Полиморфизм генов GH, CAST, анализ ассоциаций их генотипов с показателями липидного обмена, иммунного статуса, продуктивности овец в онтогенезе

Научно-исследовательская работа проводилась в период 2018–2020 гг. на базе СПХ «Русь» Изобильненского района Ставропольского края на молодняке овец (ярки, n = 100) ставропольской породы.
Лабораторные исследования осуществлялись в лицензированных лабораториях иммуногенетики и ДНК-технологий, морфологии и качества продукции ВНИИОК – филиала ФГБНУ «Северо-Кавказский ФНАЦ» (г. Ставрополь).
Биоматериалом исследований была кровь опытных животных в возрасте 2; 4 и 8 месяцев. Молекулярно-генетические исследования – полиморфизм генов GH и CAST проводились на основе полимеразной цепной реакции – ПЦР на программируемом четырехканальном термоциклере «Терцик» фирмы «ДНК- технология» (Россия) с применением наборов GenePakPCRCore (IsoGeneLab, Москва) в объеме 20 мкл реакционной смеси с использованием специфических праймеров. Электрофоретическим методом определено число и длина фрагментов рестрикции. Полученные данные анализировались с помощью компьютерной системы гель-документирования. В качестве маркера молекулярных масс использовался стандартный набор М 50 Gene Pak DNA Markers (Iso Gene Lab).
Методом газожидкостной хроматографии в виде метиловых эфиров на газовом хроматографе «Кристалл 200» с капиллярной колонкой HP-FFAP 50 m 0,32 mm 0,5 pm (USA) определялся жирнокислотный состав липидов крови и мышечной ткани. Интенсивность, направленность липидного обмена учитывалась с использованием расчетных интегральных показателей: индекса насыщенности липидов – ИНЛ; индекса интенсивности обмена липидов – ИИОЛ; коэффициента эффективности метаболизации – КЭМ.
Особенности роста и развития молодняка, формирование его мясной продуктивности изучены на основе динамики живой массы, приростов, контрольного убоя животных, товарной оценки туш с использованием общепринятых зоотехнических методов и приемов.
Статистический анализ результатов исследований осуществлялся в соот- ветствии с методиками, предложенными Н.А. Плохинским (1980), Е.К. Мерку- рьевой (1970) с применением компьютерных программ BioStat, Excel.
Достоверность различий сравниваемых показателей по группам оценива- ли по критерию Стьюдента со следующим уровнем значимости:
р < 0,05; р < 0,01; р < 0,001. Общая схема исследований приведена на рисунке 1. Полиморфизм генов GH, CAST овец и анализ ассоциаций их генотипов с показателями липидного обмена, иммунного статуса, продуктивности Генотипы GHAA; GHВВ; GHAB CASTNN; CASTMM; CASTMN Ассоциативная связь Биохимические показатели Жирнокислотный состав липидов крови Жирнокислотный состав липидов мышечной ткани Иммунная реактивность Интегральные оценочные критерии Рисунок 1 – Общая схема исследований Живая масса, среднесуточный прирост 8 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Полиморфизм генов GH и CAST у ягнят ставропольской породы разных генотипов Анализом результатов генотипирования исследуемого молодняка установлено, что полиморфизм генов соматотропина – GH; кальпастатина – СAST представлен двумя аллелями: GHА – 0,88; GHВ – 0,12 и СASTМ – 0,82; СASTN – 0,18 (таблица 1). Таблица 1 – Аллельный спектр генов GH и CAST исследуемой популяции овец Ген GH CAST Частота встречаемости генотип аллель АА ВВ АВ А В 0,83 0,07 0,10 0,88 0,12 ММ NN MN М N 0,71 0,06 0,23 0,82 0,18 Частота встречаемости гомозиготных вариантов гена соматотропина (GHАА, GHВВ) варьировала от максимальных значений (0,83) – GHАА генотипа до минимальных (0,07) – GHВВ генотипа, встречаемость гетерозиготного GHАВ генотипа составила 0,10; частота встречаемости гомозиготных (СASTММ, СASTNN) составила 0,71 и 0,06 соответственно, гетерозиготного CASTMN варианта – 0,23. 3.1.1. Рост и развитие ягнят разных генотипов по генам GH и CAST Анализ показателей роста и развития – живой массы и среднесуточных приростов у ягнят разных генотипов выявил общебиологическую закономер- ность, сводившуюся к значительному увеличению изучаемых показателей в ранний период онтогенеза (2–4 мес.), к уменьшению в возрасте 8 месяцев (таблица 2). Таблица 2 – Показатели живой массы, среднесуточных приростов ягнят разных генотипов Живая Живая масса, кг Среднесуточный прирост, г масса возраст, мес. возраст, мес. Гены дении, кг прирож-2 4 8 2 4 8 GHAA 3,2±0,06 13,1±0,34 24,9±0,23 30,9±0,11 165,0±1,7 194,2±2,1 50,2±1,8 GHBB 3,4±0,02 13,7±0,23 25,4±0,24 32,1±0,29 172,0±1,8* 196,3±1,9 55,8±2,2 GHAB 3,3±0,08 12,9±0,34 23,3±0,35 31,7±0,23 160,0±1,5 173,3±1,6 70,0±2,5 CASTMM 3,3±0,07 13,2±0,29 24,4±0,26 30,1±0,29 164,0±1,5 184,7±1,7 47,5±1,8 CASTNN 3,3±0,07 14,0±0,33 25,2±0,28 33,1±0,31*** 178,9±1,8*** 186,7±1,8 65,8±2,2*** CASTMN 3,2±0,09 13,1±0,30 24,2±0,25 29,2±0,28 165,0±1,2 185,0±1,6 41,1±1,7 Примечания: * р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001. 9 Сопоставлением и анализом изученных показателей выявлено во все исследуемые периоды онтогенеза превосходство по величине живой массы и среднесуточных приростов генотипов GHBB и CASTNN, по сравнению с аналогами GHАА и CASTММ, составившее: в 2-мес. возрасте – 4,4; 4,07 и 5,7; 1,07, в 4-мес. –1,2; 1,07 и 3,2; 1,07, в 8-мес. – 3,7; 10,04 и 9,1; 27,81% соответственно (Р ˂ 0,01). 3.2. Иммунная реактивность ягнят разных генотипов Сравнительным анализом показателей, характеризующих иммунную ре- активность (Т-, В-лимфоциты), установлено, что у ягнят с генотипами GНВВ и CASTNN, по сравнению с аналогами GНАА и CASTMM, количество Т- и В-клеток, было выше и составило: 0,72 и 0,64; 0,56 и 0,38; против 0,61 и 0,48; 0,56 и 0,32 109/л соответственно (Р ˂ 0,01) (таблица 3). Таблица 3 – Показатели иммунной реактивности ягнят разных генотипов Ген Иммунная реактивность, 109/л ИРИ Т-хелперы 0,24±0,07 0,71 0,25±0,08 0,93 0,26±0,05 0,87 0,24±0,04 0,63 0,26±0,06 0,79 0,24±0,04 0,69 Генотип AA BB AB MM NN MN Т-лимфоциты 0,61±0,13 0,72±0,22 0,67±0,19 0,56 ±0,08 0,64 ±0,05 0,59±0,11 В-лимфоциты 0,48±0,08 0,56±0,09 0,51±0,11 0,32±0,04 0,38±0,06 0,34±0,07 Т-супрессоры 0,34±0,03 0,27±0,04 0,30±0,06 0,38±0,07 0,33±0,05 0,35±0,06 При этом в периферической крови ягнят GНВВ и CASTNN генотипов цир- кулировало больше Т-хелперов, но меньше Т-супрессоров, в сравнении с ана- логами GНАА и CASTMM, составившее: 0,25; 0,26 и 0,27; 0,33 109/л, против 0,24; 0,24 и 0,34; 0,38 109/л (Р ˂ 0,01). Что нашло отражение на величине иммуноре- гуляторного индекса (ИРИ) – отношение Т-хелперов к Т-супрессорам, который был выше в крови генотипов GНВВ и CASTNN, чем у GНАА и CASTMM: 0,93 и 0,79, против 0,71 и 0,69. 3.3. Жирнокислотный состав липидов крови Методом хроматографического анализа выявлено 10 жирных кислот: миристиновая С14:0, пентадекановая С15:0, пальмитиновая С16:0, гептадекановая С17:0, гептадеценовая С17:1, стеариновая С18:0, относящиеся к классу насыщенных (предельных), олеиновая С16:1, линолевая С18:2, линоленовая С18:3, арахидоновая С20:4 – к классу ненасыщенных. Сопоставлением и анализом концентрации изу- чаемых жирных кислот выявлена неоднозначность их уровня, зависящая как от возраста, так и от генотипа. CAST GH Установлено, что в периферической крови ягнят в возрасте 2 месяцев, независимо от генотипа, циркулировало сравнительно большее количество та- ких жирных кислот, как стеариновой С18:0, пальмитиновой С16:0, олеиновой С18:1, составившее соответственно: 44,18–46,87; 26,08–27,95; 12,19–12,61%, значительно меньше – миристиновой С14:2, линолевой С18:2, гептадеценовой С17:1: 2,24–4,60, 3,16–3,62, 0,74–1,43%, еще меньше – пентадекановой С15:0, арахидоновой С20:4, гептадекановой С17:0, линоленовой С18:3: 0,18–0,27, 0,18–0,45, 0,22–0,48%. Что нашло отражение в суммарном (Σ) их количестве в липидах крови исследуемых генотипов: (Σ) насыщенных GHAA; GHBB и CASTMM; CASTNN гено- типов: 76,88; 78,93 и 77, 33; 77,95%, (Σ) ненасыщенных: 17,87; 16,04 и 17,52; 16,10% соответственно (таблица 4). Таблица 4 – Суммарное количество жирных кислот липидов крови ягнят разных генотипов, % Генотип 2 мес. Показатели Σ насыщенных Σ мононенасыщенных 13,53±0,12 12,19±0,11 12,70±0,16 13,35±0,07 12,61±0,08 13,72±0,06 GH AA BB AB MM NN MN CAST 76,88±0,08 78,93±0,06 77,13±0,10 77,33±0,21 77,95±0,22 77,47±0,19 Σполиненасыщенных 4,34±0,05 3,85±0,04 4,52±0,06 4,17±0,11 3,59±0,10 3,80±0,08 4,42±0,07 1,95±0,06 0,06±0,07 69,15±0,22 17,20±0,10 10,3±0,09 2,51±0,04 1,44±0,03 0,24±0,02 ИНЛ ИИОЛ КЭМ Σ насыщенных Σ мононенасыщенных Σ полиненасыщенных ИНЛ ИИОЛ КЭМ Σ насыщенных Σ мононенасыщенных Σ полиненасыщенных ИНЛ ИИОЛ КЭМ 4,30±0,11 4,92±0,10 4,47±0,04 4,41±0,08 4,81±0,08 1,92±0,07 2,29±0,11 1,13±0,12 1,96±0,04 2,18±0,13 0,09±0,11 0,14±0,10 0,11±0,09 0,05±0,06 0,09±0,11 66,35±0,05 15,76±0,07 9,8±0,08 2,59±0,08 1,51±0,08 0,20±0,11 44,18±0,10 25,43±0,11 21,22±0,09 0,94±0,07 0,69±0,11 0,20±0,11 72,27±0,07 16,08±0,08 10,97±0,07 2,67±0,07 1,73±0,12 0,25±0,13 4 мес. 67,22±0,08 67,63±0,20 74,46±0,23 15,75±0,13 17,17±0,12 18,09±0,11 10,12±0,10 10,15±0,10 10,7±0,10 2,59±0,08 2,47±0,03 2,58±0,05 1,54±0,07 1,35±0,05 1,44±0,04 0,22±0,10 0,20±0,01 0,25±0,03 8 мес. 49,94±0,07 46,06±0,09 44,17±0,19 48,79±0,21 46,23±0,20 26,90±0,05 26,60±0,07 24,84±0,21 26,17±0,15 22,81±0,06 22,88±0,04 18,75±0,11 20,69±0,09 1,04±0,05 0,93±0,06 1,01±0,02 1,04±0,04 0,70±0,14 0,69±0,12 0,71±0,03 0,79±0,05 0,23±0,08 0,21±0,11 0,17±0,01 0,20±0,03 25,47±0,18 19,61±0,13 1,02±0,01 0,78±0,03 0,19±0,02 К 4-месячному возрасту у ягнят в жирнокислотном спектре липидов крови произошли значительные изменения: независимо от генотипа, почти в 3 раза увеличился уровень пентадекановой С16:0, гептадекановой С17:0, в 1,5 раза – олеиновой С18:1, в 2,5 раза – эссенциальных (линолевой С18:2, линоле- новой С18:3, арахидоновой С20:4) жирных кислот (Р ˂ 0,001). При этом уменьшилась концентрация таких кислот, как пальмитиновой С16:0, стеариновой С18:0 (Р ˂ 0,01), почти неизмененным остался уровень ми- ристиновой С14:0, гептодеценовой С17:1 жирных кислот (Р ˃ 0,05). Общее количество насыщенных и ненасыщенных жирных кислот в этот возрастной период составило: 66,35; 72,27 и 25,56; 27,06% – у GHAA и GHBB ге- нотипов, 67,63; 74,46 и 27,32; 28,79% – у CASTMM и CASTNN, соответственно. Особенностью жирнокислотного состава липидов крови ягнят в возрасте 8 месяцев, независимо от генотипа, было уменьшение, почти в 1,5 раза, концен- трации пальмитиновой С16:0, стеариновой С18:0, но увеличение олеиновой С18:2, арахидоновой С20:4, незначительно возрос уровень пентадекановой С15:0, гептадекановой С17:0, линоленовой С18:2. Суммарное количество (Σ) насыщенных и ненасыщенных жирных кислот у GHAA и GHBB генотипов соста- вило: 44,18; 49,94 и 44,17; 48,79%, у CASTMM и CASTNN генотипов – 46,65; 49,71 и 43,59; 46,86%. Анализом показателей, характеризующих интенсивность липидного об- мена, установлено, что цифровые значения индекса насыщенности липидов (ИНЛ), индекса интенсивности обмена липидов (ИИОЛ), коэффициента эффек- тивности метаболизации (КЭМ) были выше в липидах крови ягнят GHBB и CASTNN генотипов, чем у аналогов GHAA и CASTMM, составившие соответствен- но: в 2 мес. – 4,92; 2,29; 0,14 и 4,81; 2,18; 0,09, против 4,30; 1,92; 0,09 и 4,41; 1,96; 0,09, в 4 мес. – 2,67; 1,73; 0,25 и 2,58; 1,44; 0,25, против 2,59; 1,51; 0,20 и 2,47; 1,35; 0,20, в 8 мес. – 1,04; 0,70; 0,23 и 1,04; 0,79; 0,20, против 0,94; 0,69; 0,20 и 1,01; 0,71; 0,17% (Р ˂ 0,01). Полученные результаты, их анализ позволяют заключить, что жирно- кислотный состав липидов крови изменяется не только с возрастом, но и в за- висимости от определенного соотношения анализируемых жирных кислот у разных генотипов. 3.4. Жирнокислотный состав липидов мышечной ткани молодняка овец разных генотипов Оценивая жирнокислотный состав липидов мышечной ткани в целом, следует отметить, что по качественным характеристикам, независимо от ге- нотипа, он был идентичен, но по количеству отдельных жирных кислот вы- явлены различия. При сопоставлении и анализе жирнокислотного состава липидов мышечной ткани овец разных генотипов установлено, что концен- трация изучаемых кислот зависела как от структуры кислоты, так и от гено- типа животных. Суммарное количество (Σ) насыщенных жирных кислот в липидах мышечной ткани ягнят CASTNN генотипа составило: 53,79, аналогов CASTMM генотипа – 40,51%, ненасыщенных – 55,52, против 47,23% – аналогов CASTMM (Р ˂ 0,01) (таблица 5). Выявленная закономерность нашла отражение в величине констант, характеризующих уровень липидного обмена – ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ. Сравни- тельный анализ величины интегральных показателей липидного обмена в мышцах ягнят CASTNN и CASTMM генотипов выявил достоверные различия. Таблица 5 – Содержание жирных кислот в липидах мышечной ткани ягнят разных генотипов (8 мес.), % Показатели Σ насыщенные Σ мононенасыщенные Σ полиненасыщенные ИНЛ ИИОЛ КЭМ CASTMM 40,51±3,81 43,03±4,21 4,20±1,98 0,857±0,064 0,351±0,075 0,271±0,047 Генотип CASTNN 53,79±4,91 50,12±4,58 5,40±2,12 0,968±0,072 0,418±0,088 0,308±0,036 CASTMN 45,55±4,68 46,66±4,05 4,69±2,06 0,887±0,066 0,353±0,072 0,327±0,051 Так, величина ИНЛ генотипа CASTNN составила 0,968, против 0,857 генотипа CASTMM, что свидетельствует о более высокой насыщенности липи- дов мышечной ткани ягнят CASTNN, чем аналогов CASTMM (Р ˂ 0,01). Интен- сивность обмена липидов, выраженная через ИИОЛ, в мышцах ягнят CASTNN генотипа составила 0,418, против 0,351 – CASTMM генотипа (Р ˂ 0,01). Эф- фективность метаболизации эссенциальных жирных кислот в мышцах мо- лодняка CASTNN генотипа составила 0,308, против 0,271 – CASTMM (Р ˂ 0,01). 3.5. Ассоциативная связь между изучаемыми признаками молодняка овец разных генотипов При рассмотрении корреляционных взаимоотношений между сравни- ваемыми признаками установлена неоднозначность их взаимоотношений. Корреляционный анализ выявил тесную, однонаправленную, положительную по знаку взаимосвязь между общим количеством как насыщенных, так и моно-, полиненасыщенных жирных кислот в липидах крови ягнят исследуе- мых генотипов. Характер связи зависел как от рассматриваемого признака, так и от генотипа животных. При однотипности характера взаимоотношений, сводившейся к тес- ной, однонаправленной положительной связи между сравниваемыми призна- ками, цифровыми значениями коэффициента корреляции (Σ) насыщенных, (Σ) моно-, (Σ) полиненасыщенных жирных кислот с ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ были достоверно выше у генотипов GHBB и CASTNN, чем аналогов GHAA и CASTMM, составившее соответственно: R = 0,22 и 0,20; R = 0,18 и 0,26; R = 0,21 и 0,24; R=0,28 и 0,30; R=0,31 и 0,36; R=0,38 и 0,41, против R=0,18 и 0,19; R=0,15 и 0,14; R=0,17 и 0,18; R=0,24 и 0,24; R=0,26 и 0,28; R=0,29 и 0,33 (таблица 6). Наиболее высокой коррелятивная связь была с ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ, со- ставившая соответственно: R = 0,28 и 0,30; R = 0,31 и 0,36; R = 0,38 и 0,41 – у GHBB и CASTNN генотипов, против R = 0,24 и 0,24; R = 0,26 и 0,28; R = 0,29 и 0,33 – GHAA и CASTMM генотипов (Р ˂ 0,05; Р ˂ 0,01). 13 Таблица 6 – Корреляционная связь между интегральными показателями липидного обмена ягнят разных генотипов, % Корреляционные признаки Σ насыщенных жирных кислот Σ мононенасыщенных жирных кислот Σ полиненасыщенных жирных кислот ИНЛ ИИОЛ КЭМ Генотипы GH AA BB NN 0,18 0,22 0,20 0,15 0,18 0,26 0,17 0,21 0,24 0,24 0,28 0,30 0,26 0,31 0,36 0,29 0,38 0,41 (таблица 7). CAST MM 0,19 0,14 0,18 0,24 0,28 0,33 Корреляционный анализ выявил однонаправленную, положительную связь эссенциальных жирных кислот (С18:2, С18:3, С20:4) с живой массой, среднесуточными приростами, характер которой был однотипным, но в зна- чительной мере зависел от генотипа животных Таблица 7 – Коэффициенты корреляции эссенциальных жирных кислот липидов крови с живой массой и среднесуточными приростами молодняка овец разных генотипов, Эссенциальные жирные кислоты Линолевая, С18:2 Линоленовая, С18:3 Арахидоновая, С20:4 Линолевая, С18:2 Линоленовая, С18:3 Арахидоновая, С20:4 Генотипы GHAA GHBB CASTNN CASTMM Живая масса 0,10 0,12 0,14 0,11 0,12 0,14 0,19 0,16 0,16 0,19 0,21 0,18 Среднесуточные приросты 0,13 0,17 0,18 0,15 0,19 0,22 0,24 0,29 0,21 0,24 0,26 0,20 Как правило, цифровые значения коэффициента корреляции были бо- лее значимы у (Р ˂ 0,05; Р ˂ 0,01). Установлено, что, независимо от генотипа, изменчивость количества иммунных клеток (Т-; В-лимфоцитов) была достоверно выше. GHBB и CASTNN генотипов, чем у аналогов GHAA и CASTMM, со- ставившие соответственно: R = 0,12–0,14 и R = 0,17–0,18; R = 0,14–0,19 и R = 0,22–0,24; R = 0,19–0,21 и R = 0,24–0,26, против R = 0,10–0,11 и R = 0,13– 0,15; R = 0,12–0,16 и R = 0,19–0,20; R = 0,16–0,18 и R = 0,21–0,20 При изучении ассоциативной связи иммунной реактивности с показа- телями жирнокислотного состава крови ягнят разных генотипов, прежде все- го, была рассмотрена степень изменчивости сравниваемых показателей – ко- личество Т-, В-клеток, их субпопуляций (Т-супрессоров, Т-хелперов), в кро- ви исследуемых генотипов, а также уровень липидного обмена, выраженный через интегральные показатели – ИНЛ, ИИОЛ и КЭМ. Высокая вариативность клеток иммунного ответа, вероятно, зависела не только от их количества в кровяном русле, но и от их специфической роли в формирование иммунитета. Относительно невысокая изменчивость уровня субпопуляций (Т-супрессоров и Т-хелперов), по-видимому, связана с их им- мунно-биологическими свойствами, резкое изменение количества привело бы к нарушению иммунорегуляторных реакций, выраженных через индекс иммун- ной реактивности – ИРИ. На основании данных о вариативности изучаемых признаков выявлена степень их взаимосвязи, выраженная через коэффициенты корреляции. Установлена, независимо от генотипа, устойчивая положительная связь между сравнительными признаками, но наиболее значимой она была у ягнят GHBB и CASTNN генотипов, по сравнению с GHAA и CASTMM, составив: R=0,33 и R=0,36 – для ИРИ; R=0,28 и R=0,37 – для ИНЛ; R=0,36 и R=0,31 – для ИИОЛ; R=0,43 и R=0,48 – для КЭМ, против R=0,28 и R=0,24; R=0,21 и R=0,29; R=0,29 и R=0,36; R=0,38 R=0,36 соответ- ственно (Р ˂ 0,05; Р ˂ 0,01) (таблица 8). Таблица 8 – Коррелятивная связь иммунной реактивности и интегральных показателей липидного обмена ягнят разных генотипов, % Показатель ИРИ Σпредельных/Σнепредельных = ИНЛ ИИОЛ КЭМ Генотипы GHAA GHBB CASTNN CASTMM 0,28 0,33 0,36 0,24 0,21 0,28 0,37 0,29 0,29 0,36 0,31 0,26 0,38 0,43 0,48 0,36 Для суждения о том, насколько изменчивость каждого из сравнивае- мых признаков находится в соответствии с изменчивостью другого, рассмот- рена направленность и степень корреляционных взаимоотношений суммар- ного количества насыщенных, моно-, полиненасыщенных жирных кислот липидов мышечной ткани овец разных генотипов. Корреляционный анализ выявил, независимо от генотипа, устойчивую однонаправленную связь между изучаемыми показателями, CASTNN генотипов, по сравнению с CASTMM R=0,28; R=0,33; R=0,44, против R=0,19 R=0,29 R=0,36 (Р ˂ 0,01) (таблица 9). Таблица 9 –Коэффициенты корреляции общего количества жирных кислот липидов мышечной ткани ягнят разных генотипов но более значи- мой она была у , составившая со- ответственно: Σ жирных кислот, % Генотипы CASTNN Σ насыщенных 0,28 Σ мононенасыщенных 0,33 Σ полиненасыщенных 0,44 CASTMM 0,29 0,29 0,36 15 При рассмотрении вопроса о взаимосвязи интегральных показателей липидного обмена крови (ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ) исследуемых генотипов в раз- ных биосредах в крови и мышечной ткани, установлена относительно невы- сокая изменчивость изучаемых показателей как в липидах крови, так и мы- шечной ткани ягнят исследуемых генотипов, составившая: ИНЛ для крови – 10,8 и 13,6, для мышечной ткани – 11,3 и 8,9%, ИИОЛ соответственно – 8,8 и 11,46%, но наименьшей она была характерна для КЭМ: 6,4 и 8,1 – в липидах крови, 5,9 и 7,0% – в липидах мышечной ткани. Особенно четко выявленная закономерность прослеживается в изучаемых биосредах молодняка генотипа, по сравнению с аналогами (Р ˂ 0,01). CASTNN CASTMM: 6,4 и 5,9 против 8,1 и 7,3% Анализ полученных данных свидетельствует об однонаправленности характера связи изучаемых признаков, зависящей как от показателя, так и от генотипа. Наименьшие цифровые значения коэффициента корреляции (R = 0,19– 0,16 и R = 0,22–0,18) были характерны для ИНЛ. Однонаправленная, тесная связь со средней степенью корреляции выявлена с ИИОЛ, составившая: R = 0,26–0,22 и R = 0,29–0,24. Самой высокой коррелятивная зависимость установлена для КЭМ, составившая R = 0,34–0,38 и R = 0,29–0,31. При этом, как правило, достоверно выше она была характерна для молодняка генотипа, по сравнению с , составив соответственно R = 0,34 и R = 0,38 против R = 0,29 и R = 0,31 CASTMM (Р ˂ 0,01) (таблица 10). Таблица 10 – Коэффициенты корреляции интегральных показателей в различных биосредах овец разных генотипов CASTNN Генотипы CASTNN CASTMM 0,19 0,16 0,26 0,22 0,34 0,29 0,22 0,18 0,29 0,24 0,38 0,31 Биосреда Кровь Мышечная ткань Показатели Σ предельных/Σ непредельных=ИНЛ ИИОЛ КЭМ Σ предельных/Σ непредельных=ИНЛ ИИОЛ КЭМ Полученные результаты, их анализ позволяют предположить, что между метаболизацией жирных кислот липидов крови, мышечной ткани, уровнем иммунной реактивности, ростом и развитием ягнят в постэмбрио- нальном онтогенезе существует тесная взаимозависимость с той генетиче- ской программы, которая обеспечивает и контролирует направленность био- химических процессов, в частности липидного обмена. 3.6.1. Мясная продуктивность молодняка овец разных генотипов Убойные показатели ягнят разных генотипов. Сравнительным ана- лизом изучаемых показателей установлено превосходство ярок генотипа CASTNN над аналогами CASTMM, составившее по предубойной массе 10,0% (3 кг), убойной массе 12,01% (15,32), массе парной туши 13,0% (1,8 кг). Преимущество по убойному выходу составило 46,3% или на 1,5 абс. процент (таблица 11). Таблица 11 – Результаты контрольного убоя ярок разных генотипов (n = 6) Показатели Предубойная живая масса, кг Убойная масса, кг Убойный выход, % Масса после голодной выдержки, кг Масса парной туши, кг Выход туши, % Масса внутреннего жира, кг Масса остывшей туши, кг Масса мяса-мякоти, кг Выход мяса-мякоти, % Масса костей и сухожилий, кг Выход костей и сухожилий, % Коэффициент мясности Примечания: * р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001. CASTNN 33,1±0,31** 15,32±0,12*** 46,3 32,8±0,15*** 14,7±0,12*** 44,4 0,62±0,01* 13,91±0,11** 10,41±0,15*** 74,8 3,50±0,07 25,2 2,97 CASTMM 30,1±0,25 13,48±0,14 44,8 29,3±0,27 12,9±0,14 42,9 0,58±0,03 12,20±0,13 8,87±0,16 72,7 3,33±0,05 27,3 2,67 Морфологический сoстав туши. Сравнительный анализ морфологи- ческого состава туш ягнят исследуемых генотипов выявил, что такие показа- тели как масса остывшей туши, выход мяса-мякоти, коэффициент мясности были достоверно выше у CASTNN генотипа, чем у CASTMM, составившие: 13,91; 74,8; 2,97, против 12,20; 72,7; 2,67 (Р ˂ 0,05). Химический состав мяса. В мышечной ткани ягнят генотипа CASTNN было на 1,2 абс. процента меньше содержания жира, но больше влаги и про- теина, на 0,9 и 0,5 абс. процента, чем у аналогов CASTММ генотипа (таблица 12). Таблица 12 – Химический состав туш ярок разных генотипов (n = 6) Показатели Влага,% Жир, % Белок, % Зола, % Сухое вещество Калорийность ккал/мДж CASTNN 62,8±1,15 17,2±0,95 19,3±1,86 0,7±0,02 37,2 2390,9 9,8 CASTMM 61,9±1,35 18,4±1,10 18,8±1,18 0,9±0,03 38,1 2481,2 10,2 17 Выявленные различия в содержании белка и жира в мясе исследуемых генотипов отразились на его калорийности: наибольшей на 3,9% она была в мясе CASTMМ генотипа. Биoхимические показатели мяса. О биологической ценности судили по количеству в мышечной ткани аминокислот – триптофана, оксипролина и по их соотношению (таблица 13). Таблица 13 – Биохимические показатели мышечной ткани овец разных генотипов Показатели Триптофан, мг % Оксипролин, мг % Белково-качественный показатель (БКП) CASTNN 237,37 96,52 2,46 CASTMM 208,48 112,27 1,86 Полученные результаты, их анализ свидетельствуют о достоверно большем уровне незаменимой аминокислоты триптофана в мышечной ткани ярок CASTNN генотипа – 237,7, но меньше оксипролина – по сравнению с CASTMM генотипом – 96,52, 208,48; 112,27 мг%. Что нашло отражение в вели- чине белково-качественного показателя (БКП) составившей соответственно 2,46, против 1,86. Микроструктурный гистологический анализ мяса. Анализом ре- зультатов морфометрических исследований установлено, что в мышечной ткани ярок CASTNN генотипа, по сравнению с аналогом CASTMM, было досто- верно меньшее количество мышечных волокон на 9,8%, соединительной тка- ни – на 6,18 абс. процента, но больший диаметр мышечных волокон: на 9,7% (таблица 14). Таблица 14 – Результаты морфометрических исследований длиннейшей мышцы спины ярок разных генотипов Показатели Количество мышечных волокон на 1 мм2 Диаметр мышечных волокон, мкм Общая оценка «мраморности», в баллах Содержание соединительной ткани, % Примечания: * р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001. CASTNN 245,77±5,4 37,66±1,5* 32,41±1,0** 10,92 CASTMM 269,77±4,8* 34,0±0,5 27,17±1,0 17,10 При общей бальной оценке «мраморности» мяса исследуемых геноти- пов она оказалась выше на 16,2% – у CASTNN генотипа, составившая 32,41 против 27,17 баллов. 3.7. Экономическая эффективность Расчет экономической эффективности выращивания и реализации ягнят разных генотипов, находящихся в одинаковых условиях кормления и содержа- ния, проводился на основании суммарных затрат на производство продук- ции, данных о приростах живой массы и выручки от реализации продукции в течение опытного периода по ценам, сложившимся на год исследований (таблицы 15, 16). Затраты на содержание одной головы исследуемых животных соста- вили 3850 рублей, средняя стоимость 1 кг мяса в живой массе – 130 руб. Так как средняя реализационная цена 1 кг живой массы продукции зависит от живой массы животных, то, соответственно, доход на 1 голову от ярок гено- типа GHBB составил 4137 руб., что на 156 руб., или 3,9%, больше, чем от ярок – носителей генотипа GHAA, что нашло отражение в рентабельности их вы- ращивания: 8,4 – GHBB генотипа, 4,3% – GHAA. Таблица 15– Эффективность выращивания ягнят разных генотипов Показатели Живая масса, 8 мес., кг Стоимость 1 кг мяса в живом весе, руб. Стоимость всей продукции, руб. Затраты на содержание 1 головы, руб. Прибыль, руб. Рентабельность, % GHAA CHBB 30,9 32,1 130 130 4017 4173,0 3850 3850 167 323,0 4,3 8,4 Таблица 16 – Эффективность реализации на мясо ягнят разных генотипов (8 месяцев) Показатели Затраты на выращивание, руб. Убойная масса, кг Стоимость 1 кг мяса, руб. Выручка от реализации мяса, руб. Прибыль, руб. Рентабельность, % (±) Прибыль от реализации на мясо ярок генотипа СASTNN была на 533,6 руб. или на 13,6% выше, чем ягнят СASTММ генотипа, рентабельность при реа- лизации на мясо ярок СASTNN генотипа, составила 15,4%. СASTNN СASTММ 3850 3850 15,32 13,48 290 290 4442,8 592,8 59,2 3909,2 15,4 1,5 19 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Основные результаты исследований позволяют сделать следующие вы- воды: 1. соответственно. 2. GHВВ и СASTNN 2,67 и 2,58, 1,73 и 1,44, 0,25 и 0,25, в 8 мес. – 1,04 и 1,04, 0,70 и 0,79, 0,23 и 0,20, против в 2 мес. – 4,30 и 4,41; 1,92 и 1,96; 0,09 и 0,05, в 4 мес. – 2,59 и 2,47, 1,51 и 1,35, 0,20 и 0,20, в 8 мес. – 0,94 и 1,01, 0,69 и 0,71, 0,20 и 0,17% по сравнению с аналогами GHАА и СASTMM (Р˂0,05; Р˂0,01; Р˂0,001). 3. у генотипов GHBB и CASTNN, по сравнению с аналогами GHАА и CASTММ, составившая: в возрасте 2 мес.– 4,4; 4,07 и 5,7; 1,07, в 4 мес. –1,2; 1,07 и 3,2; 1,07, в 8 мес. – 3,7; 10,04 и 9,1; 27,81% соответственно (Р ˂ 0,05; Р ˂ 0,01; Р ˂ 0,001). 4. Установленное п Полиморфизм генов GH, СAST популяции овец ставропольской породы представлен двумя аллелями и тремя генотипами с разной частотой встречаемости – GHA – 0,88; GHB – 0,12; CASTN – 0,18; CASTM – 0,82 и GHAA – 0,83; GHBB –0,07; GHAB – 0,10; CASTNN – 0,06; CASTMM –0,71; CASTMN – 0,23, Установлены онтогенетические особенности формирования жир- нокислотного спектра липидов крови, зависящего как от возраста, так и гено- типа ягнят, выразившиеся в величинах интегральных показателей интенсив- ности липидного обмена – ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ, составившие: в липидах крови генотипов, соответственно: в 2 мес. – 4,92 и 4,81; 2,29 и 2,18; 0,14 и 0,09, в 4 мес. – Однонаправленная, положительная корреляционная связь между эссенциальными жирными кислотами и величиной живой массы, среднесу- точных приростов была достоверно выше реимущество уровня индекса иммунной реак- GHАА и CASTММ, тивности – ИРИ ягнят над аналогами сопро- вождалось большей величиной ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ, выраженной в положи- тельной коррелятивной связи, составившей: R = 0,43 и 0,48; R = 0,36 и 0,31; R=0,28 и 0,37, против R=0,38 и 0,36; R=0,29 и 0,26; R=0,21 и 0,29 (Р ˂ 0,01; Р ˂ 0,001). 5. СASTNN и CASTММ (Р ˂ 0,01). 6. GHВВ и СASTNN СASTNN CASTММ Жирнокислотный состав липидов мышечной ткани исследуемых генотипов был идентичен, но величина ИНЛ, ИИОЛ, КЭМ зависела от доли насыщенных, ненасыщенных жирных кислот, составившая: 0,94; 0,42; 0,31 – у генотипов, против 0,84; 0,35; 0,27 – Установлена однонаправленная положительная высокодостовер- ная связь между интегральными показателями липидного обмена крови и мышечной ткани, составившая: R = 0,19 и 0,22; R = 0,26 и 0,29; R = 0,34 и 0,38 – генотип , против R = 0,16 и 0,18; R = 0,22 и 0,24; R = 0,29 и 0,31 СASTNN – CASTММ. 7. Прибыль от реализации на мясо ярок генотипа СASTNN была на 13,6% выше, чем ягнят СASTММ генотипа, рентабельность при реализации на мясо ярок СASTNN генотипа, составила 15,4%. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ Для выявления особо ценных животных в племенных стадах овец рекомендуется: –осуществлять генотипирование по выявлению носителей генных маркеров; –на основании полученных данных в группы для селекции рекомендуем отбирать животных носителей аллелей B и N, соответственно в генах GH и СAST. Для достижения селекционных целей желательные аллели должны присутствовать в обоих генах в гомозиготном состоянии; –проводить прижизненную оценку мясной продуктивности, качества мяса на основе биохимических интегральных показателей крови в раннем возрасте. ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ Планируем в своих исследованиях продолжить поиск новых генетиче- ских маркеров продуктивности у овец отечественных пород, что позволит проводить оценку и прогнозирование продуктивных качеств в период пост- натального онтогенеза и значительно увеличит эффективность селекционной работы племенных хозяйств. Полученные данные будут носить теоретическое и практическое зна- чение, позволят создавать тест-системы для ранней диагностики хозяйствен- но-ценных признаков и разрабатывать современные рекомендации по оценке овец различных направлений продуктивности.