. Так, уровень БАСК
выше на 61,0%, ЛАСК на 34,0%, IgA на 35,0%, IgM на 22,0%, IgG на 63,0%.
7. Установлено, что в составе микрофлоры кишечника у телят раннего
постнатального периода с пробиотической поддержкой условно-патогенной
микрофлоры содержится в меньшем количестве. У телят контрольной группы с
возрастом количество условно-патогенной микрофлоры увеличивалось
естественным образом, что способствовало развитию желудочно-кишечных
расстройств. Это указывает на то, что пробиотик создает благоприятные
условия для развития представителей нормальной флоры и не позволяет
усиленно развиваться условно-патогенной микрофлоре.
8. Телята, которые не принимали пробиотический препарат,
существенно отставали по массе тела от животных подопытной группы. Телята
с пробиотической поддержкой в 45-ти дневном возрасте весили на 13% больше
(Р<0,01), чем телята контрольной группы. Среднесуточные привесы животных, не принимающих пробиотический препарат, в первый месяц жизни были на 24,0% меньше по сравнению с животными, которые принимали препарат, а во второй месяц жизни – на 31,0% (P≤0,05). 9. Экономическая эффективность профилактических мероприятий при энтерите телят при использовании пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3 составила 1,61 руб. на 1 руб. затрат, а лечебных мероприятий - 35,23 руб. на 1 руб. затрат. Практические предложения 1. В комплексе терапевтических мероприятий при энтеритах телят различной этиологии рекомендуем применять лиофилизированную форму пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3 внутрь 1 раз в день по 0,5 грамм с кормом 5 дней. 2. В комплексе профилактических мероприятий энтерита телят различной этиологии рекомендуем применять лиофильно высушенную форму пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3 внутрь 1 раз в день по 0,5 грамм с кормом до 45-ти дневного возраста. 3. Полученные результаты настоящего исследования могут быть использованы при составлении учебных пособий, научных статей и методических указаний, касающихся заболеваний желудочно-кишечного тракта телят, а также использовать в учебном процессе, в том числе при проведении лабораторно-практических занятий и чтении лекций, обучающихся по специальности 36.05.01 «Ветеринария». Перспективы дальнейшей разработки темы Данное исследование имеет важное научно-практическое значение для решения проблемы, связанной с заболеваниями желудочно-кишечного тракта молодняка животных. Опираясь на полученные данные об эффективности использования лиофилизированной формы пробиотика на основе штамма бактерий Enterococcus Faecium L-3 в качестве лечебного и профилактического средства необходимо продолжать дальнейшую работу в этом направлении, изучая влияние препарата, как на телят, так и на молодняк других сельскохозяйственных животных.

Актуальность темы
Болезни пищеварительной системы молодняка крупного рогатого скота, в том числе энтерит, являются одной из самых актуальных проблем в развитии животноводческих комплексов в нашей стране, так как занимают первое место по частоте заболеваемости и нанесению экономического ущерба животноводству в целом. Они распространены повсеместно и возникают под воздействием самых различных причин и нередко обладают смешанной этиологией (Калюжный, И. И., 2015; Щербаков Г. Г., 2021; Стекольников, А. А., и соавт., 2021).
Как правило, в разных хозяйствах основные причины – этиологические агенты, а также факторы, способствующие возникновению и развитию болезни, отличаются. У молодняка животных, в том числе у телят встречаются, как первичные энтериты, обусловленные кормлением, стресс- факторами, эксплуатацией животных и вторичные, сопровождающие некоторые инфекционные болезни – паратиф, чуму, сибирскую язву и другие. На такие энтериты, как правило, наслаивается негативное воздействие условно-патогенной и патогенной микрофлоры (Сухинин, А. А., 2014; Батраков, А. Я., и соавт., 2015; Курдеко, А. П., 2019; Балабанова В. И., Кудряшов А. А., 2020; Ковалев, С. П., 2021; Яшин, А. В., 2021).
Степень клинического проявление болезни, количество заболевших животных и исход зависят от пола, возраста и породы животного, его физиологического состояние, а также от уровня его естественной резистентности и условий содержания, кормления и эксплуатации молодняка. Напряженность врожденного иммунитета телят зависит от многих факторов, важнейшими из которых являются: количество и качество получаемого корма, соблюдение санитарных и зоогигиенических норм содержания животных, отсутствие стрессовых факторов, и других ВВЕДЕНИЕ
(Коваленок, Ю. К., 1999; Никулин, И. А., и соавт., 2008; Грачева, О. А., и соавт., 2010; Гертман, А. М., и соавт., 2010; Батраков, А. Я., и соавт., 2015; Эленшлегер, А. А., и соавт., 2015; Крячко, О. В., и соавт., 2019; Shanahan, G. W., 2001).
Использование ветеринарных бактериальных препаратов теперь нашло свое применение не только для профилактики, но и для лечения многих болезней животных, в том числе телят. Такие препараты направлены на восстановление и поддержание нормальной микрофлоры желудочно- кишечного тракта животных, которая в свою очередь играет роль естественного защитного барьера организма от проникновения патогенной микрофлоры. При этом полезные микроорганизмы пищеварительной системы животного – молочнокислые и бифидобактерии, играют роль иммуномодуляторов, синтезируя собственные антибиотические вещества, стимулирующие работу защитных сил организма (Доронин, Е. А., 2004; Ивановский А. А., 2006; Андреева, Н. Л., 2015). Пробиотики также являются заменой антибиотикам, и они не оказывают побочного воздействия на организм животных и микрофлору кишечника (Андреева, Н.Л., 2020). Их применение даёт возможность получить экологически чистую животноводческую продукцию, не содержащую следов антибиотиков. Бактерии, которые входят в состав пробиотических препаратов, способствуют улучшению резистентности организма животных, а также стимулируют их развитие и рост (Антипов В. А, 1981; Ноздрин, Г. А., 1997; Суворов А. Н., и соавт., 2003; Алешкин, В. А., и соавт., 2005; Исаев, В. В., и соавт., 2008; Бодиев, Р. Д., 2009; Shanahan, F., 2001; Reid G., 2002; Lakhtin, V. M., et.al., 2007).
На данный момент проводится большая работа по изучению этой проблемы и предложено множество различных схем лечения, но все ещё не удаётся достичь полной сохранности для молодняка. Вследствие этого разработка новых систем профилактики и лечения энтеритов телят с учетом их влияния на микрофлору пищеварительного тракта животных является важным и перспективным направлением.
Степень разработанности темы
Невзирая на тот момент, что на тему заболеваний желудочно – кишечного тракта молодняка животных, в том числе энтерита, написано и опубликовано множество работ как отечественных, так и зарубежных исследователей (Яшин, А. В., 2014; Сухинин, А. А., 2014; Калюжный, И. И., 2015; Батраков, А. Я., 2015; Ковалев, С. П., 2019; Курдеко, А. П., 2019; Щербаков Г. Г., 2021; Балабанова В. И., Кудряшов А. А., 2020; Требухов, А. В., 2021; Antoine, J. M., 2010; Dratwa-Chalupnik, А., 2012) данная проблема остаётся актуальной и в настоящее время.
Поэтому, в настоящих исследованиях изучалось действие новой схемы лечения и профилактики энтерита телят раннего постнатального периода с использованием лиофильно высушенной формы пробиотического препарата на основе штамма бактерий Enterococcus Faecium L-3.
Цель и задачи исследования
Цель исследования – изучить эффективность использования лиофильно высушенной формы пробиотического препарата на основе штамма бактерий Enterococcus Faecium L-3 для лечения и профилактики энтерита у телят.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить распространенность, этиологию и клиническое проявление энтеритов молодняка крупного рогатого скота в условиях
животноводческих хозяйств Ленинградской области;
2. Изучить влияние пробиотического препарата на организм телят при
лечении энтерита;
3. Изучить действие препарата на организм телят путем анализа
результатов морфологического, биохимического и иммунологического
исследования крови при профилактике энтерита;
4. Оценить влияние пробиотика на микрофлору желудочно-кишечного
тракта у телят; 5. Оценить экономическую эффективность профилактики и лечения энтерита у телят.
Научная новизна
Впервые при проведении комплекса лечебно – профилактических
мероприятий против энтерита телят использована лиофилизированная форма пробиотика на основе штамма микроорганизмов Enterococcus Faecium L-3 в дозировке 0,5 грамм в сутки с кормом. Было определено влияние этого пробиотического препарата на клинический статус телят, морфологические показатели крови, а также биохимические и иммунологические показатели сыворотки крови телят, микрофлору желудочно-кишечного тракта.
Теоретическая и практическая значимость работы
Благодаря проделанной исследовательской работе была установлена целесообразность введения лиофильно высушенной формы пробиотика на основе штамма микроорганизмов Enterococcus Faecium L-3 в комплекс профилактических мероприятий при энтерите телят, который позволяет повысить среднесуточные привесы и сохранность молодняка, а также способствует повышению устойчивости к желудочно-кишечным расстройствам.
Внедрения
Материалы научных исследований диссертации были внедрены в практику в животноводческом хозяйстве Ленинградской области ООО «Племенной завод Бугры». В учебный процесс на кафедре терапии и фармакологии ФГБОУ ВО Алтайский ГАУ, кафедре терапии и клинической диагностики с рентгенологией ФГБОУ ВО КГАВМ имени Н. Э. Баумана, кафедре незаразной патологии факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВО Белгородский ГАУ, кафедре внутренних болезней животных им. Синева А. В. ФГБОУ ВО СПБГУВМ.
Методология и методы исследования
Методологической основной настоящей работы является комплексный подход. При проведении исследований использовались основные клинические методы (осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация и термометрия) и специальные методы исследований (лабораторные – исследование крови, кала). По результатам проведенных экспериментов был проведен статистический сравнительный анализ полученных материалов.
Степень достоверности и апробация результатов
Достоверность результатов, проведённых исследований, выводов, положений и рекомендаций подтверждается использованием современных методов диагностики, качественной обработкой статистических данных и успешным внедрением результатов исследований как в теорию, так и в практику.
Материалы диссертации были доложены на следующих конференциях: 1) Международная научно-практическая конференция «Актуальные проблемы инновационного развития животноводства» (г. Брянск), 2019-2020 гг.; 2) Международная научно-практическая конференция «Проблемы и перспективы научно-инновационного обеспечения агропромышленного комплекса регионов» (г. Курск), 11-13 сентября 2019 г.; 3) Всероссийская (национальная) научная конференция «Роль аграрной науки в устойчивом развитии сельских территорий» (г. Новосибирск), 20 декабря 2019 г.; 4) Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны» (г. Санкт-Петербург), 2019-2021 гг.; 5) Национальная научно- практическая конференция, посвященная памяти доктора биологических наук, профессора Е. П. Ващекина «Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства» (г. Брянск), 22-23 января 2020 г.; 6) Национальная научная конференция профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПБГАВМ (г. Санкт-Петербург), 28-31 января 2020 г.; 7) 74-я международная научная конференция молодых учёных и студентов СПБГАВМ, посвященная 75-летию Победы в Великой Отечественной Войне (г. Санкт-Петербург), 06-15 апреля 2020 г. Публикации
По теме диссертации опубликовано 16 научных работ: в сборниках материалов всероссийских и международных конференций, центральных журналах и отдельных изданиях. В том числе: в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации для публикации основных результатов диссертации на соискание ученой степени доктора и кандидата наук – три статьи (Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии, Международный вестник ветеринарии).
Реализованный личный вклад
Диссертация является результатом исследования автора в период с 2018 по 2021 гг. Результаты исследований получены автором лично или при его определяющем участии. Вклад соискателя заключается в участии в выборе направления научных исследований, разработке цели и задач исследования, проведении экспериментов, обработке и анализе полученных данных, формулировании выводов и практических предложений. В статьях, опубликованных совместно с соавторами, большая часть работы выполнена диссертантом. Соавторы не возражают против использования данных результатов. Личный вклад составляет 90,0%.
Положения, выносимые на защиту
1. Распространенность, этиология и клиническое проявление энтеритов молодняка крупного рогатого скота;
2. Влияние лиофилизированного пробиотического препарата на основе штамма Enterococcus Faecium L-3 на морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови телят раннего постнатального периода при профилактике энтерита.
3. Состав микробиоты кишечника телят при применении пробиотика.
4. Результаты профилактики и лечения энтерита телят при
использовании лиофилизированного препарата. Структура и объём диссертации
Диссертация изложена на 138 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 23 рисунками и 14 таблицами. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы в количестве 238 источника, из которых 21 зарубежных авторов и приложений.

Заказать новую

Лучшие эксперты сервиса ждут твоего задания

от 5 000 ₽

Не подошла эта работа?
Закажи новую работу, сделанную по твоим требованиям

    Нажимая на кнопку, я соглашаюсь на обработку персональных данных и с правилами пользования Платформой

    Читать

    Публикации автора в научных журналах

    Результаты применения пробиотика на основе Enterococcus Faecium L-3
    М. Н. Лебедев, С. П. Ковалев // Вопросынормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2– № – С. 61
    Показатели микрофлоры кишечника телят при использовании пробиотика на основе штамма Enterococcus Faecium L-3
    М. Н.Лебедев, С. П. Ковалев // Международный вестник ветеринарии. – 2– № – С. 174
    Пробиотические препараты в профилактике энтерита у новорожденных телят
    М. Н. Лебедев // Актуальные проблемыинновационногоразвитияживотноводства: Международнаянаучно-практическая конференция, Брянск, 30–31 мая 2019 года. – Брянск: Брянскийгосударственный аграрный университет, 2– С. 84
    Результаты использования пробиотиков для профилактики энтеритов телят
    М. Н. Лебедев // Проблемы и перспективынаучно-инновационного обеспечения агропромышленного комплекса регионов:Сборник докладов Международной научно-практической конференции, Курск,11–13 сентября 2019 года. – Курск: Федеральное государственное бюджетноенаучное учреждение "Курский федеральный аграрный научный центр", 2–С. 618
    Динамика иммунологических показателей при профилактике энтерита у телят
    М. Н. Лебедев, С. П. Ковалев // Роль аграрнойнауки в устойчивом развитии сельских территорий: Сборник IV Всероссийской(национальной) научной конференции, Новосибирск, 20 декабря 2019 года. –Новосибирск: ИЦ НГАУ «Золотой колос», 2– С. 206
    Показатели крови телят при использовании пробиотика Enterococcus Faecium L-3
    М. Н. Лебедев // Знания молодых дляразвития ветеринарной медицины и АПК страны: материалы международнойнаучной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, Санкт-Петербург, 19–20 ноября 2019 года. – Санкт-Петербург: Санкт-Петербургскаягосударственная академия ветеринарной медицины, 2– С. 155
    Динамика иммунологических показателей у телят под действием пробиотика
    М. Н. Лебедев // Актуальные проблемыинтенсивного развития животноводства: Сборник научных трудовНациональной научно-практической конференции, посвященной памятидоктора биологических наук, профессора Е.П. Ващекина. – Брянск: БрянскийГАУ, 2– С. 132
    Клиническое проявление и профилактика пробиотиком энтерита у телят
    М. Н. Лебедев, С. П. Ковалев / Материалынациональной научной конференции профессорско-преподавательскогосостава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ, Санкт-Петербург, 28–31 января 2020 года. – Санкт-Петербург: Санкт-Петербургская государственнаяакадемия ветеринарной медицины, 2– С. 62
    Клинико-биохимические показатели крови при профилактике энтерита у телят
    М. Н. Лебедев // Актуальные проблемыинновационного развития животноводства: Сборник трудов международнойнаучно-практической конференции, Брянск, 28–29 мая 2020 года. – Брянск:Брянский государственный аграрный университет, 2– С. 42
    Иммунологические показатели крови телят при применении Enterococcus Faecium L-3
    М. Н. Лебедев // Знания молодых дляразвития ветеринарной медицины и АПК страны: Материалы международнойнаучной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, Санкт-Петербург, 19–20 ноября 2020 года. – Санкт-Петербург: Санкт-Петербургскийгосударственный университет ветеринарной медицины, 2– С. 218
    Динамика биохимических показателей крови телят при применении пробиотика
    М. Н. Лебедев // Материалы 74-й международнойнаучной конференции молодых ученых и студентов СПбГАВМ, посвященной75-летию Победы в Великой Отечественной войне, Санкт-Петербург, 06–15апреля 2020 года. – Санкт-Петербург: Санкт-Петербургская государственнаяакадемия ветеринарной медицины, 2– С. 136
    Некоторые показатели гуморального иммунитета у телят при лечении энтерита
    М. Н. Лебедев // Материалы X юбилейноймеждународной научной конференции студентов, аспирантов и молодыхученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПКстраны». – 2– С. 201
    Биохимический анализ крови телят при профилактике энтерита пробиотиком на основе штамма Enterococcus FaeciumL-3
    М. Н. Лебедев // Молодежь и инновации – 2020: МатериалыМеждународной научно-практической конференции молодых ученых. – Горки:Белорусская государственная сельскохозяйственная академия, 2– С. 119
    Некоторые показатели микрофлоры кишечника телят раннего постнатального периода при применении пробиотика
    М. Н.Лебедев // Материалы 75-й юбилейной международной научной конференциимолодых ученых и студентов СПбГУВМ, посвященной, объявленному в 2021году президентом РФ Путиным В. В., году науки и технологий, Санкт-Петербург, 05–09 апреля 2021 года. – Санкт-Петербург: Санкт-Петербургскийгосударственный университет ветеринарной медицины, 2– С. 122

    Помогаем с подготовкой сопроводительных документов

    Совместно разработаем индивидуальный план и выберем тему работы Подробнее
    Помощь в подготовке к кандидатскому экзамену и допуске к нему Подробнее
    Поможем в написании научных статей для публикации в журналах ВАК Подробнее
    Структурируем работу и напишем автореферат Подробнее

    Хочешь уникальную работу?

    Больше 3 000 экспертов уже готовы начать работу над твоим проектом!

    Оксана М. Восточноукраинский национальный университет, студент 4 - ...
    4.9 (37 отзывов)
    Возможно выполнение работ по правоведению и политологии. Имею высшее образование менеджера ВЭД и правоведа, защитила кандидатскую и докторскую диссертации по политоло... Читать все
    Возможно выполнение работ по правоведению и политологии. Имею высшее образование менеджера ВЭД и правоведа, защитила кандидатскую и докторскую диссертации по политологии.
    #Кандидатские #Магистерские
    68 Выполненных работ
    Александр О. Спб государственный университет 1972, мат - мех, преподав...
    4.9 (66 отзывов)
    Читаю лекции и веду занятия со студентами по матанализу, линейной алгебре и теории вероятностей. Защитил кандидатскую диссертацию по качественной теории дифференциальн... Читать все
    Читаю лекции и веду занятия со студентами по матанализу, линейной алгебре и теории вероятностей. Защитил кандидатскую диссертацию по качественной теории дифференциальных уравнений. Умею быстро и четко выполнять сложные вычислительные работ
    #Кандидатские #Магистерские
    117 Выполненных работ
    Кормчий В.
    4.3 (248 отзывов)
    Специализация: диссертации; дипломные и курсовые работы; научные статьи.
    Специализация: диссертации; дипломные и курсовые работы; научные статьи.
    #Кандидатские #Магистерские
    335 Выполненных работ
    Олег Н. Томский политехнический университет 2000, Инженерно-эконо...
    4.7 (96 отзывов)
    Здравствуйте! Опыт написания работ более 12 лет. За это время были успешно защищены более 2 500 написанных мною магистерских диссертаций, дипломов, курсовых работ. Явл... Читать все
    Здравствуйте! Опыт написания работ более 12 лет. За это время были успешно защищены более 2 500 написанных мною магистерских диссертаций, дипломов, курсовых работ. Являюсь действующим преподавателем одного из ВУЗов.
    #Кандидатские #Магистерские
    177 Выполненных работ
    Дарья С. Томский государственный университет 2010, Юридический, в...
    4.8 (13 отзывов)
    Практикую гражданское, семейное право. Преподаю указанные дисциплины в ВУЗе. Выполняла работы на заказ в течение двух лет. Обучалась в аспирантуре, подготовила диссерт... Читать все
    Практикую гражданское, семейное право. Преподаю указанные дисциплины в ВУЗе. Выполняла работы на заказ в течение двух лет. Обучалась в аспирантуре, подготовила диссертационное исследование, которое сейчас находится на рассмотрении в совете.
    #Кандидатские #Магистерские
    18 Выполненных работ
    Татьяна Б.
    4.6 (92 отзыва)
    Добрый день, работаю в сфере написания студенческих работ более 7 лет. Всегда довожу своих студентов до защиты с хорошими и отличными баллами (дипломы, магистерские ди... Читать все
    Добрый день, работаю в сфере написания студенческих работ более 7 лет. Всегда довожу своих студентов до защиты с хорошими и отличными баллами (дипломы, магистерские диссертации, курсовые работы средний балл - 4,5). Всегда на связи!
    #Кандидатские #Магистерские
    138 Выполненных работ
    Анна С. СФ ПГУ им. М.В. Ломоносова 2004, филологический, преподав...
    4.8 (9 отзывов)
    Преподаю англ язык более 10 лет, есть опыт работы в университете, школе и студии англ языка. Защитила кандидатскую диссертацию в 2009 году. Имею большой опыт написания... Читать все
    Преподаю англ язык более 10 лет, есть опыт работы в университете, школе и студии англ языка. Защитила кандидатскую диссертацию в 2009 году. Имею большой опыт написания и проверки (в качестве преподавателя) контрольных и курсовых работ.
    #Кандидатские #Магистерские
    16 Выполненных работ
    Анна Н. Государственный университет управления 2021, Экономика и ...
    0 (13 отзывов)
    Закончила ГУУ с отличием "Бухгалтерский учет, анализ и аудит". Выполнить разные работы: от рефератов до диссертаций. Также пишу доклады, делаю презентации, повышаю уни... Читать все
    Закончила ГУУ с отличием "Бухгалтерский учет, анализ и аудит". Выполнить разные работы: от рефератов до диссертаций. Также пишу доклады, делаю презентации, повышаю уникальности с нуля. Все работы оформляю в соответствии с ГОСТ.
    #Кандидатские #Магистерские
    0 Выполненных работ
    Александра С.
    5 (91 отзыв)
    Красный диплом референта-аналитика информационных ресурсов, 8 лет преподавания. Опыт написания работ вплоть до докторских диссертаций. Отдельно специализируюсь на повы... Читать все
    Красный диплом референта-аналитика информационных ресурсов, 8 лет преподавания. Опыт написания работ вплоть до докторских диссертаций. Отдельно специализируюсь на повышении уникальности текста и оформлении библиографических ссылок по ГОСТу.
    #Кандидатские #Магистерские
    132 Выполненных работы

    Последние выполненные заказы

    Другие учебные работы по предмету

    Патоморфология стафилококкоза поросят на репродукторной ферме
    📅 2022год
    🏢 ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»
    Морфология органов брюшной полости в норме и при эймериозах у кроликов
    📅 2022год
    🏢 ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»
    Предикторы рака молочной железы у кошек
    📅 2021год
    🏢 ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»
    Патоморфология стрептококкоза свиней в группах доращивания и откорма
    📅 2021год
    🏢 ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»